收藏本站
《大连医科大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

α肾上腺素能受体激动对TLR4信号通路影响的研究

张兴  
【摘要】:目的:研究α肾上腺素能受体激动对人外周血单核细胞TLR4信号通路及其中相关因子变化影响,探讨α肾上腺素能受体与TLR4的相互作用及其调控机制。 方法:采集健康青年人外周静脉血,进行离体实验。(一)观察不同剂量α受体激动剂去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)对人外周血单核细胞TLR4蛋白及mRNA、P38mRNA、NF-κBp65的影响及上清中炎症因子IL-6、IL-18的变化,选取10例健康青年人各抽取外周静脉血32ml,经EDTA抗凝后每份血均分为空白组、25μmol/L去甲肾上腺组、50μmol/L去甲肾上腺组、75μmol/L去甲肾上腺组,孵育18h后,用ELISA法测定血液离心后上清液中IL-6、IL-18的浓度,分离单核细胞后用流式细胞仪测定CD14+单核细胞TLR4阳性细胞百分率,提取RNA后采用RT-PCR测定TLR4mRNA及P38mRNA的表达,免疫组化法测定NF-κBp65蛋白的表达;(二)利用siRNA干扰技术使TLR4mRNA保持静默,观察用α受体激动剂NE刺激后相关因子浓度变化情况,选取10例健康人各抽取外周静脉血16ml,经EDTA抗凝后每份血均分为空白组、75μmol/L去甲肾上腺组、1nmol Scramble siRNA+0.24ml转染液组、1nmol TLR4 siRNA+0.24ml转染液组,转染18h后用ELISA法测定血液离心后上清液中IL-6、IL-18的浓度,分离单核细胞后爬片培养,免疫组化法测定NF-κBp65蛋白的表达。(三)利用不同阻滞剂分别阻断α受体、P38MAPK、PKA、PKC后,再用α受体激动剂NE刺激,观察TLR4蛋白表达量的变化,选取10例健康青年人各抽取外周静脉血6ml,经EDTA抗凝后每份血均分为25μmol/Lα受体阻滞剂酚妥拉明组、15μmol/L P38MAPK抑制剂SB 202190组、15μmol/L pKA抑制剂H89组、15μmol/L pKC抑制剂Go6983组,并设空白对照组、75μmol/L去甲肾上腺组,孵育0.5h后,再加入75μmol/LNE孵育18h后,采用流式细胞仪测定CD14+单核细胞TLR4阳性细胞百分率。 结果:1、应用不同浓度的α受体激动剂NE刺激人外周血单核细胞后,TLR4蛋白及mRNA、P38mRNA、核内NF-κBp65蛋白、上清中IL-6及IL-18的表达呈剂量依赖性升高:NE75组、NE50组分别与空白组及NE25组比较均明显升高,(p0.05,p0.01),NE75组与NE50组比较明显升高(p0.05),NE25组与空白组比较无明显升高(p0.05);2、TLR4mRNA干扰后α受体激动剂NE刺激血液离心后上清液中IL-6及IL-18、单核细胞NF-κB P65蛋白的表达为:Si+NE75组均明显低于空白组、Sc+ NE75组及NE75组(P0.05);3、分别阻断α受体、P38MAPK、PKA、PKC后,用有效浓度NE(75μmol/L)刺激外周血单核细胞,观察TLR4蛋白的表达量为:α-blocker组、P38组、PKA组与NE75组比较均明显降低(p0.05),各组与空白组比较未见明显差异(p0.05),PKC组与NE75组及空白组比较均明显增加(p0.05)。 结论: 1)α受体激动剂呈剂量依赖性诱导人外周血单核细胞TLR4信号通路激活,以75μmol/L去甲肾上腺素为最佳剂量; 2)α受体、P38MAPK、PKA、NF-κB P65介导了α受体激动剂诱导的TLR4信号通路激活。
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R341

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 陈松海,韩启德;分离成年大鼠心肌细胞α_1受体亚型及β受体分析[J];北京医科大学学报;1994年01期
2 张幼怡,韩启德;α_1与β肾上腺素受体间的交互作用[J];基础医学与临床;1997年04期
3 雷蓓蕾,韩启德;去甲肾上腺素对不同初始表达水平α_(1B)-肾上腺素受体表达的调节[J];科学通报;2000年06期
4 张斌,杜冠华;NSAIDs抗炎作用机制研究进展[J];中国药理学通报;2005年08期
