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《中国医科大学》 2010年
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PDCD5基因在大肠癌中的表达及其对药敏的影响

刘艳萍  
【摘要】: 目的 PDCD5基因是北京大学人类疾病基因中心从白血病细胞系TF-1细胞中克隆得到的、具有自主知识产权的新功能基因。PDCD5基因在多种肿瘤如宫颈癌、肝癌、多发性骨髓瘤、胃癌、肺癌等疾病中表达下降,可能与其发生有关,但其在肿瘤癌变过程中所起的作用并不十分清楚。大肠癌是常见的消化道肿瘤,在肿瘤疾病发生发展过程中具有典型多阶段性。为了明确PDCD5基因在肿瘤发生发展过程的作用,我们选取在大肠癌变过程中的不同阶段的组织,以及大肠癌细胞系,分别从组织水平、细胞蛋白水平及mRNA水平明确PDCD5基因在大肠癌疾病不同阶段的表达,初步探讨其在癌变过程中的作用;同时对其临床预后做了随访调查,明确其临床意义。为了进一步探讨PDCD5基因在治疗方面的作用,我科成功构建了携带PDCD5基因的重组慢病毒载体;在本研究中,将上述重组载体转染结肠癌细胞系HCT116,使PDCD5基因过表达,进而检测转染前后HCT116细胞增殖能力和凋亡细胞比例的变化,期望能为肿瘤治疗提供新的方法。 方法 选取2007年12月-2008年12月经我院病理科确诊的46例大肠癌、20例腺瘤性息肉及28例慢性炎症患者的组织应用S-P免疫组化方法检测PDCD5基因在其中的表达,并与临床资料比较,对其中46例大肠癌患者进行电话随访预后。选取大肠癌细胞HCT116、HT29及人脐静脉内皮细胞Huvec,应用免疫细胞化学方法检测各细胞中PDCD5在蛋白水平的表达;RT-PCR方法检测其在mRNA水平的表达。在PDCD5的功能性研究方面,选择慢病毒作为载体,应用本室保存的携带PDCD5基因的重组慢病毒L-PDCD5及对照慢病毒空载体L-null,稳定转染大肠癌细胞系HCT116,并常规传代培养。化疗药物5-fu设定5个浓度诱导转染前后细胞凋亡,利用MTT法测定各组细胞增殖能力改变,计算出5-fu的半数抑制浓度;根据MTT结果,5-fu选定高低两个浓度诱导HCT116细胞凋亡,应用Annexin V/PI双染色流式细胞术测定各组细胞凋亡的变化,以明确PDCD5对于化疗药物的增敏作用。 结果 PDCD5在慢性炎症组织中表达最高,明显高于腺瘤性息肉及癌组织中的表达(x2=10.495,P0.05),但在腺瘤性息肉和癌组织、以及不同分级的大肠癌之间的表达无明显差异(P=0.552);随访病例中PDCD5表达高的患者,生存评分较高。PDCD5在人脐静脉内皮细胞株Huvec中表达高于结肠癌细胞株中的表达。目的基因PDCD5能被重组慢病毒L-PDCD5高效地导入靶细胞结肠癌HCT116细胞,转染率达80-90%,转染后细胞可以传代培养,荧光显微镜下能直接观察到绿色荧光存在,即PDCD5达到稳定的表达。RT-PCR能检测到转染后的靶细胞中PDCD5的表达明显高于未转染的细胞。MTT法结果显示L-PDCD5组细胞的抑制率在各个浓度显著高于L-null空载体组及单纯细胞组(P0.05)。流式结果示,低浓度组中,L-PDCD5组细胞凋亡率(24.74%)明显高于正常细胞组(13.25%)和L-null组(24.74%):高浓度组中,L-PDCD5组的细胞凋亡率(48.84%)也明显高于正常细胞组(34.59%)和L-null组(37.48%);且随着药物浓度增加,细胞凋亡率增加。 结论 PDCD5基因可能不同程度地参与了大肠组织细胞癌变过程的调控,特别在癌变早期作用较为明显;携带PDCD5基因的重组慢病毒载体转染大肠癌细胞系HCT116能够稳定表达;这种稳定表达,使大肠癌细胞对化疗药物更加敏感,并呈现浓度依赖性。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R735.3

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 崔亚南;薄丽华;薛立娟;杨绍娟;卜丽莎;高申;;5-Fu对人结肠癌细胞凋亡及相关基因表达的影响[J];吉林大学学报(医学版);2007年01期
