收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

oxLDL和其受体LOX-1诱导滋养细胞凋亡及与子痫前期发病关系的研究

孟涛  
【摘要】: oxLDL和其受体LOX-1诱导滋养细胞凋亡及与子痫前期发病关系的研究 目的 子痫前期是孕产期严重的并发症,是导致孕产妇和新生儿病死率的重要原因,关于子痫前期的病因和发病机理研究一直是产科的重要课题。目前普遍认为,胎盘浅着床和血管重铸障碍是子痫前期发病的中心环节,而这两者都与细胞滋养细胞浸润能力降低有关。妊娠期若滋养细胞凋亡过度,就可导致这部分细胞不能向子宫蜕膜浸润,或浸润细胞数目减少及对螺旋小动脉内皮细胞替代减少,导致“浅着床”和血管重铸障碍,继而导致子痫前期的发生。 大量心血管病方面的研究证实,氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized low densitylipoprotein,oxLDL)oxLDL是引起血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、巨噬细胞损伤和凋亡的重要因子,并且oxLDL可通过多种途径诱导细胞的凋亡。而oxLDL要通过其受体介导而发挥作用。血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(Lectin likeoxidized low density lipoprotein receptor-1,LOX-1)是近年发现的oxLDL受体,LOX-1介导内皮细胞对oxLDL的摄取和代谢,在血管平滑肌细胞、巨噬细胞、成纤维细胞和血小板均有表达,在胎盘中也有表达。子痫前期常不同程度的存在代谢综合症的表现,其中血脂代谢紊乱在子痫前期中表现比较明显,之前虽已有一些研究报道,但均局限于血浆脂蛋白水平的检测,更深入的研究报道极少。在子痫前期oxLDL是否为疾病发生发展的重要因子,oxLDL是否通过诱导LOX-1的表达而在滋养细胞凋亡和子痫前期发病中发挥作用,目前尚无研究报道。 研究方法 (1)以ELISA方法检测正常孕妇和子痫前期患者血浆oxLDL的变化并进行差异比较。 (2)以免疫组织化学和Westen-blot、RT-PCR方法检测不同孕周正常孕妇和子痫前期患者胎盘滋养细胞LOX-1表达的时空变化;Westen-blot、RT-PCR方法检测不同孕周和子痫前期患者胎盘滋养细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2及Caspase-3表达的变化。 (3)应用具有滋养细胞特性的绒癌细胞株(JEG-3)在体外进行细胞培养实验,用细胞免疫化学、Westen-blot、RT-PCR方法检测oxLDL对滋养细胞LOX-1和凋亡相关基因表达的调控,以LOX-1阻断剂角叉菜胶来进一步检测阻断前后的变化。 结果 一、血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平在子痫前期患者较正常孕妇有显著升高,两组比较有显著差异。 二、正常妊娠与子癎前期胎盘组织中LOX-1和凋亡相关基因表达的时空变化 1.LOX-1在正常妊娠与子癎前期胎盘组织中的表达。 (1)免疫组织化学显示LOX-1在早期妊娠绒毛组织中表达于合体滋养细胞及细胞滋养细胞;在中,晚期正常妊娠与子癎前期胎盘组织中均表达在合体滋养细胞、细胞滋养细胞及血管内皮细胞。随着妊娠周数增加,LOX-1表达逐渐增强,不同孕周子癎前期胎盘组织LOX-1表达均强于同孕周正常妊娠胎盘组织。 (2)RT-PCR结果显示,随着孕周增加,胎盘组织LOX-1mRNA表达逐渐增强,不同孕周子癎前期胎盘组织中LOX-1mRNA的表达较同孕周正常妊娠胎盘组织上调。 (3)Westen-blot结果显示,随着孕周增加,胎盘组织LOX-1蛋白表达逐渐增强,不同孕周子癎前期胎盘组织中LOX-1表达较同孕周正常妊娠胎盘组织表达上调。 2.凋亡相关基因Caspase-3、Bax、Bcl-2在正常妊娠与子癎前期胎盘组织中的表达 (1)免疫组织化学显示Caspase-3在早期妊娠绒毛组织中表达于合体滋养细胞及细胞滋养细胞;在中、晚期正常妊娠和子癎前期胎盘组织中均表达在合体滋养细胞、细胞滋养细胞及血管内皮细胞。随着妊娠周数增加,Caspase-3表达逐渐增强,不同孕周子癎前期胎盘组织Caspase-3表达均强于同孕周正常妊娠胎盘组织。 (2)RT-PCR结果显示,随着孕周增加,Caspase-3、Bax mRNA表达逐渐增强,而Bcl-2 mRNA表达逐渐减弱,Bax/Bcl-2逐渐增大。子癎前期胎盘组织Caspase-3、Bax mRNA表达较同孕周正常妊娠胎盘表达增强,而Bcl-2 mRNA表达减弱。 (3)Westen-blot结果也显示,随着孕周增加,Caspase-3、Bax蛋白表达逐渐增强,而Bcl-2蛋白表达逐渐减弱,Bax/Bcl-2逐渐增大。子癎前期胎盘组织Caspase-3、Bax蛋白表达较同孕周正常妊娠胎盘组织表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱。 三、oxLDL对JEG-3细胞系LOX-1和凋亡相关基因表达的调控 1.LOX-1和Caspase-3在JEG-3细胞中的表达 通过细胞免疫化学技术检测到LOX-1和Caspase-3在JEG-3细胞浆及细胞膜中均有表达,为体外调控研究提供实验基础。 2.oxLDL和角叉菜胶对JEG-3细胞LOX-1表达的调控 (1)细胞免疫化学显示,JEG-3细胞未经oxLDL处理时,仅有微弱的LOX-1表达,经oxLDL处理24小时和48小时后,细胞外观未见明显变化,但细胞的LOX-1表达显著增强。同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,又逆转上述作用。 (2)RT-PCR进一步显示,oxLDL可剂量依赖性和时间依赖性的诱导JEG-3细胞LOX-1 mRNA表达。当加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,可逆转上述作用。 (3)Westen-blot也显示,oxLDL可剂量依赖性和时间依赖性诱导JEG-3细胞LOX-1蛋白表达,加入LOX-1抑制剂角叉菜胶则LOX-1表达又下调。 3.oxLDL和LOX-1抑制剂角叉菜胶对JEG-3细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的调控 (1)细胞免疫化学显示,JEG-3细胞未经oxLDL处理时,Caspase-3表达较微弱,经oxLDL处理24小时和48小时后,细胞外观未见明显变化,但细胞Caspase-3表达显著增强。在oxLDL作用基础上加入LOX-1抑制剂角叉菜胶继续培养后,又可逆转上述作用。 (2)RT-PCR显示,oxLDL可剂量依赖性和时间依赖性地诱导JEG-3细胞Caspase-3、Bax mRNA的表达,抑制Bcl-2 mRNA的表达,随着oxLDL作用浓度和作用时间的增加,Bax/Bcl-2增大。在oxLDL作用基础上同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,可逆转上述作用。 (3)Westen-bolt也同样显示oxLDL可剂量依赖性和时间依赖性地诱导JEG-3细胞Caspase-3、Bax蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达,随着oxLDL作用浓度和作用时间的增加,Bax/Bcl-2增大。在oxLDL作用基础上同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,又逆转上述作用。 结论 (1)子痫前期患者血浆oxLDL水平显著高于正常孕妇,提示oxLDL可能参与了子痫前期的病理生理过程。 (2)在体研究显示,LOX-1在早期妊娠绒毛组织中表达于合体滋养细胞及细胞滋养细胞;在中、晚期正常妊娠与子痫前期胎盘组织中均表达在合体滋养细胞、细胞滋养细胞及血管内皮细胞。随着妊娠周数增加,LOX-1表达逐渐增强,子瘸前期胎盘LOX-1表达强于相同孕周正常妊娠胎盘组织。同时随着孕周增加,胎盘组织中凋亡相关基因Caspase-3、Bax表达逐渐增强,而Bcl-2表达逐渐减弱,Bax/Bcl-2逐渐增大。子癎前期胎盘组织Caspase-3、Bax表达均比同孕周正常妊娠胎盘组织表达增强,Bcl-2表达减弱,Bax/Bcl-2增大。提示oxLDL受体LOX-1可能参与了子痫前期的发病,并与滋养细胞凋亡有关。 (3)以具有早期滋养细胞特性的绒癌细胞株JEG-3细胞进行体外培养研究显示,oxLDL可剂量依赖性和时间依赖性的诱导JEG-3细胞LOX-1的表达。同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,又可逆转上述作用。结果还显示oxLDL可剂量依赖性和时间依赖性地诱导JEG-3细胞Caspase-3、Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,随着oxLDL作用浓度和作用时间的增加,Bax/Bcl-2升高;同时加入LOX-1抑制剂角叉菜胶后,又可逆转上述作用。提示oxLDL可诱导滋养细胞LOX-1的表达,并可能导致滋养细胞凋亡增加,为进一步解释子痫前期的发病机制提供了实验基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 高世勇;徐丽丽;季宇彬;;龙葵碱调控Bcl-2与Bax蛋白表达及caspase-3活性诱导HepG2细胞凋亡的研究[J];中草药;2009年10期
