收藏本站
《沈阳药科大学》 2001年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

促进成骨细胞骨形成的中药及其活性成分的研究

王大为  
【摘要】: 成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,因此刺激成骨细胞骨形成的药物将具 有独特的抗骨质疏松的活性。为了筛选和开发新型、高效的防治骨质疏松的药 物,本研究首次建立了成骨样UMR106细胞体外培养为抗骨质疏松药物的活性 筛选模型。以成骨样细胞的增殖和分化为活性检测指标,成骨样细胞的增殖以 MTT法测定,氟化钠为阳性对照药。成骨样细胞的分化采用测定细胞内碱性磷 酸酶活性的方法,地塞米松为阳性对照药,同时考察了溶剂乙醇和二甲基亚砜 对细胞增殖和分化的影响。 依据传统中医“肾主骨”的理论,选择补肾中药为主要研究对象,考察它 们对成骨样细胞骨形成的活性。将中药和一些未作药用的植物的提取物与成骨 样细胞体外共同培养,在所研究的15种补肾中药中对成骨样细胞增殖有促进作 用的有9种,在所研究的15种其它中药中对成骨样细胞增殖有促进作用的有4 种,而对53种还未作药用的植物的活性测试发现只有2种有显著活性;12种 中药中有6种能促进成骨样细胞分化。其中有4种补肾中药既能促进成骨样细 胞增殖,又能促进成骨样细胞分化,它们是:补骨脂、槲寄生、淫羊藿、川牛 膝。 对补骨脂不同极性萃取物进一步进行成骨样细胞增殖和分化活性测试,发 现补骨脂乙酸乙酯萃取物为补骨脂中的主要活性部分。又选用雌性大鼠双侧去 卵巢所致的骨质疏松模型,依替膦酸二钠盐为阳性药,考察补骨脂乙酸乙酯萃 取物对骨质疏松模型大鼠的作用。结果表明,给予补骨脂乙酸乙酯萃取物的大 鼠与模型组大鼠相比,骨密度、骨钙含量显著增加。 为了追踪分离补骨脂乙酸乙酯萃取物中的活性成分,本实验采用多种色谱 分离技术,以活性测试为导向,结合波谱技术及理化数据,从补骨脂乙酸乙酯 萃取物中分离并鉴定了4个活性化合物的化学结构,它们是具有促进细胞增殖 和分化作用的补骨脂异黄酮(corylin)和补骨脂二氢黄酮(bavachin),对细胞 分化有一定促进作用的异补骨脂素(isopsoralen)和补骨脂素(psoralen)。 由于补骨脂中黄酮类化合物的分析测定未见报道,因此,本研究首次建立 了同时测定补骨脂中补骨脂异黄酮和补骨脂二氢黄酮的HI,LC分析方法。色谱 靴为:ODS柱,流动相:甲醇20 nnnoM醋酸铰缓冲液,pH4刀的733,州; 流速:0.SInljlnin;检测波长:240nln。本实验采用普通回流6小时后用乙酸乙 酪苹取三次的样品制备方法,以补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮计RSD分别为 3*%和3.6%,回收率分别为94.9%和96.2%。并对8个不同产地的补骨脂药材 中补骨脂二氢黄酮和补骨脂异黄酮进行了含量测定。 此外,本研究考察了一些黄酮类化合物对成骨样细胞的作用。结果发现: 中药淫羊蕾中的主要成分淫羊蕾昔及其大鼠体内主要代谢物淫羊霍次苦H具有 类似的作用,可显著促进成骨样细胞的增殖:中药懈寄生总黄酮对成骨样细胞 的增殖有一定的促进作用,并可显著提高细胞内ALP活性;大豆昔元及其衍生 物对U’MR106细胞的增殖作用不明显。对于中药补骨脂中分离的两个促成骨样 细胞增殖的活性成分补骨脂H氢黄酮和补骨脂异黄酮,采用 Western blotting的 方法考察不同时间对 U’MR106细胞周期蛋白 CyClin E的表达,结果它们对 CyClin E的表达没有显著影响。 本实验所建立的细胞培养方法具有快速、所需样品量少和作用直接的优点, 尤其适用于中药中微量成分的药效及活性成分的追踪研究,而且动物体内实验 结果证实了本方法的可靠性,为从天然药物中寻找和开发新型有效的防治骨质 疏松的药物提供了一种便捷的手段。大量中药及植物促进成骨样细胞骨形成活 性筛选结果表明,补肾中药的“壮骨”作用可能与其对成骨细胞活性的促进作 用有关,中药补骨脂中的黄酮成分可能具有防治骨质疏松的活性。
【学位授予单位】:沈阳药科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R284

手机知网App
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 徐哲;皂角刺抗肿瘤活性成分与含量测定方法研究[D];沈阳药科大学;2007年
