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《大连医科大学》 2009年
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转录因子T-bet/Gata-3在急性肺损伤中的失衡表达和调节的实验研究

李萍  
【摘要】: 目的:探讨T细胞特异性转录因子T-bet/Gata-3在急性肺损伤中的表达,进一步用地塞米松与脂质前列腺素E_1两种药物分别对急性肺损伤进行干预,探讨其对转录因子T-bet/Gata-3的影响及其对Th_1/Th_2平衡的调节作用。 方法: 60只雌性BALB/C小鼠随机分成四组:A组:对照组(生理盐水组),B组:模型组[脂多糖(LPS)组],C组:激素组(LPS+地塞米松组),D组:前列腺素E_1组[LPS+脂质前列腺素E_1(PGE_1)组]。采用尾静脉注射LPS方法制备BALB/C小鼠急性肺损伤模型,其中C、D组于注射LPS后1小时分别给予地塞米松与PGE_1进行干预。各组于6小时后观察肺组织变化,并测定肺湿/干比重和肺系数。采用流式细胞仪检测Th_1、Th_2型细胞因子的表达。SYBR Green I实时荧光定量PCR技术建立组织因子T-bet和Gata-3标准品和标准曲线,并检测它们mRNA的表达。 结果: 1、急性肺损伤模型制备良好,病理证实有肺出血、水肿、渗出及中性粒细胞浸润,而且肺湿重/肺干重较对照组增加(5.74±0.31 vs 4.79±0.27,P﹤0.05)。与模型组比较,地塞米松与脂质前列腺素E_1可减轻上述改变。 2、模型组Th_1、Th_2细胞的阳性率较对照组显著降低﹙16.65±1.7 vs 23.67±2.1, 9.4±1.25 vs 12.17±1.8, P﹤0.05﹚,以Th_1细胞降低更明显,Th_1 /Th_2明显下降﹙1.733±0.03 vs 1.945±0.04, P﹤0.05﹚。 3、相对于模型组,地塞米松干预组的Th_1、Th_2细胞阳性率均明显下降﹙12.52±1.5 vs 16.65±1.7, 7.5±0.8 vs 9.4±1.25, P﹤0.05﹚,Th_1/Th_2明显降低﹙1.667±0.05 vs 1.733±0.03, P﹤0.05﹚;而PGE_1组Th_1细胞阳性率升高﹙20.31±2.2 vs 16.65±1.7, P﹤0.05﹚,Th_2细胞阳性率亦升高﹙10.5±0.8 vs 9.4±1.25, P﹤0.05﹚,Th_1/Th_2升高﹙1.933±0.05 vs 1.733±0.03, P﹤0.05﹚。 4、较对照组,模型组转录因子T-bet与Gata-3低转录﹙ 1.1831±0.49452 vs 3.4393±0.55731, 0.6927±0.28513 vs 1.2027±0.23827, P﹤0.05﹚ , T-bet/Gata-3基因表达量比值低下﹙ 1.7132±0.13057.vs 2.8569±0.28988, P﹤0.05﹚;与模型组比较,地塞米松抑制转录因子T-bet基因的表达﹙0.7415±0.2489 vs 1.1831±0.49452, P﹤0.05﹚,T-bet/Gata-3比值降低﹙1.2605±0.15206 vs 1.7132±0.13057, P﹤0.05﹚,脂质前列腺素E_1增加了T-bet基因的表达﹙1.8265±0.70469 vs 1.1831±0.49452, P﹤0.05﹚ , T-bet/Gata-3比值明显增高,差异有显著性﹙ 2.5024±0.35236 vs 1.7132±0.13057, P﹤0.05﹚。 结论: 1、急性肺损伤小鼠中T-bet和Gata-3mRNA低表达,T-bet/Gata-3 mRNA比值也下降,证实急性肺损伤存在T-bet/Gata-3mRNA表达失衡。 2、地塞米松抑制了T-betmRNA的表达,从而降低了T-bet/Gata-3 mRNA的比值,使Th_1/Th_2比值降低,即通过上游机制调控ALI的Th_1/Th_2比率。 3、脂质体前列腺素E_1能够增加T-bet基因的表达,从而增加T-bet/Gata-3比率,通过上游机制使Th_1/Th_2比率增加,逆转ALI的Th_1/Th_2失衡。
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R563

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