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《大连医科大学》 2010年
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在人真皮成纤维细胞中SPC诱导TIMP-1的表达

时磊  
【摘要】: 皮肤创伤愈合是一种复杂的病理性组织再生过程,涉及一系列相互影响相互重叠的反应,其中包括首发的炎症反应、肉芽组织的形成、细胞外基质的产生以及新生组织的塑形。在皮肤创伤愈合过程中的每一步反应阶段都离不开真皮成纤维细胞的参与,成纤维细胞通过细胞的增殖、细胞外基质的合成和细胞迁移、粘附活动等方式帮助创伤愈合的完成,所以人真皮成纤维细胞在皮肤创伤愈合过程中有着不可替代的作用。国内外研究证实神经鞘氨醇磷酸胆碱(sphingosylphosphorylcholine, SPC)可促进皮肤创伤愈合。这可能与SPC具有促进多种参与皮肤创伤愈合相关细胞增殖水平的作用有关(如表皮角质形成细胞、真皮成纤维细胞、皮脂腺细胞、毛囊细胞及血管内皮细胞),以及促进血管再生、细胞迁移粘附、细胞骨架再生及其相关蛋白的表达有关。SPC可能通过与细胞膜表面受体特异性结合,作为第二信使激活信号传导途径,调节细胞因子活性,尽而发挥一系列生物学作用,参与皮肤的创伤愈合。但SPC促进皮肤创伤愈合过程中细胞生理状态和蛋白类物质表达的变化方面,进而涉及到具体机制方面还有待于进一步研究。 皮肤创伤愈合过程中的组织重塑依赖于在基质金属蛋白酶(matrix matalloproteinase, MMPs)的作用下细胞外基质的重建过程,其中在一定的时期也受到基质金属蛋白酶内源性组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase, TIMPs)的调控。MMPs/TIMPs体系的变化调节细胞外基质的沉积和降解之间的平衡。TIMPs通过结合MMPs,抑制其活性,进而影响正常细胞以及肿瘤细胞的增殖、迁移,特别是在创伤愈合过程中发挥着不可替代的作用。因此通过观察TIMP-1的表达变化可从一个方面猜想皮肤创伤愈合的效率。 目的:研究神经鞘氨醇磷酸胆碱在体外培养人真皮成纤维细胞的增殖作用以及对创伤愈合相关蛋白TIMP-1表达的影响。探讨SPC发挥生物学作用的又一途径,进一步证实SPC促皮肤创伤愈合的作用。 方法:取3个个体包皮环切术的包皮组织为组织来源,原代培养人真皮成纤维细胞,传代培养12代以内的单层成纤维细胞为研究对象。在体外细胞培养条件下,通过MTT方法检测SPC的浓度梯度(0.1,1,5,10,20μM)干预人真皮成纤维细胞增殖能力的影响。半定量RT-PCR检测各组人真皮成纤维细胞TIMP-1mRNA表达情况变化。Western blotting免疫印迹法鉴定人真皮成纤维细胞在SPC干预下TIMP-1蛋白表达水平的变化。 结果:不同浓度的SPC对人真皮成纤维细胞增殖具有不同程度的促进作用,5μM组和10μM组增殖促进现象较对照组明显,且SPC促人真皮成纤维细胞的增殖情况存在对SPC的浓度依赖性,5μM组和10μM组增殖促进现象较对照组明显,SPC干预浓度与成纤维细胞增殖情况呈相关性(P0.05)。RT-PCR结果显示5μM的SPC具有上调成纤维细胞TIMP-1 mRNA的表达作用,当SPC浓度达到20μM时,TIMP-1 mRNA的表达产生抑制作用,检测物OD值与B-actin OD值的比值对照组为0.768±0.339、5μM组为1.062±0.961、20μM组为0.490±0.138,P0.05,表示差异有统计学意义。5μM的SPC以时间梯度(2、6、12、24和48小时)干预成纤维细胞后,TIMP-1 mRNA的表达水平产生了不同程度的变化,各组与无药物对照组相比6小时组、12小时组、24小时组TIMP-1 mRNA表达增强,OD值与B-actin OD值的比值对照组为0.357±0.636,6小时组为0.888±0.162,12小时组为0.761±0.156,24小时组为0.736±0.063,P0.05,表示差异有统计学意义。