2 孙涛;杨天明;王天路;;Bcl-2、Bax、Caspase-3表达与颞叶癫癎发病的相关性研究[J];神经损伤与功能重建;2009年03期
3 张婷;吕东;王凤莲;;细胞凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达及意义[J];泰山医学院学报;2011年04期
4 王华梅;李军荣;吴家幂;李珺;;大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达[J];神经疾病与精神卫生;2008年03期
5 胡彬;钟少平;邹丽;;Neogenin诱导滋养细胞凋亡及其机制的探讨[J];华中科技大学学报(医学版);2010年05期
6 洪铁;杨振;绳娟;姜红柳;刘玉梅;;黄芩苷抗肿瘤作用及机制的研究[J];中国药理学通报;2008年12期
7 曾娅莉;黄文芳;邓建军;刘华;杨永长;何静;刘俭;;Bcl-2/Bax基因在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡时的表达变化[J];四川医学;2011年06期
8 杨明辉;郭晓兰;袁国华;周京国;魏锦;;绞股蓝总皂甙对肝细胞瘤细胞凋亡的诱导作用[J];世界科学技术-中医药现代化;2006年04期
9 李奇志;;Caspase-3和Bcl-2在骨肉瘤中的表达及意义[J];中国医药导报;2009年32期
10 张浩;龙冬梅;詹立;吴德生;;壬基酚对断乳期子代雄性SD大鼠睾丸组织发育及凋亡的影响[J];四川大学学报(医学版);2006年03期
11 项彤;陈兴平;;尖锐湿疣组织中的细胞凋亡与caspase-3和bcl-2蛋白的检测[J];中国皮肤性病学杂志;2006年08期
12 孙国柱;张庆俊;赵宗茂;张更申;杨国峰;;兔脊髓空洞前状态神经细胞凋亡与Bcl-2、Bax蛋白表达的关系[J];中国老年学杂志;2007年07期
13 王卫东;陈正堂;;Bcl-2/Bax比率与细胞“命运”[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2007年04期
14 陈武;陈鹏英;刘鹏;廖艳林;;巴豆生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bax,Bcl-2蛋白表达的影响[J];中国实验方剂学杂志;2011年11期
15 王雪峰;何援利;;凋亡调节基因bcl-2/bax与卵巢早衰的关系[J];生殖与避孕;2008年08期
16 赵和平;解燕茹;;Bcl-2、Bax蛋白表达在非酒精性脂肪性肝病中的作用[J];世界华人消化杂志;2009年23期
17 王彤;刘存志;刘玉珍;于建春;韩景献;;bcl-2/bax基因调控机体细胞凋亡的机制研究进展[J];中国老年学杂志;2008年16期
18 陈吉相;赵婷;黄丹霞;李慧;;凝血酶预处理对大鼠神经细胞凋亡的影响[J];郑州大学学报(医学版);2009年04期
19 刘福佳,高春锦,夏成青,赵宏颖,齐曼;急性一氧化碳中毒小鼠脑海马细胞凋亡及bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达[J];中华航海医学与高气压医学杂志;2005年02期
20 龙冬梅,蒲永高;苯巴比妥促癌过程中细胞凋亡与bcl-2和bax mRNA表达的变化[J];解放军预防医学杂志;2005年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 彭军;张立杰;袁文棋;王磊;;鼻咽癌组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达及意义[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
2 彭解英;张睿;张凯;马立为;;口腔黏膜下纤维化中细胞凋亡及Bcl-2和Bax的表达[A];第七届全国口腔黏膜病暨第五届口腔中西医结合大会论文汇编[C];2008年
3 牟朝晖;周和平;张仙土;吴剑;杨明;;标准大骨瓣减压开颅术后神经元细胞凋亡的实验研究[A];2009年浙江省神经外科学术年会论文汇编[C];2009年
4 刘东颖;;冬虫夏草抗肿瘤作用的体外实验研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
5 张洪波;阿拉达尔;曹贵方;;蒙古绵羊胚胎发育过程中bcl-2与bax在卵母细胞内的表达[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2006年
6 吴云霞;邢达;;由光动力学引发的线粒体所介导的细胞凋亡[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年
