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《辽宁中医药大学》 2013年
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桃红四物汤调节内皮细胞功能、治疗动脉硬化闭塞症的实验研究

李润生  
【摘要】:目的: 探讨桃红四物汤调节血管内皮细胞功能、治疗动脉硬化闭塞症(arteriosclerosisobliterans,ASO)的作用。 材料与方法: 材料:6~8个月龄清洁级Wistar大鼠50只,体质量(200±20)g,由辽宁中医药大学实验动物中心提供。高脂饲料组成:62.8%基础饲料+20%猪油+150g/L胆固醇+20g/L胆酸钠+2g/L丙基硫氧嘧啶。酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent,ELISA)双抗体夹心法检测试剂盒均购自上海越研生物技术有限公司,白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1,批号AE98022Ra),肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α,批号AE90133Ra),内皮素1(Endothelin-1,ET-1,批号AE90650Ra)。一氧化氮(Nitric oxide,NO)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所(批号:201209)。兔抗鼠抗Ⅷ因子-异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)抗体购自武汉博士德生物公司。 方法:采用高脂饮食饲喂及动脉内膜损伤的方法制作大鼠ASO模型,共制作大鼠ASO模型40只,采用随机数字表法分为模型组,桃红四物汤低、中、高浓度组,每组9~12只。另取10只清洁级Wistar大鼠作为正常组。造模后8周用激光多普勒血流仪观测肢体血流灌注,光镜、透射电镜观察动脉大体形态,Percoll密度梯度离心法测定循环内皮细胞(circulating endothelial cells, CECs)数量,ELISA双抗体夹心法检测血清中TNF-α、IL-1、ET-1和NO水平。 结果: ASO模型制作成功。与正常组相比,造模后各组大鼠左后肢血流灌注均有所下降。与模型组相比,桃红四物汤中、高浓度组血流灌注明显改善(P<0.01)。与正常组相比,造模后各组大鼠的血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平明显升高,高密度脂蛋白水平明显降低,差异均有极显著意义(P<0.01)。与模型组相比,桃红四物汤中、高浓度组的血清胆固醇、甘油三酯水平明显下降,差异均有极显著意义(P<0.01)。正常组外周血中CECs的数量极少,造模后各组大鼠外周血中CECs数量明显增多,与正常组相比,差异有极显著意义(P<0.01)。与模型组相比,桃红四物汤中、高浓度组CECs数量明显下降。造模后各组大鼠的血清TNF-α、IL-1、ET-1水平均较正常组大鼠明显升高,血清NO水平较正常组明显降低,差异均有极显著意义(P<0.01),应用桃红四物汤治疗后,各组血清中的TNF-α、IL-1、ET-1、NO水平均有改善,以高浓度组的变化最为明显。 结论: 1关于ASO的发病机制: 内皮细胞的损伤及ET-1、TNF-α、IL-1和NO分泌功能的异常是ASO发生的重要病理过程。 2桃红四物汤治疗ASO的机制: 桃红四物汤能够改善ASO的肢体血流灌注和缺血状态,其机理是保护血管内皮细胞,改善血管内皮细胞的分泌功能,调节ET-1、TNF-α、IL-1和NO的失衡,桃红四物汤是ASO早期、中期的有效治疗方药。
【学位授予单位】:辽宁中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R285.5

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