收藏本站
《大连医科大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

骨髓间充质干细胞定向分化肝细胞并肝内移植及软肝煎应用对肝纤维化形成大鼠肝功能影响的研究

安伟德  
【摘要】:再生医学是本世纪在生物医学史上重要工作之一。肝脏再生及干细胞的作用一直是大家研究的一个热点。目前干细胞移植研究多集中在胚胎干细胞、骨髓干细胞等,由于胚胎干细胞存在着伦理、法律、免疫排斥反应等问题,难以用于临床。自体骨髓来源肝细胞移植作为新的治疗肝衰竭病人方法已被人们所关注。最近研究表明,骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)具有多向分化潜能,包括向神经、血液、心肌、肝细胞等分化,这些引起了专家们对骨髓间充质干细胞可塑性的极大兴趣。骨髓来源肝细胞移植不仅解决自体肝细胞获取困难、增殖性差等问题,同时为肝脏再生组织工程研究提供了一个平台。为了探索骨髓间充质干细胞横向分化为肝细胞的作用机制,研究骨髓源性的肝细胞肝内移植定向分化,我们向肝纤维化形成大鼠肝脏内移植经诱导的骨髓间充质干细胞来源的肝细胞,观察其分布、分化情况,并观察联合应用中药软肝煎对肝纤维化形成大鼠肝脏功能改善的效果。 一.首先我们从SD 大鼠的股骨中提取骨髓干细胞,利用Percoll 分离液密度梯度离心法结合贴壁法实现骨髓间充质干细胞的体外分离纯化、培养、传代扩增。取第3 代的骨髓间充质干细胞,应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD34、CD45、CD31、CD90,对骨髓间充质干细胞进行鉴定。流式细胞仪观查结果显示CD34、CD45、CD31 阴性,CD44、CD90 阳性。表明提取、分离、培养是非骨髓造血细胞的骨髓间充质干细胞。取第3 代的骨髓间充质干细胞以1×106/cm2的密度分别种植在六孔培养板中,并加入肝细胞生长因子(HGF)终浓度为20ng/ml 表皮生长因子(EGF)终浓度为1.5μg /ml,进行定向肝细胞诱导分化,诱导过程中用倒置相差显微镜观察细胞形态变化。对诱导产生的细胞,应用免疫荧光法进行肝细胞特异性标志CK8、CK18 和白蛋白检测。其中细胞检测出有CK8、CK18 和
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R329;R285

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 马红;王宝恩;陈翌阳;马雪梅;;黄芪对肝纤维化治疗作用的实验研究[J];中华肝脏病杂志;1997年01期
2 马学惠,龚爱玉,尹镭,陈贤明,赵元昌,王蕊,韩德五;丹参对实验性肝硬化细胞外基质影响的免疫组化观察[J];肝脏病杂志;1994年02期
3 马学惠;肝纤维化动物模型的造模方法[J];中华肝脏病杂志;1996年01期
4 李延昌,孙玉凤,冯志杰,宋梅,孙泽明;赤芍抗肝纤维化的实验研究[J];中国中西医结合杂志;2003年10期
5 杨大国,王林杰,宋为云,李嘉琦,李永刚,孙小华,汪承柏;重用赤芍治疗慢性肝炎纤维化前后肝穿组织学的比较[J];中国中西医结合杂志;1994年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张国梁;;中医药防治肝纤维化研究进展[J];中医药临床杂志;2011年02期
2 王志敏;曹珂;;自拟丹赤退黄汤直肠滴入治疗婴儿巨细胞病毒肝炎临床研究[J];中医药临床杂志;2012年07期
3 张国梁,季红燕,高健,疏利珍,罗琼;“软肝饮”治疗慢性肝病肝纤维化48例疗效观察[J];安徽中医学院学报;1995年01期
4 刘星;鲍万国;牛俊奇;丁云录;;复方丹参对门脉高压症大鼠血流动力学的影响[J];吉林大学学报(医学版);2006年02期
5 刘树锋,蔡大勇,李澎涛,相萍茹;优化甘参复方抗肝纤维化组分配伍的研究[J];中华中医药杂志;2005年06期
6 杨倩;冯玉彦;蒋树林;;姚希贤瘀血论治慢性肝纤维化经验[J];中华中医药杂志;2007年03期
7 神兆玉,彭华彬,神克兰;丹参与黄芪注射液联用治疗慢性肝炎临床观察[J];滨州医学院学报;2000年06期
8 刘秀英,胡怡秀,胡余明,丘丰,周月婵,臧雪冰,聂焱;甘泰康对大鼠免疫性肝纤维化影响的研究[J];中国医师杂志;2004年11期
9 王晓昆;唐瑛;;肝纤维化动物模型研究进展[J];动物医学进展;2007年03期
10 蔡水泽;凯西莱联合黄芪注射液治疗酒精性肝炎疗效观察[J];临床医学;2003年07期