5 刘力强,张庆俊;蛋白激酶C和核因子-κB在脑血管痉挛中表达变化及蛋白激酶C抑制剂对其影响[J];中华神经外科杂志;2003年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 龚菊;;非甾体抗炎药在骨科疾病治疗中的合理使用(综述)[J];安徽卫生职业技术学院学报;2009年03期
2 沈霞蔚;邓德明;孙爱萍;;p38 MAPK在糖尿病肾脏疾病中的作用研究进展[J];长江大学学报(自然科学版);2011年01期
3 邓海波;刘一尔;伍龙;吕平;李文华;;蛛网膜下腔出血并迟发性脑血管痉挛40例临床分析[J];广西医学;2008年10期
4 张典,袁秉祥,邓秀玲,杨广德,贺浪冲,张幼怡,韩启德;用a1D受体高表达细胞膜色谱研究9种配体的生物亲和作用[J];中国科学(C辑:生命科学);2004年02期
5 侯嵘,韩启德;肾上腺素受体与心力衰竭[J];基础医学与临床;2000年03期
6 钱涛;张庆俊;;实验性蛛网膜下腔出血后海马CA1区神经元凋亡的研究[J];解剖学报;2006年02期
7 刘力强;耿少梅;焦保华;张更申;马树成;;粉防己碱对实验性脑血管痉挛核因子-κB活性变化的影响[J];脑与神经疾病杂志;2009年05期
8 张更申;刘莉;贾林伟;孙国柱;;蛛网膜下腔血性与非血性刺激物对脑血管影响的组织学比较[J];脑与神经疾病杂志;2011年03期
9 邓海波;;蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的研究进展[J];内科;2008年04期
10 魏小勇;黎才海;饶荣生;;p38 MAPK信号通路与肿瘤的关系[J];实用癌症杂志;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 宋海;;追根溯源评估NSAIDs[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 殷涛;外燥伤肺的分子机制研究[D];湖北中医药大学;2011年
2 陆士奇;SAH后脑血管痉挛继发脑损伤的相关研究[D];苏州大学;2005年
3 冀勇;SAH后PKC、NF-kB和ICAM-1表达变化及其与CVS发病机理的相关研究[D];苏州大学;2005年
4 张更申;胡椒碱对实验性家兔蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛作用机理研究[D];河北医科大学;2006年
5 陈泽军;p38MAPK在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中的作用及机制的实验研究[D];苏州大学;2006年
6 史焕昌;Celecoxib对实验性蛛网膜下腔出血脑血管痉挛作用研究[D];四川大学;2006年
7 彭惠;p38 MAPK信号系统在糖尿病视网膜病变中作用机制的实验研究[D];重庆医科大学;2007年
8 李书国;慢性心力衰竭大鼠的心脏交感神经重构及Carvedilol的保护作用研究[D];华中科技大学;2007年
9 朱剑锋;水合淫羊藿素(Icaritin)对慢性粒细胞白血病体外和体内的抗肿瘤作用及机制研究[D];中南大学;2009年
10 刘立伟;非β肾上腺素受体基因多态性对美托洛尔的降血压、心率及升高血脂作用影响的研究[D];中国协和医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 梁晓;rhG-CSF经鼻靶向中枢给药对SAH后继发性脑缺血损伤的保护作用[D];泰山医学院;2010年
2 杨涛;罗格列酮对人肝癌细胞株HepG2中p-p38MAPK及p-ERK1/2表达的影响[D];河北医科大学;2011年
3 曹宏;Erbin介导Her2与β2-AR相互作用及参与MAPK信号通路调控的探讨[D];河北医科大学;2011年
4 钟剑球;非甾体类抗炎药在强直性脊柱炎中的应用分析[D];汕头大学;2011年
5 左琳;心脏抗β_2—肾上腺素能受体自身抗体的临床与实验研究[D];山西医科大学;2004年
6 薛慧芳;辛伐他汀对大鼠蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛及eNOS和TNF-α的影响[D];中南大学;2007年
7 东梅;PKC-NF-κB信号传导途径在卵巢癌发生中的作用[D];中国医科大学;2008年