2 杨雪;复方“通骨络”对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖的影响[D];吉林大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 沈霖,杜靖远,杨家玉,杨艳萍,高兰,周丕祺;青娥丸加味治疗老年性骨质疏松症52例观察[J];湖北中医杂志;1994年03期
2 刘庆思,陈仲泽,李小侬;骨康胶囊治疗绝经后骨质疏松症65例疗效观察[J];新中医;1995年10期
3 冯新送,邵敏,黄宏兴,魏合伟,朱辨弦;中药骨康对去势大鼠骨生物力学的影响[J];广州中医药大学学报;1998年03期
4 李翠玲,崔正言,李淑贞;MTT比色分析法的改良及初步应用[J];上海免疫学杂志;1996年05期
5 朱文菁,金慰芳,张丽丽,张罗修,王洪复;MTT法分析培养成骨细胞的存活和增殖能力[J];上海医科大学学报;1995年04期
6 谭生建,李光慧,邱夏;高效液相色谱法测定补骨脂和四神丸中两种有效成分[J];色谱;1993年06期
7 吕娟,林东海,李仲然,斑瑞山;补骨脂的化学成分及药理作用研究进展[J];沈阳药科大学学报;1996年03期
8 张洪,马红斌,蔡鸿生;薄层扫描法测定补肾抗衰灵胶囊中补骨脂有效成分的含量[J];时珍国药研究;1996年03期
9 张润荃,史凤芹,庞淑珍,于世风;补骨脂对分离破骨细胞作用研究[J];现代口腔医学杂志;1995年03期
10 邱峰,陈英杰,鹿野美弘,姚新生;淫羊藿苷在大鼠体内的代谢[J];药学学报;1999年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 林一峰,牛维,王斌;绝经后骨质疏松症的中西医研究概况[J];安徽中医临床杂志;2002年02期
2 郭泉;孙延标;;复方白带片中补骨脂素、异补骨脂素的含量测定[J];中医药临床杂志;2008年04期
3 陈赟;刘广霞;李佩芳;;通督调肾法治疗原发性骨质疏松症的机理探讨[J];中医药临床杂志;2008年04期
4 杨志刚;沈宗根;顾振纶;张燕萍;谢梅林;;WHE抑制地塞米松致大鼠骨质疏松研究[J];安徽农业科学;2008年29期
5 杨彩霞;陈春英;朱宇惠;;梧桐花石油醚提取物化学成分分析[J];安徽农业科学;2010年32期
6 修春英,蔡辉,郭郡浩;淫羊藿防治骨质疏松症的研究进展[J];安徽中医学院学报;2004年06期
7 乐宇民,杜建;骨关节炎Ⅰ号预防氢化可的松所致兔软骨细胞损伤作用[J];安徽中医学院学报;2005年01期
8 严灿;宋清;吴丽丽;潘毅;刘书考;;加味四逆散对皮质酮、谷氨酸致PC12细胞损伤的保护作用研究[J];安徽中医学院学报;2008年05期
9 贾经汉;陈秀芳;张志;王向鹏;;舒骨康煎剂治疗原发性骨质疏松症60例[J];安徽中医学院学报;2010年01期
10 詹红生,石印玉,赵咏芳;体外培养破骨细胞功能的定量评定[J];浙江中医学院学报;2000年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 常琪;王庚南;李妍;张蕾;游畅;郑颖;;淫羊藿素在大鼠体内的吸收与排泄[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
2 丁黎艳;郭晏华;;HPLC法同时测定补骨脂中三种成分的含量[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
3 王静;孟祥才;李幕勤;赵丽;;新型羟基磷灰石基支架材料的细胞相容性研究[A];第十二届中国体视学与图像分析学术会议论文集[C];2008年
4 王昭洪;曾涛;;补肾中药治疗骨质疏松的实验研究进展[A];四川省药学会第七次全省会员代表大会暨学术年会论文集[C];2011年
5 项欢;;中药补骨脂研究现状与前景[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
6 戴璇颖;徐世清;陈息林;裔洪根;柳学广;王玉军;;环境激素阿特拉津对昆虫培养细胞的影响[A];中国蚕学会第四届青年学术研讨会会议论文集[C];2004年
7 蔡海林;杜良伟;刘祥英;陈桂华;王彦辉;柏连阳;;高速逆流色谱法分离前胡提取物中的香豆素类功能成分[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