SPC作用下TIMP-1 mRNA的表达水平增强呈现时间依赖性,OD值与B-actin OD值的比值对照组为0.357±0.636,6小时组为0.888±0.162,12小时组为0.761±0.156,24小时组为0.736±0.063,P0.05,表示差异有统计学意义。依此可认为受SPC诱导的TIMP-1 mRNA表达的最佳作用时间为12小时左右。免疫印记实验显示SPC促进TIMP一1蛋白的表达,并同样呈现时间的依赖性。6小时组和12小时组P0.05,24小时组与48小时组P0.01,均表示差异有统计学意义。 结论:1.SPC可促进人真皮成纤维细胞的增殖,且增殖情况与SPC浓度呈相关性。2.SPC具有调节人真皮成纤维细胞TIMP-1的表达作用,并以此参与调控皮肤的创伤愈合过程。
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R641

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 段海峰,王立生,吴祖泽;鞘氨醇-1磷酸盐的生理功能研究进展[J];生理科学进展;2003年01期
2 刘智敏;基质金属蛋白酶的结构、功能和调节[J];生物医学工程学杂志;2002年04期
3 朱明姬;朴永君;姜日花;;神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞基因表达的影响[J];中国皮肤性病学杂志;2009年07期
4 朱平;严励;陈黎红;杨川;劳国娟;程桦;;MMP-9/TIMP-1表达在糖尿病鼠皮肤伤口愈合过程中的变化及意义初探[J];中国病理生理杂志;2008年11期
5 冯军,邓列华,赵刚,陆涛,蒋光愉,夏潮湧,刘洁,林泽;基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1在皮肤鳞状细胞癌中的表达[J];中华皮肤科杂志;2004年07期
6 朱明姬,蒋忠民,丛宪玲,丛建军,李增勋,陈远耀;神经鞘氨醇磷酸胆碱对原代培养人真皮成纤维细胞DNA合成影响[J];中国实验诊断学;2004年02期
7 杨红明;李凤玉;柴家科;曹卫红;梁黎明;宋慧峰;许明火;于燕;盛志勇;;脂多糖对皮肤成纤维细胞生物学特性的影响及与创面愈合的关系[J];中国修复重建外科杂志;2006年09期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 潘虹;刘铭;张晓莉;张雪;黄君富;王珏;刘春江;帅维正;张可珺;府伟灵;;非小细胞肺癌组织中MMP-12的表达及临床意义[J];第三军医大学学报;2010年02期
2 刘洁;魏羽佳;宋守荣;;基质金属蛋白酶及其与皮肤肿瘤的转移及侵袭[J];贵州医药;2006年03期
3 高磊;李连之;李文智;;基质金属蛋白酶活性中心肽段的合成及纯化[J];化学研究与应用;2009年03期
4 李志红;房辉;张云良;郭淑琴;甄艳凤;;血清MMP-2及其组织抑制因子-1与糖尿病足的关系[J];临床检验杂志;2010年05期
5 王拴柱;马秀梅;;细胞外基质与肿瘤转移关系的研究进展[J];内蒙古医学院学报;2009年01期
6 王翠青;申家泉;;基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与原发性开角型青光眼的研究[J];山东大学耳鼻喉眼学报;2006年03期
7 丁依玲,李婵娟;基质金属蛋白酶2,9在胎膜早破产妇胎膜的表达变化[J];实用妇产科杂志;2005年03期
8 王静,胡小松,石阶平;鞘脂与细胞凋亡[J];生理科学进展;2003年03期
9 刘圣红;苟萍;;鞘脂类的研究进展[J];生物技术;2009年02期
10 赵欣华;;痹痛灵颗粒对佐剂性关节炎大鼠血清及滑膜液中VEGF、MMP-3含量的影响[J];实用中西医结合临床;2009年04期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李志红;糖尿病足患者外周血基质金属蛋白酶-2和-9表达的研究[D];河北医科大学;2011年
2 刘晓岚;人骨髓基质干细胞成软骨诱导及多孔复合材料作为细胞载体的体外实验研究[D];中南大学;2003年