7 张向丽;刘凤英;周什元;;子痫前期患者血清TPA与完整hCG的相关性变化[A];中华医学会第五次全国围产医学学术会议论文汇编[C];2005年
8 吴云霞;邢达;;由线粒体通路介导的光动力学诱导凋亡[A];中国光学学会2006年学术大会论文摘要集[C];2006年
9 胡永;宋晓萌;吴煜农;;Survivin、bcl-2、caspase-3在牙源性角化囊肿的表达及相关性研究[A];第五次全国口腔颌面—头颈肿瘤学术研讨会论文汇编[C];2006年
10 宋天保;王亚利;;反义寡核苷酸抑制β-淀粉样蛋白诱导的PC-12细胞凋亡及caspase-3表达[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(下)[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孟涛;oxLDL和其受体LOX-1诱导滋养细胞凋亡及与子痫前期发病关系的研究[D];中国医科大学;2007年
2 单海燕;凋亡调控基因与血管衰老相关性的实验研究[D];中国医科大学;2008年
3 刘健;萘酰亚胺类化合物诱导肿瘤细胞凋亡的机制[D];延边大学;2008年
4 刘宏伟;局部人工脑脊液冲洗、局灶亚低温对脑外伤后脑水肿、细胞凋亡的影响[D];中南大学;2007年
5 张欣;~(99)Tc~m-rh-Annexin V检测肿瘤细胞凋亡的实验研究[D];中国医科大学;2007年
6 王蘋;一氧化碳中毒迟发性脑损害的分子机制研究[D];山东大学;2009年
7 杨俊慧;豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化[D];第三军医大学;2006年
8 徐波;糖皮质激素对ALL细胞Bim、Puma表达的影响及HA14-1诱导ALL细胞凋亡的途径[D];中国医科大学;2006年
9 李合国;慢性胃炎脾胃湿热证与COX-2、细胞凋亡的关系及清浊安中汤的影响[D];广州中医药大学;2006年
10 周一军;肝细胞生长因子对晚期糖基化终产物诱导人血管内皮细胞凋亡的抑制作用及其机制的研究[D];中国医科大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 白丽亚;大鼠全脑缺血再灌注损伤后调控基因Bcl-2、Bax的表达及与细胞凋亡的关系[D];河北医科大学;2005年
2 崔新华;TNF-α对大鼠视网膜神经节细胞调亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响[D];青岛大学;2005年
3 张睿;口腔粘膜下纤维化及其癌变组织中细胞凋亡及Bcl-2、Bax的表达研究[D];中南大学;2008年
4 李闪霞;凋亡在丙烯酰胺亚慢性染毒诱导的中毒性神经病中的初步研究[D];山东大学;2005年
5 王恒兵;全反式维甲酸诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的实验研究[D];苏州大学;2006年
6 张春辉;褐藻糖胶对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响[D];青岛大学;2008年
7 杨颖;5-氟尿嘧啶与甲酰四氢叶酸钙联合用药对乳腺癌细胞凋亡的影响[D];辽宁师范大学;2009年
8 张娴;熊果酸诱导子宫内膜癌细胞HHUA凋亡的研究[D];山东大学;2008年
9 张振;低氧诱导因子-1α介导鼠胚成骨细胞凋亡的实验研究[D];大连医科大学;2008年
10 王敏;Bcl-2、Bax和Caspase-3在骨肉瘤中的表达及其意义[D];山西医科大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 陈汉桥;大连提出急性胰腺炎细胞凋亡新论[N];中国医药报;2001年
2 钟显飞 蒋明德;四川实验证实:红景天苷可诱导HSC细胞凋亡[N];中国医药报;2005年
3 张中桥;四军医大西京医院研究证明:GS能诱导白血病K562细胞凋亡[N];中国医药报;2005年
4 李明辉;“细胞凋亡”治癌症[N];医药导报;2002年
5 张中桥;银杏叶提取物能减少细胞凋亡[N];中国中医药报;2007年
6 商东;“细胞凋亡”与临床医学[N];中国医药报;2001年
7 温红;蛋白质caspases 3/7能有效控制细胞凋亡[N];医药经济报;2006年
8 洪敏;细胞凋亡研究引人关注[N];中国医药报;2008年
9 康 旭 冼沛中 许庆文;复方苦参注射液促使大肠癌细胞凋亡的实验研究[N];中国中医药报;2006年
10 记者张建松;治疗癌症新途径:细胞凋亡疗法[N];科技日报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978