2 李惠平,曹志敏,邵玉霞,孙武,贾廷珍;重组人TFAR19蛋白对羟基喜树碱诱导人7721肝癌细胞凋亡的增敏作用[J];北京医科大学学报;2000年05期
3 陈英玉,孙荣华,韩文玲,张颖妹,宋泉声,狄春辉,马大龙;凋亡相关蛋白TFAR19在TF-1细胞凋亡中出现细胞核转位[J];北京大学学报(医学版);2001年02期
4 马大龙;新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究[J];北京大学学报(医学版);2002年05期
5 冯静,崔恒,魏丽惠,马大龙;TFAR19蛋白在卵巢上皮性癌中的表达[J];中国妇产科临床;2002年03期
6 张岱,刘朝晖,李克敏,范慧,廖秦平;重组人PDCD5蛋白对干扰素γ诱导人宫颈癌SiHa细胞凋亡的增敏作用的初步探讨[J];中国妇产科临床杂志;2004年04期
7 易铁男,周云峰,伍钢;Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J];国外医学(肿瘤学分册);2001年01期
8 彭洪涛;刘淑萍;;bcl-2基因与细胞凋亡关系的研究进展[J];内蒙古医学杂志;2006年04期
9 熊世勤,朱锡华;Caspase激活与调控的分子机制[J];生物化学与生物物理进展;2000年01期
10 田辉凯,夏天,蒋春笋,张红梅,王坤,李学军;TFAR19促进小鼠肝线粒体膜通透性转运孔的开放[J];生物化学与生物物理学报;2002年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪承润,闵莉,吴薇,薄军;钬元素对小鼠肝脏细胞DNA损伤的影响[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
2 朱国旗;汤立建;王磊;苏婧婧;汪宁;彭代银;李庆林;;黄芩苷诱导人乳腺癌细胞株MDA-MB-231凋亡作用的研究[J];安徽中医学院学报;2008年02期
3 牛艳玲,曹胜利,蒋宇扬,杜伟,赵玉芬;N-磷酰化二肽甲酯诱导K562细胞凋亡[J];癌症;2002年08期
4 徐扬,何斌,王雅杰,付强;Herceptin与阿霉素联合应用对大鼠心脏毒性的影响[J];癌症;2004年04期
5 楼海亚,林开清,叶大风,谢幸,俞晓;PTEN表达能否作为评估子宫内膜样腺癌术前高危因素指标的探讨[J];癌症;2005年06期
6 曾义;杨忠;韩杨云;游潮;;全反式维甲酸对胶质瘤SHG-44细胞基因表达谱的影响(英文)[J];癌症;2008年05期
7 庞凤;;用于肿瘤基因治疗的慢病毒载体研究进展[J];青岛大学医学院学报;2009年05期
8 朱德元;;不同运动训练长期停训后Bax、Bcl-2在大鼠脾组织表达的形态学研究[J];北京体育大学学报;2007年S1期
9 许之屏;谭军;刘祥梅;;低强度耐力训练后力竭运动大鼠睾丸p53蛋白表达和部分功能酶活性的变化[J];北京体育大学学报;2010年08期
10 马艳;张明军;孔淑珍;;不同运动负荷对大鼠肺细胞凋亡的影响机制[J];北京体育大学学报;2011年07期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 徐远坤;陈久毅;;中药健身丹对脊髓型颈椎病神经细胞凋亡相关基因表达影响的研究[A];2007年贵州省医学会骨科学分会学术年会论文汇编[C];2007年
2 杨大平;李军;黄晓欣;张爱华;何云;谢政军;;细胞凋亡在燃煤型砷中毒肝损伤中的作用[A];贵州省环境诱变剂学会第二届学术交流会论文集[C];2005年
3 文珠;胡国柱;何丹;俞火;戎吉平;;川芎嗪对长春新碱导致的骨髓基质细胞生长抑制和凋亡的干预[A];第九届中国中西医结合实验医学学术研讨会论文汇编[C];2009年
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1 孙伟;凋亡相关基因及其交互作用与食管鳞癌生物学特性的临床研究[D];新疆医科大学;2010年
2 李凡;LRIG1抑制EGFR入核增强顺铂对T24膀胱癌细胞损伤的研究[D];华中科技大学;2011年