3 王静;鞘脂与PPAR相互作用及其对癌细胞凋亡调控的影响[D];中国农业大学;2004年
4 朱明姬;利用基因芯片技术及抑制性削减杂交技术研究神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞基因表达的影响[D];吉林大学;2004年
5 郭波;CD147/Basigin、TAP63/△ NP63与眼睑基底细胞癌发病机制的相关研究[D];四川大学;2004年
6 杨毅宁;年龄相关的基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)表达差异对小鼠急性心肌梗死后心脏破裂及早期左室重塑的影响[D];新疆医科大学;2006年
7 夏睿;MMP13在关节炎软骨中的表达及RNAi对其抑制作用的实验研究[D];苏州大学;2006年
8 刘红春;RIP2小干扰RNA表达质粒对小鼠巨噬细胞及内毒素血症的影响[D];复旦大学;2007年
9 肖文峰;前交叉韧带分束及其断裂对外侧胫骨平台影响的力学和组织学研究[D];中南大学;2008年
10 龚谋春;1-磷酸鞘氨醇保护无血清状态下内皮祖细胞的作用及机制的研究[D];第二军医大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李慧荣;CD44v6与MMP-9在腺样囊性癌中的表达及意义[D];山西医科大学;2011年
2 刘竹;人ACER2基因启动子的结构与功能的研究[D];重庆医科大学;2011年
3 罗翔;光敏剂5-氨基酮戊酸对强脉冲光嫩肤治疗的影响[D];中南大学;2011年
4 张琳琳;重组蛋白包涵体变复性过程优化及折叠机制探索[D];华东理工大学;2011年
5 胡珊;SPC对人真皮成纤维细胞中MMP-1、MMP-2、MMP-3表达影响的研究[D];大连医科大学;2011年
6 孙丽莉;口腔干预措施对动脉粥样硬化影响的实验动物研究[D];山西医科大学;2012年
7 高波;基质金属蛋白酶-3及其启动子基因5A/6A多态性、白介素-1与冠心病关系的研究[D];天津医科大学;2004年
8 张玲;苯暴露诱导体外培养大鼠骨髓细胞凋亡及基因差异表达的研究[D];武汉大学;2004年
9 王伟明;胎膜早破孕妇血清IL-6、IL-8的含量与胎膜基质金属蛋白酶的相关性研究[D];河北医科大学;2004年
10 孙晓军;种植体周围龈沟液中金属基质蛋白酶-8及其组织抑制剂-1水平的研究[D];山西医科大学;2005年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 杨红明,付小兵,柴家科,盛志勇,Magaret Hughes Goerge W Cherry;脂多糖对皮肤纤维母细胞和表皮细胞的影响[J];解放军医学杂志;2000年06期
2 郝钰;徐泊文;郑宏;王谦;邱全瑛;黄启福;;小檗碱抑制高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的研究(英文)[J];中国病理生理杂志;2007年03期
3 徐庆中,段会玲,卢德宏,杨虹;星形细胞瘤的胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白免疫组织化学定量研究[J];中华病理学杂志;1994年02期
4 杜娟,张建中,朱铁君,涂平,刘桂英;p27、细胞周期素D_1在恶性角质形成细胞肿瘤中的表达[J];中华皮肤科杂志;2001年04期
5 朱明姬,蒋忠民,丛宪玲,丛建军,李增勋,陈远耀;神经鞘氨醇磷酸胆碱对原代培养人真皮成纤维细胞DNA合成影响[J];中国实验诊断学;2004年02期
6 黄勇,任林森,岑瑛;瘢痕成纤维细胞培养及其生物学行为的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;1998年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 卞红磊,赵春芳,魏艳静;基质金属蛋白酶-9及其组织金属蛋白酶抑制剂-1表达与大肠癌侵袭转移的研究[J];南京医科大学学报(自然科学版);2004年06期
