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灵芝药材及其制剂双灵固本散的质量控制和体内代谢研究

王晓明  
【摘要】: 本文以传统中药灵芝及其制剂双灵固本散为研究对象,对其进行了质量控制、体内代谢、代谢指纹图谱及谱效学研究。 从灵芝制剂—双灵固本散中分离纯化得到7种灵芝三萜酸类化合物,经过色谱法和各种光谱技术鉴定了7种灵芝酸对照品的结构,分别是:灵芝酸C_2、G、B、K、AM_1、H和灵芝烯酸B。 通过对36批次不同来源的灵芝药材和10批次双灵固本散的研究,首次建立了灵芝三萜化学成分HPLC指纹图谱,并应用LC/MS技术对指纹图谱中主要的特征峰进行了指认。指纹图谱可分为2个区,Ⅰ区为指纹图谱特征区,其中三萜成分含量较高,但种类较少;Ⅱ区为指纹区,三萜成分含量较低,但种类较为丰富。 首次建立了灵芝药材多指标成分HPLC/DAD定量分析方法,测定了36批次不同来源灵芝药材中6种主要三萜酸的含量。研究表明,不同种的灵芝药材中三萜成分的种类和含量均有明显差别。赤灵芝中三萜成分的种类和含量较为丰富,而在紫芝中几乎不含有三萜成分,这表明两者可能具有不同的药理作用,临床应用时应加以区别。本研究建立的HPLC分析方法简单、稳定、准确适用于灵芝药材的质量控制。灵芝药材多指标成分的含量测定和指纹图谱研究,将对灵芝药材及其制剂质量的全面控制起到积极作用。 首次建立了不同生物样品中4种主要三萜酸类成分的HPLC/DAD含量测定方法。以灵芝酸C_2、B、K、H为指标,对灵芝三萜酸类成分在SD大鼠体内的吸收、分布、代谢及排泄进行了系统研究。研究结果表明,大鼠口服灵芝总三萜酸后,消化道吸收迅速,组织分布广泛,体内清除较快;灵芝三萜酸成分广泛分布于各主要脏器,肝脏是其主要的代谢器官,三萜酸成分将由其它脏器重新分布到肝脏,而后经胆汁排出体外;胆汁为体内药物的主要排泄途径,肾排泄作用较弱。 首次建立了SD大鼠口服灵芝总三萜酸后的血清代谢指纹图谱,并进行了不同采血时间的血清药理学研究。以HeLa细胞增殖抑制率为指标,采用化学统计学方法,将代谢指纹图谱和药物效应相关联,形成中药化学物质与药物效应相互关联的研究方法,从而建立了一种新的中药质量评价体系。代谢指纹图谱中共有16个特征峰,其中5个特征峰与药理作用密切相关,因此控制这部分化合物在药材中的含量,将有助于确保药材的整体药效和质量。


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