8 刘莉;蛛网膜下腔血性与非血性刺激物对脑血管影响的组织学比较[D];河北医科大学;2008年
9 魏岚;幼年强直性脊柱炎的早期临床特点、诊断标准及预后探讨[D];吉林大学;2009年
10 张梅英;MAPKS在高温致金黄地鼠神经管畸形中的表达及其意义研究[D];新疆医科大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 张幼怡,禹更生,陈明哲,韩启德;大鼠左心房α_1受体及其亚型对β受体正性变力效应的影响[J];生理学报;1994年05期
2 张海港,李晓辉;环氧酶亚型研究分析与展望[J];中国药理学通报;2004年01期
3 张幼怡,董尔丹,陈明哲,韩启德;大鼠α_1肾上腺素受体及其亚型影响β肾上腺素受体介导心肌正性变力效应的途径[J];中国药理学与毒理学杂志;1995年04期
4 张幼怡,韩启德,田斌,王丽枫,陈明哲;慢性心功不全大鼠心脏α_1受体对β受体正性变力效应调节作用的改变[J];中国病理生理杂志;1995年06期
5 徐超,张绍东,崔雯,朱凌;蛋白激酶C抑制剂Chelerythrine对缺血纹体γ-氨基丁酸和甘氨酸释放的影响[J];中华神经外科杂志;1998年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈伟;史忠;;TLR4信号转导通路中胞外分子之间的相互作用[J];医学综述;2006年09期
2 张德明,毛宝龄;内毒素耐受性与TLR4信号通路[J];生理科学进展;2003年03期
3 周才进;陈明;邱志东;姚关兵;徐浩;;TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸肝脏损伤中的作用研究[J];广东医学;2011年09期
4 李殷;GM-CSF网络在炎症反应与自身免疫疾病中的作用[J];国外医学.免疫学分册;2004年05期
5 孙霞;方浩;缪长虹;;不同麻醉方法对单核细胞mCD14与TLR4表达的影响[J];中国临床医学;2011年02期
6 于高水;杨玉荣;梁宏德;;Toll样受体研究进展[J];细胞生物学杂志;2009年03期
7 闵佳;赵为禄;胡春华;罗佛全;;体外循环围手术期单核细胞TLR4表达的动态观察[J];江西医学院学报;2006年02期
8 汤贤英;李晖;;Toll样受体4与病毒感染的研究进展[J];生命科学;2011年01期
9 盛富强;程龙献;周建华;曾秋棠;高文;王玮;;辛伐他汀干预心肌梗死大鼠心肌TLR4信号通路改善心室重构[J];中华高血压杂志;2009年01期
10 张瑜;金芬华;任志鹏;李芃;车永哲;;脑缺血后TLR4作用与小胶质细胞的激活[J];国际病理科学与临床杂志;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张德林;;Toll样受体信号通路在外科疾病中作用研究的最新进展[A];2008年第七次华东六省一市麻醉学学术会议暨浙江省麻醉学术年会论文汇编(上册)[C];2008年
2 林明群;张宗粱;;巨噬细胞免疫调变信号-PKA与PKC对MAPK信号通路的调节研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
3 高方;张琪;郑敏化;韩骅;;Notch信号通路对神经干细胞增殖分化的调控作用[A];中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会论文汇编集[C];2007年
4 韩家淮;;p38信号通路与炎症反应[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
5 杨丽霞;郭瑞威;齐峰;苗贵华;王先梅;石燕昆;李明秋;;MIF/AP-1/MMP-9信号通路血浆表达水平与冠状动脉病变程度的相关性研究[A];中华医学会心血管病学分会第十次全国心血管病学术会议汇编[C];2008年
6 胡勇;郭庆;曾凡钦;唐增奇;林燕辉;汤红峰;;TGF-B信号通路关键因子LTBP-1和TGF-βRⅡ与尖锐湿疣发病的相关性研究[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年
7 李菊香;丁浩;洪葵;万磊;苏海;吴延庆;吴清华;程晓曙;;ERK1/2信号通路介导心肌营养素-1对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年