2 李莉,张声,林华,林建银;基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制剂表达失衡与胃癌浸润转移的关系[J];癌症;2002年03期
3 朱金海,陈燕凌,黄建富,殷凤峙;基质金属蛋白酶及其组织抑制物表达与壶腹癌侵袭转移的关系[J];中华普通外科杂志;2003年04期
4 许守辉,吕刚;基质金属蛋白酶及其抑制因子在软骨肉瘤中的表达[J];中国骨肿瘤骨病;2004年04期
5 王军,相丽,阎丽平,付海波,罗兵;基质金属蛋白酶组织抑制物-1 mRNA在胃癌组织中的表达[J];青岛大学医学院学报;2003年01期
6 王艳,李富华;血清MMP-2检测的临床应用[J];现代中西医结合杂志;2003年22期
7 蒋炜,王吉耀,杨长青,王逸青,贺伯明,刘文滨;反义金属蛋白酶组织抑制因子-1表达质粒对实验性肝纤维化的影响[J];肝脏;2003年03期
8 王喜梅,孙雷,刘逢吉,张朝,张众;甲状腺乳头状癌MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达对肿瘤侵袭转移的影响[J];实用癌症杂志;2004年02期
9 张弘,韩喜春,王悦书,韩刚,姜伟栋;基质金属蛋白酶抑制剂-3基因转染抗人肝癌细胞系侵袭与转移的研究[J];中华普通外科杂志;2004年06期
10 徐娅苹,陈鸣;基质金属蛋白酶及其抑制剂在腮腺肿瘤中的表达[J];临床耳鼻咽喉科杂志;2004年09期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 张磊涛;殷学民;黄洪章;;TIMP-2基因过表达抑制成釉细胞瘤侵袭性生长的实验研究[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
2 王永贤;刘平;应朝霞;葛文娱;;强脉冲光对培养的人成纤维细胞表达MMP-1和TIMP-1的影响[A];2010全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2010年
3 姜艳;罗小良;靳路远;谢晓莉;;大蒜素对人牙周膜成纤维细胞MMP-1和TIMP-1表达的影响[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
4 谢梅林;;阿司匹林通过PPAR α/γ和TIMP1介导机制抑制MMP-2和MMP-9的表达及活性[A];苏州市自然科学优秀学术论文汇编(2008-2009)[C];2010年
5 赖逸贵;区志穗;罗仁;刘友章;宋雅芳;;胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜MMP1与TIMP1mRNA表达的影响[A];中华中医药学会第二十二届全国脾胃病学术交流会暨2010年脾胃病诊疗新进展学习班论文汇编[C];2010年
6 钟理;何国祥;李德;冉擘力;景涛;唐波;;腺病毒介导TIMP-4基因转染对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
7 左俏;夏丽芳;王战建;;糖尿病大鼠肺脏AGES、TGF-β1、MMP-9和TIMP-1的表达及人工虫草和罗格列酮对肺脏的保护作用[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
8 钟理;何国祥;李德;冉擘力;景涛;唐波;;腺病毒介导TIMP-4基因转染对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
9 钟理;何国祥;李德;冉擘力;景涛;唐波;;逆向酶谱法检测TIMP-4抑制MMPs酶解活性[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年
10 叶永安;田德录;朱陵群;王满霞;张立石;刘红;李晓林;张良;;慢肝消对乙醛作用下星状细胞TIMP—1及IL—6mRNA表达的影响[A];第十二次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;2004年度国家科技进步奖获奖项目之一(二等奖)[N];中国医药报;2005年
