收藏本站
《沈阳药科大学》 2001年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

利用重组F26G实现呋甾皂苷向螺甾皂苷生物转化的研究

王亮  
【摘要】: 本文对重组F26G(Furostanol glycoside 26-O-β-glucosidase)实 现的呋甾皂苷向螺甾皂苷生物转化进行研究。用BamHⅠ和XbaⅠ两 种限制酶酶切质粒pKG27,获得了含有编码F26G cDNA的基因 片段,将其重组到表达载体pET-22b上,经酶切及PCR的筛选和 确认,证明编码F26G的cDNA成功的克隆到表达载体上,构建 了表达质粒pET-22b-F26G。 摸索了呋甾皂苷、螺甾皂苷的检测方法,并确立了TLC及 HPLC检测条件,以此为基础,确立了体外酶转化反应的条件, 成功的检测到了重组菌表达产物的F26G酶活性,证明构建的表 达质粒成功的表达出F26G酶。 对重组菌的培养基pH值、培养时诱导物的加入时间及诱导 时间等条件进行了考察,确立了高表达的菌体培养条件。 利用重组菌表达的酶对来源于不同种植物的一系列不同结构 的呋甾皂苷进行催化转化,利用TLC、HPLC及ESI-MS等方法 对酶反应检测、分析,考察重组F26G酶对底物的选择性及催化 能力。放大酶反应,对转化产物进行了制备及纯化,确认其结构, 对呋甾皂苷、螺甾皂苷间的转化机制进行了探讨。
【学位授予单位】:沈阳药科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R915

