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《大连医科大学》 2009年
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补骨脂及双氢青蒿素对隐孢子虫感染小鼠抗原呈递细胞功能调节作用的观察

潘微  
【摘要】: 背景:隐孢子虫(Cryptosporidium)是一类机会致病性寄生虫,主要引起包括人类在内的多种脊椎动物发生隐孢子虫病(cryptosporidiosis),给人类的健康带来严重的危害。隐孢子虫呈全球性分布,种类较多。其中与人类致病有密切关系的虫种主要有两种:①人隐孢子虫(Cryptosporidium hominis, C.hominis),主要在人群中广泛传播,引起人类隐孢子虫病;②小球隐孢子虫(Cryptosporidium parvum, C.parvum),它是一种人兽共患寄生虫,除引起人类疾病外,还能感染多种哺乳动物导致其身体损害。 以往研究表明,隐孢子虫感染(病)的持续时间及发病程度取决于宿主免疫状况。在隐孢子虫感染以及致病过程中,宿主细胞免疫及体液免疫对抵抗本虫感染起重要作用。其中,CD4+T细胞和IFN-γ在清除感染、消除炎症反应过程发挥了至关重要的作用。大量研究提示我们可以通过抑杀原虫和提高宿主免疫力这两条途径来控制和消除隐孢子虫感染。 近20年来,国内外研究虽然在隐孢子虫的病原学、分子生物学及综合防治技术等方面取得了一定的成果,但对在隐孢子虫病感染免疫以及药物治疗等方面研究较少。迄今为止,人类尚未开发出理想的抑杀隐孢子虫的药物。 目的:本文通过对中药补骨脂、双氢青蒿素和两种药物配伍分别治疗隐孢子虫感染的小鼠。观察治疗前后,各组小鼠免疫相关指标的变化情况,进而分析和探讨我国传统中药的杀虫作用,及其对宿主肠道免疫系统中抗原呈递细胞功能的调节作用,从而为隐孢子虫感染(病)的免疫防治提供新的思路和方法。 材料与方法:将60只昆明小鼠随机分成五组:阳性对照组(B组)、双氢青蒿素治疗组(C组)、补骨脂治疗组(D组)和二者配伍治疗组(E组),正常对照组(A组)。并按治疗时间的不同,将每组分成1周治疗组(C1、D1、E1)、2周治疗组(C2、D2、E2)和阳性对照组(B1、B2),同时设A1和A2二个正常对照组。将B、C、D、E组的48只昆明小鼠经腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠注射液,隐孢子虫感染模型建立成功后,进行中药治疗。每组治疗结束后,观察粪便卵囊排出量、测量小鼠外周血中IL-12p70含量,进行组织病理学与电镜超微结构观察。同时,检测回肠中MHC-Ⅱ类抗原的表达情况。所得数据用x±s表示,用SPSS10.0统计软件,各组间进行单因素方差分析,用P表示。 结果:所有药物治疗组,粪便卵囊量与阳性对照组相比均明显减少(P0.01),小鼠肠壁组织病变得以修复。在经药物治疗1周后,C1组MHC-II类抗原的表达显著高于A1组和E1组(P0.05);C1与D1血清IL-12p70的含量明显高于A1、B1、E1,C1明显高于D1(P0.01)。治疗2周后,C2、D2、E2组MHC-II类抗原的表达与正常对照组A2组无差别,但明显高于阳性对照组(P0.05);C2与D2组的IL-12p70水平明显高于A2、B2、E2,而且C2明显高于D2(P0.01)。 结论: 1、中药补骨脂、双氢青蒿素以及二者合剂配伍均可通过提高抗原呈递细胞的活性,使MHC-Ⅱ类抗原的表达增强,提高血清中IL-12p70的含量,进而增强机体对隐孢子虫感染的免疫应答反应,清除原虫感染,以达到治疗隐孢子虫感染的目的。 2、三个实验组中,双氢青蒿素抑杀虫体的效果最为明显。实验发现双氢青蒿素对抗原呈递细胞的效果作用最强,诱导血清IL-12p70含量提高最明显,可以有效防治小鼠隐孢子虫感染。 3、隐孢子虫在宿主肠黏膜上皮细胞内寄生过程中,可能抑制或损害抗原呈递细胞对外源性抗原的应答能力,导致抗原呈递细胞MHC-Ⅱ类抗原的表达能力显著降低,减低血清中IL-12p70生成量,从而抑制宿主对隐孢子虫感染的免疫过程,促进隐孢子虫病的发展。
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R285

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