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艾考糊精和维生素B_6对高浓度腹膜透析液环境下小鼠腹膜AGEs和RAGE的影响

董齐  
【摘要】: 目的 腹膜透析(PD)是一种目前世界上公认的肾脏替代治疗方法,腹膜炎是既往最常见的导致腹膜损伤的原因,随着技术进步,日趋减少,而伴随腹透时间的延长,腹膜纤维化导致的腹膜失超滤进而退出腹透的情况愈见增多。因此如何阻断和减缓腹膜纤维化的进程,成为研究热点。 腹膜纤维化的主要机制是由于腹膜长期暴露于非生理性的腹透液中,导致腹膜间皮细胞的脱落、细胞外基质积聚,最终形成腹膜纤维化、超滤功能丧失。 晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGEs)是蛋白质、脂质、核酸的氨基部分与还原糖的醛基发生非酶性糖化氧化反应的终产物。其病理作用已在多种慢性疾病中被证实,特别是与糖尿病的多种并发症有关,尤其对组织纤维化方面具有重要作用。 AGEs的生成为不可逆的,并呈浓度、时间依赖性。已有研究表明首次腹膜透析的患者3个月后腹膜上即可检出AGEs沉积。 艾考糊精是一种聚糖,本身不能参与非酶糖基化反应,其代谢终产物为麦芽糖,亦很难参与糖基化反应。 维生素B_6是天然物质,具有抗氧化作用。已被证实在能抑制非酶糖基化反应、AGEs的生成。 本实验拟利用小鼠腹腔灌注模型观察高糖和艾考糊精腹膜透析液以及维生素B_6对小鼠腹膜AGEs和RAGE,血管生成的影响。 方法 1、动物来源:成年雄性昆明小鼠60只体重18-25g中国医科大学动物实验中心提供。 2、腹腔注射腹膜透析液每日2次每次1ml。 3、实验分组:各组分别给予4.25%腹膜透析液、4.25%腹膜透析液及400mg/kg·d维生素B_6、7.5%艾考糊精透析液、生理盐水。 4、测定壁层腹膜血管密度、荧光分光法检测腹膜AGEs,RT-PCR法检测RAGE的表达。 结果 腹透6周后高糖组血管密度高于其他三组(P<0.05)。艾考糊精组血管密度高于维生素B_6组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。维生素B_6组与对照组间血管密度无统计学差异(P>0.05)。 腹透8周后高糖组血管密度明显高于其他三组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。高糖组透析8周腹膜血管密度高于透析6周组,差异有统计学意义(P<0.05)。艾考糊精组血管密度高于维生素B_6组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。维生素B_6组血管密度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 高糖组腹膜AGEs荧光强度(913.5±23.5)显著高于其他三组(P<0.01)。维生素B_6组AGEs荧光强度(479.6±43.2)低于高糖组,但高于对照组,(P<0.05),艾考糊精组AGEs荧光强度(566.7±35.2)低于高糖组,但仍高于对照组,(P<0.05),维生素B_6组AGEs荧光强度低于艾考糊精组,差异具有统计学意义(P<0.05)。 高糖组腹膜RAGEmRNA条带深于其他三组,半定量分析差异均具有统计学意义(P<0.01)。维生素B_6组RAGEmRNA条带半定量分析结果低于高糖组,但高于对照组(P<0.05),艾考糊精组RAGEmRNA条带半定量分析结果低于高糖组,但仍高于对照组(P<0.05),维生素B_6组RAGEmRNA条带半定量分析结果低于艾考糊精组(P<0.05)。 本实验各组AGEs荧光强度与RAGEmRNA半定量分析结果间存在直线正相关关系(P<0.01,R~2=0.97) 结论 高糖透析液可上调小鼠腹膜AGEs、RAGE的表达、促进壁层腹膜血管新生。 艾考糊精透析液可轻度上调小鼠腹膜AGEs、RAGE的表达、促进壁层腹膜血管新生,对腹膜造成的损伤小于传统高糖透析液。 维生素B_6可下调高糖透析液所导致的小鼠腹膜AGEs、RAGE高表达及抑制壁层腹膜血管新生。 综上所述:艾考糊精透析液和维生素B_6对腹膜透析小鼠的腹膜具有保护作用。


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