3 曹长姝;中药臭灵丹中HTMF体外抗肿瘤机制研究[D];暨南大学;2011年
4 许东芳;含杂环配体的稀土有机配合物的合成、表征及相关生物活性的研究[D];上海师范大学;2011年
5 张霞;抑癌基因PDCD4和PDCD5在卵巢癌中的作用及其机制研究[D];山东大学;2011年
6 龙白;槲皮素、地钱黄酮、DADS对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机理的研究[D];中南大学;2010年
7 王玉梅;人PTEN基因RNAi和RESC慢病毒载体的构建及其功能的相关性研究[D];郑州大学;2011年
8 王丽;CSG脾虚与湿热模型大鼠胃粘膜组织微观变化的对比研究[D];辽宁中医药大学;2011年
9 相宏杰;芪莲舒痞方影响Syk、Survivin、p53表达的实验研究及其治疗CAG癌前病变的临床研究[D];山东中医药大学;2011年
10 申载薰;芪莲舒痞颗粒影响端粒酶活性、端粒长度、DNA含量及NF-κB表达的实验研究[D];山东中医药大学;2011年
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1 高明;女贞子有效成分齐墩果酸对S180荷瘤小鼠P53蛋白表达及TNF-α的诱生作用[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 刘晓兰;PDCD5、Survivin、p53、Tip60在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的表达及意义[D];新疆医科大学;2010年
3 高阳;胃癌组织中PDCD5、COX-2和CD44的表达及其临床意义[D];泰山医学院;2007年
4 周振红;促凋亡分子PDCD5在食管鳞癌组织中的表达及意义[D];山东大学;2010年
5 辛慧;甘氨胆酸对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响[D];内蒙古农业大学;2010年
6 徐倩;PDCD5、黄芪注射液与顺铂联合基因免疫化疗抗子宫内膜癌作用的体外研究[D];滨州医学院;2010年
7 支晓雁;瑞芬太尼后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
8 白彩艳;盐酸小檗碱对大鼠急慢性心肌缺血的保护作用[D];吉林大学;2011年
9 王芬;密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响[D];湖南中医药大学;2011年
10 侯娟娟;辣椒素经内质网应激途径诱导白血病细胞凋亡和对白血病干细胞的影响[D];兰州大学;2011年
【二级参考文献】
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1 王新娟,吴时丽,魏晓超,蔺新力;肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的克隆、表达及重新折叠[J];北京医科大学学报;2000年05期
2 李惠平,曹志敏,邵玉霞,孙武,贾廷珍;重组人TFAR19蛋白对羟基喜树碱诱导人7721肝癌细胞凋亡的增敏作用[J];北京医科大学学报;2000年05期
3 陈英玉,孙荣华,韩文玲,张颖妹,宋泉声,狄春辉,马大龙;凋亡相关蛋白TFAR19在TF-1细胞凋亡中出现细胞核转位[J];北京大学学报(医学版);2001年02期
4 马大龙;新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究[J];北京大学学报(医学版);2002年05期
5 阮国瑞,陈珊珊,常艳,付家瑜,王卉,秦亚溱,李金兰,刘艳荣;凋亡促进分子TFAR19在成人慢性髓性白血病骨髓细胞的异常表达[J];北京大学学报(医学版);2002年06期
6 宋泉声,韩文玲,刘红涛,马大龙;小鼠凋亡相关新基因TFAR19 cDNA的克隆化和序列分析[J];北京医科大学学报;1999年04期
