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《辽宁中医学院》 2004年
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纳米钙补肾中药对肾虚骨质疏松大鼠肠钙吸收作用机制的研究

任路  
【摘要】:目的:从钙代谢角度出发,研究肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜中钙结合蛋白CaBP-D_(9k)及维生素1,25(OH)_2D_3受体的mRNA和蛋白表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)中ERK1/ERK2的蛋白表达,揭示肾虚骨质疏松症的发病机制,阐明纳米钙补肾中药防治肾虚骨质疏松症有效,为提高中医基础理论学术水平提供依据。 材料与方法:实验部分采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚骨质疏松症模型,采用纳米钙组及具有益肾填精、补钙壮骨作用的纳米钙补肾中药(大、中、小)剂量对实验大鼠治疗12周(应用反证的治法),同时用骨疏康颗粒剂、雌二醇(E_2)及钙尔奇D600作为阳性对照组,正常大鼠和模型空白组为空白对照组;用双能X线骨密度仪检测离体骨密度,用生化方法对血清中(动、静脉)钙、镁、抗酒石酸性酸性磷酸酶和骨钙素等指标进行检测;用PCR法、Western印迹法检测肾虚骨质疏松症大鼠肠粘膜中CaBP-D_(9k)及维生素1,25(OH)_2D_3受体的mRNA和蛋白表达及ERK1/ERK2的蛋白表达。 结果:[1]实验动物子宫指数比较:与模型空白组比较,纳米钙补肾中药各剂量组、纳米钙组、雌二醇E_2组及骨疏康组虽有所升高,其中雌二醇E_2组有较大升高,但均无显著性差异。[2]实验动物股骨及股骨头骨密度BMD结果显示:给药12周后,各用药组(纳米钙补肾中药各剂量组、纳米钙组、骨疏康组、雌二醇E_2组及钙尔奇D组)均可明显增加股骨、股骨头的骨密度值。其中股骨的骨密度提示:纳米钙组能达到正常大鼠的骨密度值,其效果最优;纳米钙补肾中药各组能提高去卵巢实验大鼠股骨的骨密度值,其效果与钙尔奇D600和雌二醇类似,优于骨疏康组。股骨头的骨密度提示:纳米钙补肾中药(大剂量)组和纳米钙补肾中药(小剂量)组能达到正常大鼠的骨密度值:实验组与阳性对照组效果相似,但都优于骨疏康组。[3]血清骨代谢生化指标血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量检测结果显示:与模型空白组比较,纳米钙补肾中药(中剂量)组、雌二醇E_2组有显著性差异,其余各组有非常显著性差异;与正常组比较有显著性差异,各治疗组间无显著性差异。提示:大鼠去卵巢后,模空组血清TRAP含量明显高于其它各组;治疗组和阳性药物对照组均能显著降低去卵巢大鼠TRAP值,但仍未达到正常组水平。[4]血清骨代谢生化指标血清骨钙素含量检测提示:大鼠去卵巢后,模空组骨钙素含量明显低于正常组;用药后,虽然能够提高骨钙素含量值,但与模空组比较仍无显著差异。[5]血清钙含量检测结果提示:大鼠去卵巢后,模空组血清钙含量显著低于正常组;各实验组均能显著提高去卵巢实验大鼠血清的钙含量,并且达到与正常组钙值无显著差异。而且各实验组均优于实验对照药组。血清镁含量检测结果提示:大鼠去卵巢后,模空组血清镁含量低于正常组,但差异不显著;各实验组均能提高去卵巢实验大鼠血清镁的含量,数值基本都高于模空组,但只有纳米钙组和纳米钙补肾中药(大剂量)组达到与正常组无显著差异的水平。纳米钙组与雌二醇E_2组作用相似,优于钙尔奇D600组,但不及骨疏康组,骨疏康组对血清镁的作用最强。[6]对门静脉血钙含量的测定结果显示:大鼠去卵巢后,模空组门静脉钙含量低于正常组,但差异不显著;而纳米钙组、纳米钙补肾中药(大、中、小)剂量组及钙尔奇D600组门静脉血清钙与模空组比较有明显增高;且上述各组门 辽宁中医学院博士学位论文 Doetorate PaPerofLiaoningCollegeofTraditionalChineseMedieine 静脉血清钙明显达到并高于正常组;进一步与雌二醇E:及骨疏康对照组相比较,上述各 组门静脉血清钙也有明显高于正常组趋势。对门静脉血镁含量的测定结果显示:与正常 组比较,骨疏康组门静脉血清镁有明显增高;与模空组比较,纳米钙补肾中药(大剂量) 的门静脉血清镁有明显增高;与骨疏康组比较,所有各组门静脉血清镁均有明显增高。 「7j大鼠肠粘膜组织可检测到丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)中ERK,/ERKZ的蛋白表达,采用 Western blot分析其表达及显影胶片扫描的吸光度值,与正常组比较,模型空白组的表 达增强;纳米钙组、纳米钙补肾中药各剂量组用药后12周,与模型空白组比较,均可明 显下调ERK:及ERKZ蛋白表达水平。「8」RT一PCR及Western方法检测,正常大鼠肠粘膜中 含有Ca即一Dgk、维生素1,25(0H)2D3受体mRNA和蛋白表达;模型空白组大鼠肠粘膜组织中 的mRNA和蛋白表达水平有明显的下调。纳米钙、纳米钙补肾中药各剂量组、钙尔奇D600 组、骨疏康和雌二醇EZ组用药后12周,与模型空白组比较,可不同程度上调肠粘膜组织 中的mRNA和蛋白表达水平。但其中各治疗用药组的效果有所不同,一般表现为纳米钙补 l肾中药剂量组作用较好。 结论:【1〕切除大鼠双侧卵巢方法可以成功复制肾虚骨质疏松症模型。仁2」正常大鼠 肠粘膜组织可以在基因、蛋白水平表达钙结合蛋白CaBP一Dgk、维生素1,25(OH) 2D3受体,且 存在信号转导MAPK通路中的ERK途径,表明其可能在肠钙吸收中起重要作用。〔3]大鼠肾 虚骨质疏松症的发生,与肠粘膜组织中钙结合蛋白caBP一Dgk、维生素1,25(oH) 2D3受体mRNA 和蛋白表达的变化有关,从而影响肠钙的吸收。〔4〕大鼠肾虚骨质疏松症的发生与M
【学位授予单位】:辽宁中医学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:R285

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【引证文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
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10 陈红;滋肾丸抗去势雌鼠骨质疏松症的实验研究[D];成都中医药大学;2006年
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