中国重要会议论文全文数据库 前6条
1 张杰;徐列明;;中医药治疗肝纤维化实验研究概况[A];2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2002年
2 杨海荣;喻道贵;;益肝抗纤汤治疗肝纤维化临床观察[A];第十三次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2004年
3 吴君;王一凡;闫超;刘芙蓉;;复方中药汉丹肝乐对砷暴露大鼠肝脏损伤的保护作用[A];全国第2届中西医结合传染病学术会议暨国家中医药管理局第1届传染病协作组会议论文汇编[C];2008年
4 聂广;张赤志;杨大国;盛国光;王伯祥;;肝络瘀阻证及其剔毒通络治法的系列研究[A];中华中医药学会内科分会学术年会资料汇编[C];2007年
5 刘树锋;蔡大勇;李澎涛;相萍茹;;优化甘参复方抗肝纤维化组分配伍的研究[A];全国中医药研究生专辑[C];2005年
6 姜莉莉;姚仕翔;王玉花;;当归补血汤与复方丹参注射液联合治疗慢性肝炎肝硬化36例[A];2002全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 那坤;柔肝颗粒对肝纤维化大鼠TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 贾爱芹;清肝抑纤饮及其拆方防治大鼠肝纤维化的实验研究[D];山东中医药大学;2010年
3 孙云松;和厥阴法对慢性肾衰模型干预作用的理论和实验研究[D];山东中医药大学;2011年
4 周焕城;新型双向旋转灌注重力生物反应器的研制与应用[D];南方医科大学;2011年
5 郝瑞春;雄芍汤防治肝纤维化作用及机理研究[D];湖北中医药大学;2011年
6 杨玲;抗纤软肝颗粒影响肝星状细胞增殖的作用机理研究[D];湖北中医学院;2002年
7 蒋树林;活血化瘀中药对SD大鼠肝纤维化防治作用及机制的研究[D];河北医科大学;2002年
8 彭彦辉;中药和硒对慢性肝纤维化的预防和治疗作用及其机理研究[D];河北医科大学;2002年
9 张万国;桑黄抗肝纤维化及其作用机理的研究[D];第二军医大学;2002年
10 李胜涛;抗肝纤268方防治实验性大鼠肝纤维化的研究[D];成都中医药大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卢言琪;加味生脉散配合放疗治疗气阴两虚型NSCLC临床疗效观察[D];黑龙江中医药大学;2010年
2 周云;柔肝冲剂对肝纤维化患者血清MMP-2的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
3 赵志艳;妇炎平栓剂的制备与质量控制研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
4 陈力锋;壮药狗肝菜中多糖抗肝纤维化的作用及对TGF-β1表达的影响[D];桂林医学院;2010年
5 谭璐东;大鼠胆总管结扎致肝硬化及肝肺综合征模型的建立[D];吉林大学;2011年
6 王于轩;慢性乙型肝炎肝组织IV型胶原表达与肝纤维化相关性研究[D];北京中医药大学;2011年
7 李慧;活血片抗免疫性大鼠肝纤维化的机制研究[D];北京中医药大学;2011年
8 蔡坤海;膈下逐瘀汤加一贯煎双复方治疗肝纤维化的临床和实验研究[D];广州中医药大学;2011年
9 曾祥婧;肝硬化文献及其5年住院患者回顾性研究[D];广州中医药大学;2011年
10 李娜;益气活血化痰法治疗尘肺病的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王泰龄,王宝恩,张怀宏,刘霞,段钟平,张晶,马红,李新民,李宁章;中药复方861对慢性肝炎肝纤维化治疗作用的病理研究[J];胃肠病学和肝病学杂志;1998年02期
2 孙玉凤;姚希贤;蒋树林;;肝纤维化的中医中药治疗[J];世界华人消化杂志;2000年06期
3 刘平,胡义杨,徐列明,李风华,顾宏图,刘成;扶正化瘀319方抗大鼠肝纤维化的研究[J];中国实验方剂学杂志;1997年04期
4 张国梁,高复安,李明,季红燕;软肝饮对肝硬化患者红细胞SOD、血浆LPO与血清LN、HA的影响[J];中西医结合肝病杂志;1996年02期
5 陈焰;凉血活血中药治疗前后6例活动性肝硬变的肝脏病理比较[J];中西医结合肝病杂志;1996年04期
6 马红,王宝恩,陈翌阳,马雪梅;黄芪对免疫损伤性肝纤维化大鼠的治疗作用[J];中西医结合肝病杂志;1997年01期