7 刘红涛,王玉刚,张颍妹,宋泉声,狄春晖,陈光慧,汤建,马大龙;凋亡相关新基因 TFAR19 的 cDNA 克隆、表达和功能研究[J];高技术通讯;1998年05期
8 王健东,潘星华;细胞凋亡调节的分子遗传机制[J];国外医学.遗传学分册;1996年03期
9 韩文玲,马大龙;一个新的多功能细胞因子—趋化素样因子[J];上海免疫学杂志;2002年04期
10 刘红涛,王玉刚,张颖妹,宋泉声,敬保迁,袁勇,马大龙;TF-1细胞凋亡相关基因的研究[J];生物化学与生物物理进展;1999年01期
【相似文献】
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1 刘君;大肠癌组织中67KD_aLNR表达增强的意义[J];中国肿瘤临床;1997年12期
2 高建军;王为忠;龚晃;王东霞;张玮玮;;增殖细胞核抗原在大肠癌中的表达及临床意义[J];沈阳部队医药;2001年04期
3 刘光军,张丹,张力,王继红,姜彦多,高红,刘丹,金成兰;CDC25B在大肠肿瘤中的表达及意义[J];世界华人消化杂志;2004年05期
4 南清振,张振书,杨希山,肖冰,高蕾,叶方鹏,武金保;应用基因芯片技术筛查大肠癌相关基因[J];世界华人消化杂志;2004年11期
5 刘剑仑,葛莲英,黎丹戎,张贵年;端粒、端粒酶及端粒酶催化亚基在大肠癌中的作用[J];中国癌症杂志;2005年04期
6 唐卫中,高枫,李卫,唐宗江;中国人散发性大肠癌APC基因突变的研究[J];中华实验外科杂志;2005年11期
7 于兰;张建兵;;C-erbB-2蛋白,P53蛋白在大肠癌中的表达及意义[J];南通大学学报(医学版);2005年06期
8 谢裕安;葛莲英;刘剑仑;匡志鹏;李艳;罗小玲;;端粒酶在大肠癌组织中表达的临床意义[J];现代肿瘤医学;2006年02期
9 王丽琼;张曦;尹伟;朱惠荣;刘大刚;;Rb和p16蛋白在大肠癌中的表达及意义[J];临床肿瘤学杂志;2006年03期
10 毛银玲;于雁;;CK20、CEA与Ducks’B期大肠癌淋巴结微转移的检测[J];实用肿瘤学杂志;2006年02期
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1 肖冰;王媛媛;张亚历;;大肠癌干细胞作用相关基因及信号通路的筛选鉴定[A];第二十三届全国中西医结合消化系统疾病学术会议暨消化疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2011年
2 尤琦;王锡山;;大肠癌组织中生长抑制因子4(ING4)蛋白的表达及意义[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会摘要集[C];2011年
3 王海彬;;雌激素相关受体α基因超表达慢病毒载体的构建[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
4 高书颖;于洁;;携带hTERT基因的重组慢病毒载体的构建及鉴定[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
5 蔡伟光;丁景华;习欠云;肖敏;江青艳;吴珍芳;张永亮;;慢病毒与精子孵育法介导转基因猪的制备[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
6 于洁;高书颖;;携带hTERT基因的重组慢病毒载体的构建[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年
7 袁航;屠世良;;大肠癌原代细胞培养方法的探索[A];中国肛肠病研究心得集[C];2011年
8 袁航;屠世良;;大肠癌原代细胞培养方法的探索[A];中国肛肠病研究心得集[C];2011年
9 徐敏;杨晓红;陈龙;叶静;李么明;陈焕春;曹胜波;;慢病毒载体介导表达西尼罗河病毒prME蛋白[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
10 刘峰;肖兴鹏;田玉科;;大鼠蛋白激酶Cγ可控shRNA慢病毒的构建与鉴定[A];2011年全国医药学术论坛交流会暨临床药学与药学服务研究进展培训班论文集[C];2011年
