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蜂房提取物的体外抗肿瘤作用研究

张坤  
【摘要】: 目的 中草药蜂房以它的效用强和副作用小的特点成为了人们关注的重点,但多偏重于对蜂房中蜂胶的研究,其它成分,则研究报道不多。蜂房是一种中草药,有着很多的药用功效,近些年来最为引人注意的就是其抗肿瘤的作用,蜂房和蜂胶中含有多种已知的抗肿瘤成分。蜂房的抗肿瘤应用偶见于临床个案,尚无对其提取物抗肿瘤作用及其机制的系统研究。抗癌作用的研究多局限于动物体内体外实验,缺少药效、代谢及毒性方面研究,未能在抗癌医学领域系统深入研究、抗癌蜂胶产品的开发前景不明,近期内很难在临床上广泛应用。本文探讨蜂房粗提物的体外抗癌活性,研究了蜂房甲醇提取物对多种肿瘤细胞的细胞毒理学作用及可能存在的部分抗肿瘤作用机制。 方法 采用甲醇作为溶剂对蜂房进行分离提取,并将提取物溶于二甲基亚砜中;应用四甲基偶氮唑盐比色法,测定提取物不同浓度及不同作用时间对五种不同组织来源的肿瘤细胞(人胃腺癌细胞、口腔上皮癌细胞、人宫颈癌细胞、人非小细胞肺癌细胞和人肝母细胞瘤)的存活率的影响,初步反映其体外抗肿瘤活性;并采用流式细胞仪检测提取物对Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡及其PI染色细胞周期变化的影响,分析其对Bcl-2及Caspase3酶活性变化的影响;进行抗癌药效能比实验,评估蜂房粗提物是否对正常造血干细胞存在毒副作用。 结果 对比相应浓度的阴性对照,提取物不同作用浓度均对多种肿瘤细胞存在不同程度的体外抗肿瘤活性并呈剂量依赖性;提取物可诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,提取物浓度与Bcl-2蛋白表达呈负相关,但未改变Caspase3酶的活性,结果显示提取物中存在具有体外抗肿瘤活性的化合物。此外,抗癌药效能比实验提示在高浓度提取物作用下,可能存在对正常造血干细胞的细胞毒性,但其低浓度则可能存在促进正常造血干细胞增殖的作用。 结论 在浓度高于0.025mg/ml时,蜂房甲醇提取物浓度依赖性降低肿瘤细胞存活、诱导细胞凋亡;其在不同时点均有相似的生长抑制率,提示其抗肿瘤化合物的性质可能相对稳定;蜂房甲醇提取物同时具有诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用,但不同浓度组的作用可能并不完全一致,可能与蜂房粗提物多组分的复杂性有关;其细胞毒性可能导致高浓度组的细胞坏死有关。


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