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《中国医科大学》 2007年
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超声血管回声跟踪技术评价兔动脉粥样硬化血管弹性的实验研究

薛莉  
【摘要】: 前言 动脉弹性功能减退已经成为心血管危险的重要标记之一,不仅是收缩压、舒张压和脉压水平的重要决定因素,而且在一定程度上反映了动脉内皮功能状况。内皮功能障碍是早期动脉粥样硬化发生的始动因素,并在病变的整个过程中持续存在。探察血管内皮功能和血管弹性之间的相关关系,寻找内皮功能的替代指标,在动脉粥样硬化病变早期,尤其是在形态学改变之前能更敏感、便捷、准确地发现血管功能异常,及时干预治疗,使其病变可逆对真正实现血管病变的一级预防有重要的价值和意义。本研究应用超声血管回声跟踪技术评价动脉粥样硬化兔弹性动脉和肌性动脉在高脂喂养的不同时期血管弹性和内皮功能的变化特点以及二者之间的相关关系,同时进行病理光镜观察,以期为超声评价血管弹性和内皮功能提供形态学上的依据,以及评价辛伐他汀对动脉粥样硬化兔血管弹性和内皮功能干预效果以及其对血管壁诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的效用。 材料与方法 1、国产纯种大耳白兔6只,体重2.5±0.5g,喂普通颗粒饲料。右侧股动脉近端穿刺,连接有创测压模块监护仪,监测血压和心率的同时,同时做为体外注入药物的渠道。应用日本ALOKA Prosoundα-10彩超仪,选择股动脉上中段作为取样区,选择频率为13MHz的高频线阵探头检测并显示股动脉长轴,使声束与动脉壁垂直,获得动脉内径最大和最佳图像时,启动ET软件操作界面和分析系统,调至B/M模式,将取样门分别置于股动脉前壁和后壁的中-外膜交界处,在股动脉注入L-NMMA、ACH、GTN后,机器自动显示股动脉血管弹性指标β、Ep、AC、PWVβ的测值。 2、国产纯种大耳白兔24只,重2.5g±0.5g,随机分成4组,正常对照组(A组)6只和高脂组(B组)18只,其中高脂组又分为喂养4周组6只、8周组6只、12周组6只。A组喂普通颗粒饲料,B组全天饲以高脂饲料,高脂饲料为10%蛋黄粉、5%大油、1%胆固醇与84%普通饲料混合。应用ALOKA Prosoundα-10彩色超声诊断仪,探头频率13MHz。右侧股动脉近端穿刺,连接有创测压模块监护仪,作用同前述。超声观察高脂喂养不同时期兔内皮功能与腹主动脉、股动脉的血管弹性,内皮功能包括内皮依赖性舒张功能(EDD)和非内皮依赖性舒张功能(NEDD),于心电图T波末测定其内径(D),D为前后壁内膜管腔界面间的垂直距离,先测量基础内径(D_0),随后测量滴注ACH后的血管最大内径(D_1),滴注GTN后的血管最大内径(D_2),(EDD):EDD=(D_1-D_0)/D_0×100%,NEDD=(D_2-D_0)/D_0×100%。血管弹性操作方法及指标同前述。酶法测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。并同期进行了腹主动脉和股动脉的甲醛固定、组织切片、HE染色、光镜观察。 3、国产纯种大耳白兔42只,体重2.5g±0.5g,随机分成3组,正常对照组(A组)6只、高脂组(B组)18只、干预组(C组)6只。A组喂普通颗粒饲料,B组全天饲以高脂饲料,高脂饲料为10%蛋黄粉、5%大油、1%胆固醇与84%普通饲料混合,C组喂饲高脂饲料4周后加服辛伐他汀10mg/kg。应用ALOKAProsoundα-10彩色超声诊断仪,探头频率13MHz。右侧股动脉近端穿刺,连接有创测压模块监护仪,作用同前述。超声检测各组兔不同喂养时期的血管内皮功能和血管弹性,方法同前述。酶法检测TC、TG、HDL-C、LDL-C。应用抗兔iNOS、eNOS多克隆抗体,采用ABC免疫组化方法观察腹主动脉和股动脉iNOS、eNOS蛋白的表达。 实验结果 1、将L-NMMA注入正常兔股动脉的远端和近端后,均未影响收缩压、舒张压、平均动脉压和心率(P>0.05)。将L-NMMA注入兔股动脉近端后,股动脉近端的血管弹性较静息时减低(P<0.05)。单独注入ACH后股动脉弹性较静息时明显增强(P<0.05),将L-NMMA和ACH同时注入后,股动脉弹性和静息时比较无统计学差异(P>0.05)。单独注入GTN至股动脉近端后,其弹性指标测值较静息时提高(P<0.05),将L-NMMA和GTN同时注入股动脉近端后,其弹性指标测值亦较静息时提高(P<0.05)。 2、高脂喂养兔第4周,TC、LDL-C明显升高,HDL-C明显减低,具有统计学意义。高脂组内皮依赖性舒张功能障碍于喂养第4周即可出现,内皮非依赖性舒张功能障碍于喂养第12周即可出现。高脂喂养组第12周兔腹主动脉开始血管弹性减低(P<0.05)。高脂喂养组第4周兔股动脉血管弹性即出现异常,随着喂养时间的延长,弹性呈现渐进性减低(P<0.05)。高脂喂养第4周组兔内皮依赖性舒张功能与腹主动脉弹性不相关(P>0.05),与股动脉弹性相关(P<0.05)。高脂喂养第4周时无光镜改变,8周时出现光镜改变,12周改变进一步加重,血管壁iNOS、eNOS蛋白表达增多。 3、辛伐他汀干预后治疗组血脂水平、EDD、NEDD、腹主动脉弹性、股动脉弹性均较AS组提高(P<0.05)。光镜观察治疗组动脉病变较AS组明显减轻,血管壁iNOS、eNOS蛋白表达减少。 结论 1、基础状态下NO可对股动脉(肌性动脉)的扩张性进行调节。激发状态下(即注入乙酰胆碱和硝酸甘油后)NO可对股动脉(肌性动脉)扩张性进行调节。乙酰胆碱对大动脉的作用主要基于NO的效应。 2、高脂兔内皮依赖性舒张功能损害出现在非内皮依赖性舒张功能损害之前。高脂兔股动脉(肌性动脉)弹性减低出现在病理光镜下形态学改变之前。高脂兔腹主动脉(弹性动脉)弹性减低出现在病理光镜下形态学改变之后。高脂兔于喂养第4周内皮依赖性舒张功能与肌性动脉的弹性相关,与弹性动脉的弹性不相关。肌性动脉弹性可作为反映血管内皮依赖性舒张功能的替代指标。 3、辛伐他汀可提高血管内皮功能、改善动脉弹性。动脉粥样硬化兔血管内皮细胞和平滑肌eNOS、iNOS表达增强,辛伐他汀可使动脉粥样硬化兔血管内皮细胞和平滑肌eNOS、iNOS表达降低。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R445.1

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