7 孙玉凤,崔东来,姚希贤;中西医结合抗肝纤维化的研究现状与进展[J];中国中西医结合脾胃杂志;2000年04期
8 马学惠;赵元昌;尹镭;韩德五;孙世荃;;丹参对肝纤维重吸收的作用[J];中西医结合杂志;1988年03期
9 戚心广;稻垣■;;丹参、赤芍对实验性肝损伤肝细胞保护作用的机理研究[J];中西医结合杂志;1991年02期
10 杨大国,王林杰,宋为云,李嘉琦,李永刚,孙小华,汪承柏;重用赤芍治疗慢性肝炎纤维化前后肝穿组织学的比较[J];中国中西医结合杂志;1994年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张永臣;许晓珣;赵伟;张亮;赵磊;文剑;;肝样细胞的诱导分化及处理胆红素的能力[J];东南大学学报(医学版);2009年05期
2 杨海军;易敬林;刘德伍;;体外诱导人骨髓间充质干细胞横向分化为角膜上皮细胞的可行性[J];中国组织工程研究与临床康复;2008年38期
3 吴金生;朱建祥;蒋吉英;王晓萃;丁洁;于树娜;魏德全;王宝松;;三种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年49期
4 张淑芹;叶东霞;刘淑荣;;肝细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞表达甲胎蛋白和白蛋白[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年27期
5 钟晓琳;李昌平;胡莲;万居易;;骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化[J];世界华人消化杂志;2007年06期
6 罗伟;肖恩华;;骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞的研究与进展[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年36期
7 王忠琼;夏世萍;刘彦;钟晓琳;李昌平;;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞(英文)[J];泸州医学院学报;2010年01期
8 王忠琼;李昌平;夏世萍;刘彦;钟晓琳;;大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞[J];基础医学与临床;2009年04期
9 梁峰;王韫芳;岳慧敏;南雪;施双双;闫舫;李荣;裴雪涛;;体外诱导人骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化[J];军医进修学院学报;2006年03期
10 陈燕玲;王燕;贲晓明;周晓玉;苗登顺;;表皮生长因子对外周血间充质干细胞原代克隆形成的影响及其传代后多向分化潜能[J];中国组织工程研究与临床康复;2009年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李昌平;钟晓琳;谭道玉;;骨髓间充质干细胞向肝细胞诱导分化的实验研究[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编(下册)[C];2007年
2 宋今丹;孙宝栋;正红梅;玉维琴;王芸庆;;经维甲酸诱导分化的大肠癌细胞的功能改变[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
3 张先杰;王莹;宋茂民;孙家邦;段钟平;陈煜;张晶;郑素军;;三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养及生物学特性的研究[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
4 陈鸣;管明;;肝细胞生长因子对兔上颌窦黏膜修复的研究[A];2007浙江省耳鼻咽喉—头颈外科学术会议论文汇编[C];2007年
5 袁彪;张永荣;赵忠;赵胜;;重组腺病毒-肝细胞生长因子基因治疗缺血性心脏病短期安全性与疗效学研究[A];中华医学会第七次全国胸心血管外科学术会议暨2007中华医学会胸心血管外科青年医师论坛论文集心血管外科分册[C];2007年
6 董学君;陈烨;邵健忠;张国荣;项黎新;;细胞因子诱导小鼠骨髓间充质干细胞跨越分化肝细胞的研究[A];2007年浙江省医学检验学学术年会论文汇编[C];2007年
