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维拉帕米对体外培养的人晶状体上皮细胞增殖和黏附的抑制作用

李秋实  
【摘要】:目的 研究钙离子拮抗剂维拉帕米(verapamil,Ver)对体外培养的人晶状体上皮细胞(huamn lens epithelial cell,HLEC)增殖、凋亡和黏附的影响。 方法 体外培养人晶状体上皮细胞株(SRA01/04)。Ver处理第二代人晶状体上皮细胞。MTT法观察不同浓度的Ver对HLEC增殖的影响,流式细胞术(FCM)检测Ver对HLEC周期的影响,AO/EB双染法观察细胞凋亡形态,Annexin V-FITC/PITC凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。MTT法测定Ver对HLEC贴壁的影响。 结果 (1)随着Ver药物浓度的增加,HELC增殖率减少,以72小时最为明显。(2)FCM检测细胞周期细胞变化时发现:G1期细胞在药物组(77.97±0.18、78.15±0.12、82.86±0.56、84.84±0.42)较正常组(72.67±0.94)增加(P0.05);S期的细胞在药物组(10.26±0.06、10.08±0.76、8.52±0.31、8.42±0.27)较正常组(16.87±0.33)明显减少(P0.05)。(3)形态学观察发现HELC在80mg/l浓度的Ver作用72小时后发生了一系列形态改变,包括细胞核固缩、染色质边集等凋亡改变。流式细胞仪测定了10、20、40、80mg/l浓度的Ver可以诱导HLEC发生凋亡,且随着浓度的升高凋亡率显著升高。(4)用药24h后HELC的贴壁量为对照组的73.17%。 结论 Ver对体外培养的HLEC生长有抑制作用,使细胞停留在G1期。Ver可以诱导HLEC凋亡,随着药物浓度增加细胞凋亡率增加,而且Ver有抑制HLEC贴壁的作用。提示Ver能改变细胞周期的进程而有效抑制HLEC的增生、诱导细胞凋亡并且抑制HLEC的黏附,有望成为防治后发性白内障的理想药物。


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