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《中国医科大学》 2009年
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高压氧对大鼠肠粘膜缺血—再灌注损伤保护作用的研究

贾春志  
【摘要】: 目的 复制大鼠小肠缺血-再灌注模型,观察大鼠肠粘膜缺血-再灌注损伤后,各个时间靶点应用高压氧对肠粘膜屏障的保护作用的效果比较,选取最为有效时间靶点应用高压氧,同时阐明其保护机制。 方法 采用肠系膜上动脉(SMA)夹闭/松夹闭方式建立小肠缺血-再灌注模型。健康雄性SD大白鼠40只,体重250~300克,随机分为4组:①缺血-再灌注组(I-R):麻醉剖腹小肠缺血1h缝合再灌注1h后取标本;②高压氧预处理组(HBO-P):预先给予高压氧1h后再造成小肠缺血-再灌注2h后取标本;③缺血期高压氧组(HBO-I):麻醉剖腹小肠缺血1h期间同时给高压氧,再灌注1h后取标本;④再灌注期高压氧组(HBO-R);麻醉剖腹小肠缺血1h,再灌注1h期间给高压氧,之后取标本。将每组的大鼠按照其对应的时间点取肠道组织。采用酶联免疫吸附试验法(Elisa)检测肠道组织匀浆TNF-α,应用翻转囊袋法检测I~(125)标记胰岛素(分子量5000Da)从肠粘膜到浆膜的每分计数观察肠粘膜通透性变化;常规HE染色,在光镜下观察大鼠肠道粘膜的形态学改变,小肠组织损伤程度应用Parks评分法进行评分;在透射电镜下观察大鼠肠道粘膜上皮细胞超微结构改变。 结果 肠粘膜通透性依次是:HBO-I组最小,其次HBO-P组(P<0.05),但前两组明显低于HBO-R组和I-R组(P<0.05),而HBO-R组略低于I-R组,但两组无统计学差异(P>0.05);肠道组织TNF-α含量依次是:HBO-I组最小,其次HBO-P组(P<0.05),但前两组明显低于HBO-R组和I-R组(P<0.05),而HBO-R组略低于I-R组,但两组无统计学差异(P>0.05);小肠组织学损伤程度评分依次是:HBO-I组最轻,HBO-P组次之(P<0.05),但前两组明显轻于HBO-R组和I-R组(P<0.05),HBO-R组略轻于I-R组,但两组无统计学差异(P>0.05)。电镜下大鼠肠道粘膜上皮细胞超微结构改变:I-R组损伤最差肠微绒毛脱失,线粒体空泡、变性、嵴消失,上端紧密连接分离,而HBO-I组损伤最轻肠微绒毛正常,线粒体大致正常,上端紧密连接闭合;HBO-P组:肠微绒毛部分脱失,线粒体空泡、变性、嵴消失,上端紧密连接略张开;HBO-R组:肠微绒毛大量脱失,线粒体空泡、变性、嵴消失、上端紧密连接分离。 结论 高压氧能够增加受损肠粘膜组织的氧张力,增加组织氧储备量,从而改善损伤部位的缺氧状态;能够加速血流速度、抑制凝血系统;从而有效保护肠粘膜免受缺血-再灌注损伤。本研究进一步发现高压氧可以减少肠组织缺血后炎性细胞因子TNF-α的产生,从而减轻过度的炎症反应;也可以改善肠组织缺血后的病理损伤,减轻肠粘膜屏障的通透性;综合高压氧以上的有益作用,在小肠组织缺血期和缺血前应用高压氧治疗显示明显降低小肠粘膜通透性,抑制TNF-α的生成,从而有效保护小肠粘膜屏障,在再灌注期应用高压氧有效果(较缺血-再灌注组),但统计学不显著。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R459.6

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