7 张青;;2型糖尿病肾病患者血清肝细胞生长因子水平与低密度脂蛋白关系[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 李伟;罗端德;贺永文;;骨髓间充质干细胞体外培养定向分化为肝细胞样细胞的初步探讨[A];第二届全国人工肝及血液净化学术年会论文集[C];2005年
9 王兴木;李青华;;血清肝细胞生长因子在慢性肾小球肾炎中的作用[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
10 何伟;沈薇;;肝细胞生长因子抗大鼠肝纤维化作用及其机制的探讨[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 曾繁玉 魏妍平;表皮生长因子研究获突破[N];健康报;2004年
2 杨昆;表皮生长因子——修复健康与美丽[N];经济参考报;2002年
3 杨昆;表皮生长因子[N];中国医药报;2002年
4 杨昆;神奇的表皮生长因子[N];山东科技报;2002年
5 赵炜;骨髓间充质干细胞可减轻排异反应[N];健康报;2004年
6 通讯员 王根华 记者 陈青;诱导分化 让癌细胞“改邪归正”[N];文汇报;2008年
7 ;诱导分化让癌细胞有了“克星”[N];上海科技报;2008年
8 胡德荣;低氧环境诱导急粒白血病细胞系分化[N];健康报;2006年
9 记者 王春;我学者认知一个新的蛋白质结构域[N];科技日报;2004年
10 ;表皮生长因子受体抑制剂在治疗非小细胞肺癌中的作用[N];医药经济报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 安伟德;骨髓间充质干细胞定向分化肝细胞并肝内移植及软肝煎应用对肝纤维化形成大鼠肝功能影响的研究[D];大连医科大学;2005年
2 邢小丽;大鼠视网膜匀浆上清液体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞实验研究[D];天津医科大学;2008年
3 张翊华;人胎儿骨髓间充质干细胞与小鼠糖尿病治疗[D];西北农林科技大学;2007年
4 顾绍峰;兔骨髓间充质干细胞分化为角膜上皮样细胞的体外研究[D];中国医科大学;2008年
5 周一鸣;干细胞分化及其对急性肝衰竭大鼠治疗的实验研究[D];第三军医大学;2005年
6 周密;肝细胞生长因子修饰的骨髓间充质干细胞治疗兔股骨头坏死的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
7 滕春燕;骨髓间充质干细胞对急性胰腺炎损伤修复及其机制的实验研究[D];吉林大学;2009年
8 曲德伟;NT-3基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究[D];吉林大学;2007年
9 王楠;磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C调节成体干细胞分化和凋亡的研究[D];山东大学;2007年
10 杨光;骨髓间充质干细胞修复大鼠周围神经损伤的实验研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 顾丽丽;人骨髓间充质干细胞的体外培养及其向肝细胞诱导分化的实验研究[D];江西医学院;2005年
2 刘元志;胃泌素和表皮生长因子体内诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的实验研究[D];中国医科大学;2009年
3 杨芬;体外分离培养MSCs定向诱导为胰岛素分泌细胞[D];青岛大学;2008年
4 周健;HaCaT细胞诱导MSCs向表皮干细胞分化机制的研究[D];中南大学;2009年
5 张稷;骨髓间充质干细胞向心肌细胞的诱导分化及心肌梗死治疗的实验研究[D];苏州大学;2006年
6 吴陈欢;小鼠骨髓间充质干细胞体外培养及其向成骨细胞诱导分化的实验研究[D];大连医科大学;2009年
7 赵美子;大鼠骨髓源性间充质干细胞定向诱导分化为肝细胞的实验研究[D];吉林大学;2007年
8 段祥;骨髓间充质干细胞向神经细胞、成骨细胞诱导分化的研究[D];苏州大学;2007年
9 白彦东;人骨髓间充质干细胞向软骨诱导分化的基础研究[D];大连医科大学;2008年
10 陈美娟;人骨髓间充质干细胞体外培养及向肝样细胞诱导分化的实验研究[D];浙江大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026