2 付东红;肿瘤转移有重要标记物[N];健康报;2002年
3 本报通讯员;市中医两项科研达国内领先水平[N];济南日报;2011年
4 ;QQ为何如此耗费资源[N];电脑报;2005年
5 中国医学科学院医药生物技术研究所 徐峰;阻断肿瘤推进步伐[N];医药经济报;2001年
6 付东红;北大基础医学院基质金属蛋白酶作用机理初步揭示[N];人民日报海外版;2003年
7 陈茂梁 余宁宁;浙医二院解决脑癌治疗难题[N];中国医药报;2001年
8 印高乐;台湾医生发现羊膜具有抑制血管增生功能[N];中国高新技术产业导报;2002年
9 印高乐;羊膜可抑制血管增生[N];医药经济报;2002年
10 记者 陈茂梁 通讯员 余宁宁;肿瘤侵袭转移会露出“马脚”[N];健康报;2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 宁豪;TIMP-3对树突状细胞免疫功能的影响及其机制的研究[D];山东大学;2012年
2 陶国全;TIMP1在结直肠癌中的作用及其调控机制研究[D];南方医科大学;2013年
3 侯予龙;转染TIMP-1-shRNA基因的骨髓间充质干细胞治疗大鼠缺血性心肌病的实验研究[D];苏州大学;2010年
4 李鹏;CCNL1和TIMP1基因对人乳腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响[D];吉林大学;2012年
5 陈俊香;TIMP-1通过PTEN途径影响衰老相关肾脏微血管生成障碍的机制研究[D];中南大学;2009年
6 王春玲;TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2的表达对人类单核细胞白血病细胞系SHI-1细胞侵袭力影响的研究[D];苏州大学;2010年
7 董静;PAR-1,HIF-1a,MMP-9及TIMP-1在人脑出血灶周表达的实验研究[D];吉林大学;2012年
8 金蕊;特发性眼眶炎性假瘤发病分子机理研究[D];北京工业大学;2010年
9 周少飞;乳头状甲状腺癌患者外周血中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的研究[D];山东大学;2013年
10 谢国平;膝骨关节炎中医证型与关节液中MMPs TIMP-1等指标的相关性研究[D];广州中医药大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张显娟;TGF-β1、MMP-2和TIMP-2在煤工尘肺病中的表达及意义[D];山西医科大学;2011年
2 郜菲;益气活血化痰通络法对脑缺血小鼠海马组织MMP-9、TIMP-1表达的影响[D];河北医科大学;2011年
3 冯未萍;MMP-13、MMP-14、TIMP-1在压力性尿失禁患者阴道壁组织中的表达[D];郑州大学;2010年
4 曹纪伟;MMP-9及其抑制剂TIMP-1、TIMP-2在非小细胞肺癌中的表达与临床意义[D];广西医科大学;2010年
5 李勇子;TIMP-2基因转染FDM豚鼠模型早期后部巩膜MMP-2动态表达研究[D];青岛大学;2010年
6 孙华丽;CTGF和TIMP-1shRNA表达质粒共转染对肝星状细胞细胞因子及细胞外基质分泌的影响[D];泸州医学院;2010年
7 李煜;改变食物硬度对大鼠生长早期髁状突软骨中VEGF、aggrecanase-1和TIMP-3表达的影响[D];广西医科大学;2010年
8 张丽丽;TGF-β1、MMP1、TIMP1在绝经后盆腔器官脱垂患者阴道壁组织中表达的研究[D];郑州大学;2010年
9 杨星星;新生大鼠缺氧缺血性脑损伤MMP-2、MMP-9和TIMP-1动态变化及对细胞凋亡的影响[D];山西医科大学;2011年
10 时磊;在人真皮成纤维细胞中SPC诱导TIMP-1的表达[D];大连医科大学;2010年
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