8 申兆菊;朱蓓蕾;蒋金书;;NO在雏鸡球虫免疫过程中的作用[A];第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集[C];2001年
9 吴培福;钟代彬;韩博;黄有德;;氟对动物破骨细胞的影响[A];2003全国家畜内科学学术研讨会论文专辑[C];2003年
10 张建峰;张皎;姚静;侯加法;;鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 周仕轶;肿节风对人前列腺癌DU-145细胞PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的影响[D];成都中医药大学;2011年
2 刘敏彦;注射用肌萎灵冻干粉质量控制与药物代谢动力学研究[D];河北医科大学;2011年
3 吴彩胜;淫羊藿有效成分分析及其体内代谢的研究[D];北京协和医学院;2011年
4 王剑;基于Runx2相关基因表达级联调控对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾虚证候病机的研究[D];辽宁中医药大学;2011年
5 姜山;猫眼草活性成分提取物的肺癌抑制作用及其机制研究[D];中国海洋大学;2011年
6 师彬;仙鹿活骨丸的研制及其治疗股骨头坏死的机制研究[D];天津大学;2009年
7 周晓莉;“双固一通”针法对绝经后骨质疏松症模型大鼠OPG/RANKL/RANK系统的调节[D];湖北中医药大学;2011年
8 陈秀霞;雌、雄激素对蛋鸡髓质骨形成和成骨细胞作用机理的研究[D];南京农业大学;2009年
9 范华芳;异羟肟酸类化合物和手性β-氨基醇的合成与性能研究[D];湖南大学;2010年
10 欧阳立群;多维校正结合HPLC-DAD应用于复杂药物体系定量分析[D];湖南大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李永忠;壮骨镇痛胶囊含药和血浆对共育体系中破骨细胞活性及凋亡的影响的实验研究[D];湖南中医药大学;2010年
2 陈文;复骨健步片对大鼠模型骨折愈合早期成骨细胞增殖和VEGF表达的影响[D];湖南中医药大学;2010年
3 曲倩雯;强肾壮骨分散片制备工艺及质量标准初步研究[D];黑龙江中医药大学;2010年
4 王均玉;中药结合髓芯减压术治疗早期股骨头坏死疗效观察[D];山东中医药大学;2010年
5 杨斌;猛洞河风景区河谷生境蕨类植物区系特征及资源利用研究[D];湖南农业大学;2010年
6 董伟;微直流电刺激对成骨细胞生物学性能影响的体外实验研究[D];泸州医学院;2011年
7 李春宝;金葡素促进兔ACL重建后腱—骨愈合的组织学研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
8 范娟娟;壮骨止痛方提取物对去势骨质疏松症雌鼠的疗效和机理研究[D];湖南中医药大学;2011年
9 翟远坤;淫羊藿苷抗骨质疏松分子机理研究[D];兰州理工大学;2011年
10 方楚权;补肾健脾活血散防治绝经后骨质疏松症的临床研究[D];广州中医药大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙桂波;纪凤兰;徐惠波;孙晓波;;何首乌的化学成分与药理作用研究进展[J];长春中医药大学学报;2007年04期
2 杨青,徐纪民,张继,杨华;皂角刺及其伪品的鉴别[J];长治医学院学报;1996年03期
3 张珉,张俊平,王杰松,钱定华;黄颜木素对HSC-T6细胞增殖和胶原合成的影响[J];第二军医大学学报;1999年05期
4 李永琦,许才绂,黄裕新,赵国宁,王庆莉;复方中药CCM-AT13抗胃癌的作用机制[J];第四军医大学学报;2001年09期
5 王洪复;;骨质疏松症的诊断[J];国际内分泌代谢杂志;2006年04期
6 莫昭展,梁海清;何首乌的现代研究进展[J];广西林业科学;2004年04期
7 周日宝,石国强;皂角刺及其伪品同属植物棘刺的理化鉴别[J];湖南中医学院学报;1999年01期
8 秦善文,郑玉玲;抗肿瘤中药实验研究进展[J];河南中医;2005年02期
9 宋维华,许超迁,孙建平,杨宝峰,何树庄;MTT法测定矿物质提取物MICOM及中药提取物AN4的体外抗肿瘤活性[J];哈尔滨医科大学学报;2001年06期