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵晶;田维毅;;肠菌群生物转化对甘草体外抑菌作用的影响[J];贵阳中医学院学报;2011年03期
2 牛红军;李建文;张栋;王芃;杨官娥;;两种光合细菌生物转化槲寄生培养液菌体中几种同工酶的变化[J];微生物学通报;2011年07期
3 梁艳;邓文娟;周良彬;严春艳;于荣敏;;转基因何首乌毛状根生物转化4-甲基-7-烯丙基氧香豆素的研究[J];中药材;2011年06期
4 孙杨;姜平;孙东阳;张怡轩;;右旋磷霉素手性转化菌株的筛选与鉴定[J];中国抗生素杂志;2011年06期
5 赵钟祥;李美芬;林朝展;熊天琴;祝晨蔯;;大鼠肠内菌对毛冬青皂苷ilexsaponin A_1的代谢转化[J];中国药科大学学报;2011年04期
6 郎景和;;以转化医学的观念促进子宫内膜异位症的研究[J];国际妇产科学杂志;2011年04期
7 王曦烨;皮子凤;刘文龙;宋凤瑞;刘志强;刘淑莹;;电喷雾质谱半定量方法研究制川乌配伍后的大鼠肠内菌生物转化[J];高等学校化学学报;2011年07期
8 赵静;;38例急性有机磷农药中毒的护理[J];吉林医学;2011年22期
9 朱妍;;酒精性肝炎患者血清中天门冬氨酸氨基转移酶线粒体同工酶检测的诊断意义[J];中国实用医药;2011年19期
10 刘昕;李书芬;牛沂菲;贾长虹;武临专;王以光;;利用珍贵橙色束丝放线菌ATCC31565氨甲酰基化4,5-双氢-7-去氨甲酰基格尔德霉素[J];中国医药生物技术;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱红云;李淼鑫;杨东辉;刘树林;蔡少青;库宝善;;人体肠道菌群转化亚麻子粕的生物转化研究[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年
2 沈学怀;马海田;;脱氢表雄酮(DHEA)在TM-3细胞中的生物转化及其对类固醇代谢相关酶表达的影响[A];中国生理学会消化内分泌生殖代谢生理专业委员会2011年消化内分泌生殖学术会议论文摘要汇编[C];2011年
3 王龙耀;李卫星;邢卫红;;生物转化过程中的膜分离技术[A];第4届全国医药行业膜分离技术应用研讨会论文集[C];2007年
4 程庆岭;;利用生物转化工程提高乳锌含量的研究[A];中国营养学会第二届营养资源学术会议论文汇编[C];1989年
5 陈奇;胡扬;薛佳;韩雪;;肠内菌对中药有效成分生物转化的研究进展[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
6 章克昌;卜华祥;;药用真菌的生物转化[A];首届药用真菌产业发展暨学术研讨会论文集[C];2005年
7 陆丛笑;岳旺;;MAO-B抑制剂催化MPTP生物转化的体外实验及吲哚醌的干预作用研究[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年
8 张莉;魏平平;袁堃;石峰;齐刚;;红景天苷的来源、提取分离与合成[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
9 尹成日;;微生物转化人参总皂苷的研究[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年
10 柯家耀;;蘑菇堆料过程的生物转化及条件控制[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 李颖 通讯员 黄树艾;生物转化生产L-丝氨酸中试成果通过鉴定[N];科技日报;2004年
2 王振岭;河北医大首次发现紫杉烷3个新骨架[N];中国医药报;2005年
3 王欣;“一剑汤”取得菌药科技新突破[N];中国食品安全报;2011年
4 生化工程国家重点实验室主任 苏志国;生物化工技术聚焦三大领域[N];中国化工报;2003年
5 杨红亚 吴少华 王兴红;推开中药现代化的另一扇窗[N];中国医药报;2005年
6 李闽春;同是“普利”作用有异[N];医药经济报;2001年
7 本报记者 栾哲;“酒王”身价18.6万元[N];吉林日报;2008年
8 玲玲;八峰药化年产300吨L-丝氨酸生产线投产[N];医药经济报;2006年
9 王菲;没事别吃“营养蛋”[N];中国质量报;2002年
10 记者 柳悦 宫璐璐;生物提取药用“黄金”[N];天津日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 康东周;人参皂苷微生物转化及其抗肿瘤活性研究[D];延边大学;2010年
2 刘琳;哈茨木霉生物转化盾叶薯蓣中的皂苷及其产物提取分离[D];大连理工大学;2010年
3 邬建国;槐角异黄酮生物转化及其产物抗乳腺癌细胞活性研究[D];华中科技大学;2011年
4 万海清;城市垃圾渗沥液—烟气脱硫体系中高浓度SO_4~(2-)的生物转化[D];四川大学;2004年
5 刘连碧;柔红霉素高产菌种选育及其生物转化的研究[D];上海医药工业研究院;2000年
6 袁玉兰;富铁酵母工程菌的构建及细胞中铁的生物转化、分布和结合状态的研究[D];四川大学;2004年
7 张爱华;赭曲霉毒素A免疫检测方法的研究与呕吐毒素生物转化菌NJA-1的鉴定[D];南京农业大学;2010年
8 常军;獐牙菜苦苷生物转化研究[D];天津大学;2008年
9 冯冰;甾体皂苷生物转化及其特异性糖苷酶的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
10 于树宏;虎杖组织培养物中白藜芦醇和虎杖苷的代谢调控、生物转化及其提取液抗肿瘤活性筛选研究[D];河北医科大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王亮;利用重组F26G实现呋甾皂苷向螺甾皂苷生物转化的研究[D];沈阳药科大学;2001年
2 钮利喜;工程菌生物转化D-型氨基酸的研究[D];山西大学;2004年
3 李瑞娟;球形红细菌生物转化槲寄生指纹图谱及化学成分的研究[D];山西医科大学;2010年
4 梁艳;两种植物培养体系对4-苯基香豆素的生物转化研究[D];暨南大学;2011年
5 牛长满;杏鲍菇栽培料的生物转化和高产料处理因子机理的研究[D];山西农业大学;2004年
6 李磊;人参皂苷生物转化及人参发酵产物活性研究[D];吉林农业大学;2011年
7 曾庆文;玉屏风散生物转化条件及药理作用的初步研究[D];黑龙江中医药大学;2005年
8 郭智;生物转化料混腐叶土栽培鸡腿菇高产技术研究[D];山西农业大学;2005年
9 王翀;啤酒酵母对重金属Cr(Ⅲ)生物转化及生物吸附的研究[D];西北大学;2005年
10 李华;海洋环己酮降解菌及环己酮降解基因的研究[D];厦门大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026