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《中国医科大学》 2010年
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结核分支杆菌16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白的血清学评价

吴俐健  
【摘要】: 目的 结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterituberculosis, Mtb)引起的慢性传染病,每年有900多万新发病例,死亡人数约200万。至今大约有20亿人被感染,结核病目前已成为全球严重的公共卫生和社会问题。现有的细菌学诊断是结核病诊断的金标准,但由于涂片阳性率低、培养耗时时间长,远不能满足临床需要。血清学检测以其简单、快速、准确受到广泛关注,寻找理想的靶抗原,一直是众多学者研究的热点。近年来研究表明,只用单一抗原的结核病血清学诊断敏感性、特异性往往不够,难以有效区分现患结核人群和结核菌感染。结核病融合蛋白抗原16Kda-38kda可以提高结核血清学诊断的特异性和敏感性的研究已经国外学者证明,ESAT-6是刺激IFN-r应答的主要抗原,仅存在于结核分枝杆菌群及少数几种致病性分支杆菌中。据此推测,16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白可能可以鉴别结核病患病人群及非病人群。本研究目的以重组结核杆菌16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白(以下简称重组蛋白)为包被抗原,检测结核病人的血清,探讨该融合抗原对结核病诊断敏感性和特异性,并与商品化结核抗体试剂盒做对比分析,以评价该抗原诊断结核病的价值。为进一步诊断试剂盒的研发提供依据。 方法 实验对象包括全部病例150例,其中临床确诊结核病例(TB)105例、45例控制病例,以重组16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白作为包被抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测150例血清中的16Kda-38kda-ESAT-6结核抗体水平,包括临床确诊结核病例105例(菌阳26、菌阴79)、控制组20例健康人、25例非结核肺病病例血清中的相关结核抗体,得出各组之间的OD值及阳性率,并与商品化结核抗体检测试剂盒(TB-DOT)的阳性率进行比较,以此来评价重组16Kda-38kd-ESAT-6融合蛋白对结核病诊断的价值,并建立ROC曲线评价系统。 结果 16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白检测45例控制组的阳性率为6.63%,与商品化结核抗体检测试剂盒阳性率相比,有统计学差异(P0.01),结核病组阳性率为59.05%,与商品化结核抗体检测试剂盒阳性率相比,无统计学差异(P0.05)。结核病组(TB)与控制组的OD值分别为2.22±0.58、1.35±0.24,二组间OD值对比有显著性差异(F=6.06,P0.05);16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白检测结核病的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为59.05%、93.33%、95.38%、49.41%。应用ROC曲线分析,得出曲线下面积为0.751,cutoff值为2.52,此时敏感性及特异性分别为65.4%、84.8%。 结论 16Kda-38kda-ESAT-6融合蛋白检测血清结核抗体具有较高的特异性,可以更好的区分有病者和无病者,可以作为结核病诊断的备选抗原之一。
【学位授予单位】:中国医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R521.1

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