10 李万华,傅建熙,范代娣,李琴;皂角刺化学成分的研究[J];汉中师范学院学报(自然科学);1999年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前6条
1 蔡振雄;中医药治疗原发性骨质疏松症的治则研究[D];广州中医药大学;2001年
2 徐赫男;骨质疏松症的中医药研究[D];北京中医药大学;2005年
3 漆海如;原发性骨质疏松症中医辨证规律研究[D];广州中医药大学;2006年
4 蔡丽芬;何首乌质量标准的研究[D];北京中医药大学;2009年
5 高佃华;菟丝子化学成分的研究[D];吉林大学;2009年
6 曲若宁;“通骨络”化学成分的研究[D];吉林大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 韦坚义;祖国医学对骨质疏松症的认识[J];浙江中医学院学报;1992年05期
2 屠世忠;;黄酮类化合物的生物活性[J];国外医学.药学分册;1979年04期
3 沈霖,杜靖远,杨家玉,杨艳萍,高兰,周丕祺;青娥丸加味治疗老年性骨质疏松症52例观察[J];湖北中医杂志;1994年03期
4 徐任生;文广玲;江树发;王长根;蒋福祥;谢毓元;高怡生;;甘草查耳酮的分离、结构与全合成[J];化学学报;1979年04期
5 刘宏伟,杨式之,徐克慧,李洪洋,谭建三;尼尔雌醇预防大鼠卵巢切除后骨质疏松[J];华西医科大学学报;1993年01期
6 廖进民,李青南,黄莲芳,谢华,刘郴淑;泼尼松对大鼠骨骼影响的实验研究[J];解剖学杂志;1994年04期
7 郑永唐,贲昆龙;测定细胞存活和增殖的MTT方法的建立[J];免疫学杂志;1992年04期
8 刘庆思,陈仲泽,李小侬;骨康胶囊治疗绝经后骨质疏松症65例疗效观察[J];新中医;1995年10期
9 刘庆思,李小侬,徐敏,何赞厚,林伟,叶广春;密骨煎防治去卵巢大鼠骨丢失的双能X线扫描观察[J];广州中医学院学报;1994年04期
10 冯新送,邵敏,黄宏兴,魏合伟,朱辨弦;中药骨康对去势大鼠骨生物力学的影响[J];广州中医药大学学报;1998年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 潘杏兰,周少云,庄海燕;rhbFGF/rhBMP-2对成骨样细胞增殖影响的实验研究[J];临床口腔医学杂志;2005年01期
2 唐康来,杨柳,吴梅英,许建中,卢卫忠;TGF-β对胎兔颅骨成骨样细胞体外成骨作用[J];中国矫形外科杂志;2000年10期
3 谭震;脂多糖污染对成骨样细胞在钛和钛合金表面附着的影响[J];国外医学.口腔医学分册;2002年02期
4 周彬,程祥荣,曾引萍,王贻宁;牙周韧带细胞与成骨样细胞的体外共培养[J];临床口腔医学杂志;2003年11期
5 王卫华,于世凤,庞淑珍;成骨样细胞促进破骨细胞性骨吸收的研究[J];中华病理学杂志;1998年01期
6 包倪荣,赵建宁,李芳秋,周利武;小鼠颅骨成骨样细胞体外分离方法的改进[J];医学研究生学报;2003年04期
7 赵建宁,包倪荣,王与荣,吴苏稼,周利武,曾晓峰,王骏骅;地塞米松诱导原代培养的成骨样细胞凋亡的分子细胞学研究[J];医学研究生学报;2004年01期
8 包倪荣,赵建宁,王与荣,吴苏稼,周利武,曾晓峰,王骏骅;地塞米松诱导成骨细胞凋亡(英文)[J];Journal of Nanjing Medical University;2004年05期
9 李平风,谭薇琦,张建民,杜国光;Forskolin对成骨样细胞蛋白激酶C及三磷酸肌醇的影响[J];中国生物化学与分子生物学报;1996年04期
10 李小彤,张丁,傅民魁;体外培养的人牙周膜细胞成骨样细胞表型特征的研究[J];口腔正畸学;2001年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李京宝;罗明志;王亮;骞爱荣;商澎;;模拟失重对成骨样细胞纤连蛋白装配的影响[A];2011年空间生命与生命起源暨航天医学工程学术研讨会论文集[C];2011年
2 龙洁;田卫东;郑晓辉;樊瑜波;李声伟;;张力作用下成骨样细胞PGE_2的表达[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年
3 刘颖;周征;郑翼;赵志河;;机械压力对体外培养的成骨样细胞内Ca~(2+)浓度影响的研究[A];第四军医大学口腔医院2004第七届全国口腔正畸学术会议论文汇编[C];2004年
