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《中国医科大学》 2006年
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远端胃癌和贲门癌中杂合性丢失的差异研究

满晓辉  
【摘要】:肿瘤的发生是一个多阶段的过程,是各种遗传改变累积的结果,涉及癌基因的激活和肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene,TSG)的失活。根据Knudson的TSG失活形式的理论,检测肿瘤细胞染色体上特定DNA多态标记,分析杂合性丢失(loss of heterozygosity,LOH)已成为目前检测TSG失活和发现及定位新的TSG的重要手段之一。胃癌是一种异质性的肿瘤,远端胃癌(adenocarcinoma of distal stomach,ADS)和贲门癌(adenocarcinoma of gastric cardia,AGC)分别具有其独特的生物学和流行病学特征,提示这两种肿瘤发生的遗传学机制可能是不同的,因此探讨ADS和AGC相关基因是阐明其发生分子机制,进行特异性的诊断和治疗的前提。 最近的比较基因组杂交(comparative genome hybridization,CGH)及LOH研究显示ADS和AGC中染色体4q和8p21-p23缺失频率较高,提示染色体4q和8p21-p23上可能存在与ADS和AGC发生相关的TSG。要证实或发现染色体4q和8p21-p23区域内的与ADS和AGC发生相关的TSG,还需进一步精细限定这两种肿瘤患者在这两个染色体区域内的LOH频率及范围。在本文研究中,我们首先采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术对肿瘤患者手术组织标本中正常的胃粘膜细胞及相应的肿瘤细胞进行特异性的捕获,去除组织异质性因素后利用多重置换扩增技术(multiple displacement amplification,MDA)对LCM捕获细胞DNA进行高质量的全基因组扩增(whole genome amplification,WGA),进而利用扩增产物进行LOH分析。我们的前期研究结果显示WGA产物用于LOH分析的结果是可靠的。本文中,我们选择了15个定位于染色体4q上的微卫星多态标记,13个定位于8p21-p23区域的微卫星多态性标记,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)结合硝酸银染色的方法分析了30例ADS和16例AGC手术切除标本的LOH情况,以期确定与ADS
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R735.2

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