8 张维溪;李昌崇;贺孝良;戴欢;方丽;赵瑞雪;;TGF-β 1/Smad信号通路在哮喘气道重塑中的作用[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年
9 李卓娅;;细胞骨架系统与细胞信号通路-Actin参与跨膜型TNF激活TNFR2凋亡信号通路[A];中国病理生理学会受体、肿瘤和免疫专业委员会联合学术会议论文汇编[C];2010年
10 杨艺敏;张颖;冯加纯;;Notch信号通路对大鼠脑缺血后神经再生调控作用的实验研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;我发现细胞内信号通路“对话”机制[N];上海科技报;2004年
2 刘海英;美发现两种细胞信号通路互动机制[N];科技日报;2009年
3 ;《细胞》发表裴钢院士最新研究成果[N];上海科技报;2009年
4 ;“细胞信号传递”新发现[N];上海科技报;2007年
5 ;电针能激活老年痴呆大鼠海马蛋白激酶信号通路[N];中国中医药报;2005年
6 记者 许琦敏;减肥信号受控于脑中“通讯员”[N];文汇报;2008年
7 衣晓峰 陈英云 记者 李丽云;结肠癌发生中新的信号通路找到[N];科技日报;2009年
8 衣晓峰;哈医大发现结肠癌发生中新的信号通路[N];中国医药报;2009年
9 记者 白毅;SAP-PIX通路调节T细胞活化[N];中国医药报;2006年
10 杨金志;我国科学家发现抑制败血症休克的新机制[N];大众科技报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 牛楠;急性冠脉综合征患者外周血单核细胞TLR4的表达及阿托伐他汀和中药厚朴酚对其的调节作用[D];大连医科大学;2008年
2 张德明;脂多糖结合蛋白多抗对内毒素急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞TLR4信号通路的影响[D];第三军医大学;2003年
3 王居平;TLR4乙酰化/甲基化修饰激活对炎症免疫的调节[D];浙江大学;2011年
4 徐文岳;TLR4和TLR2激动剂协同诱导SR-A受体表达及其在内毒素耐受中的作用[D];第三军医大学;2006年
5 周联;大黄素等中药单体对HT-29细胞TLR4表达及MAPKs信号通路的影响[D];广州中医药大学;2006年
6 王建明;TLR4信号转导通路活化在胃缺血再灌注损伤中的作用研究[D];昆明医学院;2010年
7 李昌麟;1.PMA诱导HL-60细胞分化过程中TLR2和TLR4以及CD14的表达动力学研究 2.小鼠巨噬细胞热休克反应通过IkBa/NF-kB信号通路抑制LPS诱导的白细胞介素12表达[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2002年
8 徐智;缺氧对大鼠TNF-α、IL-1β表达的影响及其调控机制的研究[D];第三军医大学;2006年
9 董伟;BCL10介导LPS/TLR4信号通路的机制研究[D];武汉大学;2006年
10 李春艳;β-连环素/T细胞因子4信号通路在非小细胞肺癌的研究[D];中国医科大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张兴;α肾上腺素能受体激动对TLR4信号通路影响的研究[D];大连医科大学;2011年
2 黄丽红;TLR4在高血压左室肥厚患者单核细胞中的表达[D];大连医科大学;2005年
3 宋咏梅;鸡TLR4信号通路与肠炎沙门氏菌感染关系的研究[D];中国农业科学院;2010年
4 郑仲谨;创伤患者外周血单核细胞TLR4/MD-2的表达及临床意义[D];第三军医大学;2002年
5 刘蓓;活化TLR4诱导单核细胞性白血病THP-1细胞凋亡机制的研究[D];中南大学;2007年
6 马林;TLR4/NF-κB信号通路在血管成形术后再狭窄过程中的作用[D];大连医科大学;2006年
7 徐文飞;RSV感染后中性粒细胞TLR4表达与功能研究[D];重庆医科大学;2008年
8 罗永金;缺血预处理对大鼠心肌TLR4和相关致炎细胞因子的影响[D];重庆医科大学;2009年
9 郭玮;极限强度训练对大鼠肝脏TLR4和相关因子的影响[D];北京体育大学;2011年
10 胡春艳;氯沙坦钾对腹膜透析大鼠腹膜纤维化组织中TLR4表达的影响[D];山西医科大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026