4 龙洁;田卫东;郑晓辉;樊瑜波;李声伟;;张力作用下成骨样细胞PGE_2的表达[A];中国康复医学会修复重建外科专业委员会第十四次全国学术交流会论文集[C];2004年
5 龙洁;田卫东;郑晓辉;樊瑜波;李声伟;;张力作用下成骨样细胞PGE_2的表达[A];中国康复医学会修复重建外科专业委员会第十四次全国学术交流会论文集[C];2004年
6 田卫东;龙洁;郑晓辉;樊瑜波;李声伟;;不同频率的张力对成骨样细胞NF-κBp65表达活性的影响[A];中国康复医学会修复重建外科专业委员会第十四次全国学术交流会论文集[C];2004年
7 郑翼;周征;刘颖;罗颂椒;;机械压力对成骨样细胞前列腺素E2及环磷酸腺苷影响的体外实验研究[A];第四军医大学口腔医院2004第七届全国口腔正畸学术会议论文汇编[C];2004年
8 田卫东;龙洁;郑晓辉;樊瑜波;李声伟;;不同频率的张力对成骨样细胞NF-κBp65表达活性的影响[A];中国生物医学工程学会第六次会员代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2004年
9 刘武;夏雄智;樊粤光;刘建仁;王海彬;曾毅荣;;人成骨样细胞OS-732酒精干预和六味地黄丸含药血清治疗作用的实验研究[A];2009第十七届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2009年
10 官丙刚;杨迪生;冯洁;严伟祺;;成骨样细胞与钛表面纳米仿生磷灰石涂层的界面生物效应[A];2006年浙江省骨科学术会议暨浙江省脊柱脊髓学术会议论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 史瑞新;弱激光照射对受张力的成骨样细胞的早期影响及信号转导机制的研究[D];吉林大学;2011年
2 李师君;MicroRNA-133a调控血管平滑肌细胞向成骨样细胞分化的功能研究[D];中南大学;2012年
3 熊志立;青娥方促进成骨细胞骨形成活性成分的相关研究[D];沈阳药科大学;2003年
4 王冰;模拟失重环境对大鼠骨肉瘤成骨样细胞MAPK信号转导功能的影响[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
5 孟繁浩;中药精选小复方骨疏丹促成骨细胞骨形成作用的研究[D];沈阳药科大学;2004年
6 黄晓兵;骨髓间充质干细胞诱导分化成骨细胞支持脐血造血干/祖细胞培养研究[D];四川大学;2006年
7 夏雄智;补肾法对激素干预成骨样细胞作用的差异蛋白初步分析及相关研究[D];广州中医药大学;2007年
8 崔蓉蓉;microRNA和apelin调控血管平滑肌细胞向成骨样细胞分化和凋亡[D];中南大学;2012年
9 张卫群;甲状旁腺激素与低渗透压联合调控成骨样细胞MG63生物学效应的研究[D];四川大学;2007年
10 潘明;高原鼢鼠药用价值及分子机制研究[D];四川大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李少妮;机械牵张力对成骨样细胞影响的糖蛋白组学的初步研究[D];第四军医大学;2012年
2 胡安全;福莫特罗和ICI118551对大鼠骨髓间充质干细胞来源的成骨样细胞增殖和分化的影响[D];南京医科大学;2009年
3 雷家轩;机械力学刺激及雌激素干预对成骨样细胞MG-63雌激素受体-α36表达影响[D];中南大学;2012年
4 单保华;MicroRNA-208b调控血管平滑肌细胞向成骨样细胞分化的研究[D];郑州大学;2013年
5 龙丽;氟化钠对体外培养骨细胞影响的研究[D];新疆医科大学;2003年
6 王明朗;持续静压力对成骨样细胞整合素a5和整合素β1mRNA表达的影响[D];中南大学;2007年
7 邹毅军;静态牵张力下CGRP对人成骨样细胞MMP-3及TIMP-1mRNA表达的影响[D];中南大学;2009年
8 金冬梅;联合应用IGF-I和BMP-2促MC 3T3-E1细胞及NIH 3T3细胞增殖、分化和钙化的效应[D];浙江大学;2005年
9 翟旭;大鼠牙髓干细胞与骨髓间充质干细胞分化成骨样细胞能力对比研究[D];北京协和医学院;2011年
10 王上元;载阿伦磷酸钠丙烯酸骨水泥的生物相容性研究[D];中南大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026