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1 李新民;nm23-H1基因表达与大肠癌侵袭转移相关[N];中国医药报;2002年
2 记者 衣晓峰 靳万庆 通讯员 李晓丽;大肠癌多药耐药判断标准有新“尺度”[N];中国中医药报;2003年
3 衣晓峰 李晓丽;肠癌多药耐药判断有新说[N];健康报;2003年
4 衣晓峰;如何判断大肠癌化疗疗效[N];中国医药报;2003年
5 ;阿司匹林新用途[N];中国高新技术产业导报;2002年
6 辛紫;中国俩科学家创新项目入选[N];医药经济报;2009年
7 本报记者 郑灵巧;十万美元验证一个新点子[N];健康报;2009年
8 张田勘;基因疗法:沉寂之后的复苏?[N];南方周末;2009年
9 记者 任海军;基因疗法卷土重来 人类顽疾有望治愈[N];经济参考报;2010年
10 记者 徐亚静;抑制VCAM——1表达可减少颈动脉术后再狭窄[N];中国医药报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 韦烨;基因改造骨髓造血干细胞靶向抑制结直肠癌新生血管形成的实验研究[D];复旦大学;2010年
2 俞晓岚;过表达CXCR4的骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的疗效观察[D];福建医科大学;2010年
3 刘瑜;BTBD10在人脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞株增殖和凋亡的影响[D];第二军医大学;2010年
4 林恒;线粒体转录因子A在重组人肝再生增强因子对梗阻性黄疸大鼠肝功能保护中的作用机制研究[D];第三军医大学;2009年
5 林文平;脑红蛋白基因修饰的骨髓间充质干细胞对兔脊髓损伤保护作用的实验研究[D];福建医科大学;2011年
6 王鹏;依赖p53的癌基因Wip1在人脑胶质瘤细胞恶性增殖机制中的作用研究[D];华中科技大学;2010年
7 吕学军;Caveolin-1在LPS诱导AT-1细胞和小鼠肺部急性损伤中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2010年
8 苏冠华;肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞移植的促血管新生作用[D];华中科技大学;2010年
9 王媛媛;大肠癌干细胞基因表达谱特点及其信号通路的筛选鉴定[D];南方医科大学;2011年
10 董玮;基质金属蛋白酶2诱导大肠癌肿瘤细胞增殖与侵袭的试验研究[D];吉林大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘艳萍;PDCD5基因在大肠癌中的表达及其对药敏的影响[D];中国医科大学;2010年
2 马贵亮;慢病毒载体介导的TNF-α基因在脐血间充质干细胞中的表达的实验研究[D];青岛大学;2010年
3 栾冲;可诱导表达hBMP-2基因的慢病毒载体的构建及其慢病毒的产生和鉴定[D];青岛大学;2010年
4 陈豪;乙肝病毒X基因(HBVX)慢病毒载体的构建和鉴定[D];福建医科大学;2011年
5 陈春;携带大鼠Foxp3基因慢病毒载体的构建及慢病毒包装的研究[D];安徽医科大学;2011年
6 沈上杭;短发夹RNA抑制缺氧诱导因子-1α表达对脑胶质瘤细胞增殖、侵袭及转移的影响[D];福建医科大学;2010年
7 盛鹏程;绵羊Myostatin基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定[D];山东农业大学;2011年
8 尹福忠;脂联素在大肠癌中的表达及意义[D];山西医科大学;2007年
9 刘丹;Survivin和bcl-2在大肠癌中的表达及意义[D];吉林大学;2011年
10 魏衍全;慢病毒介导shRNA稳定持续抑制口蹄疫病毒增殖的两类细胞系的建立[D];中国农业科学院;2011年
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