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《辽宁中医学院》 2004年 博士论文
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魟鱼软骨多糖的研究

朱丹  
【摘要】:本文共分三个部分,第一部分探讨了(鱼工)鱼软骨多糖的分离纯化及化学结构的分析;第二部分对(鱼工)鱼软骨多糖及其注射液进行研究;第三部分对(鱼工)鱼软骨多糖的药效学进行研究。 1 (鱼工)鱼软骨多糖的分离、纯化和结构研究 通过碱提、超滤、丙酮分级沉淀、脱蛋白、Sephadex G-75凝胶柱层析,首次从(鱼工)鱼软骨中得到二个单一糖胺聚糖RCG Ⅰ和RCG Ⅱ。经~(13)C—NMR、GC、GC—MS、IR、HPLC分析表明,RCG Ⅰ和RCG Ⅱ为由β-D-1,4连接胺基半乳糖、β-D-1,4连接的葡萄糖醛-酸、β-D-1,4连接半乳糖、β-D-1,4连接的葡萄糖构成。通过含量测定可知胺基半乳糖、葡萄糖醛酸的含量均分别为32%和33%左右,为主要构成单糖,二者摩尔比为1∶1。硫酸基团取代在1,4连接胺基半乳糖、1,4连接半乳糖、1,4连接葡萄糖的6位,硫酸基团的含量为18.0%。另外该多糖中的胺基半乳糖的胺基上尚含有乙酰基团。该糖中半乳糖和葡萄糖的含量较小,RCG Ⅰ葡萄糖与半乳糖的摩尔比为1∶2.5,RCGⅡ为1∶5。RCG Ⅰ和RCGⅡ的分子量分别为9.7×10~4和1.8×10~5。以上分析说明RCG Ⅰ和RCGⅡ的主要结构基本一致,仅在与蛋白质桥连的末端糖链结构有细微差别。该糖为硫酸软骨素类多糖。 通过对RCG Ⅰ和RCGⅡ进行活性检测,均具有抑制内皮细胞增殖的作用,可以肯定为(鱼工)鱼软骨的活性成分之一。 2 (鱼工)鱼软骨多糖及其注射剂的制备工艺及质量标准 对(鱼工)鱼软骨多糖及其注射液的提取工艺、酶解工艺进行了考察,利用正交试验选取最佳提取酶解条件,最后确定采用稀碱提取法:以4%的氢氧化钠为溶剂,于室温下搅拌提取,第一次5倍量提取9小时,第二次3倍量提取9小时;提取液除酸性蛋白后,按比例加入胰酶,于50℃左右保温酶解2小时;盐解15分钟,活性白陶土、活性碳吸附:95%乙醇醇沉;无水乙醇、丙酮脱水,干燥。用该品以注射用水溶解,加入氯化钠调等渗,过滤,分装,灭菌,制成注射液。 对(鱼工)鱼软骨多糖制剂及其注射剂建立了一般检查标准及含量测定方法,通过测定葡萄糖醛酸的含量来控制(鱼工)鱼软骨多糖的含量;并对含量测定方法进行了方法学考察,精密度、重复性、稳定性、加样回收率试验表明,该法符合含量测定法的要求。 摘要 3红鱼软骨多糖的抗肿瘤及降血脂研究 药效学实验表明姐鱼软骨多糖具有明显的抗肿瘤作用,同时具有增强荷瘤小鼠的免 疫力作用。可抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管的生长。体外实验表明献鱼软骨多糖可抑制胶原 酶对胶原蛋白的水解;抑制内皮细胞的增殖。降脂实验表明肛鱼软骨多糖具有良好的降 血脂作用。


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