收藏本站
《沈阳药科大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

厚朴酚抗氧化及诱导H460肿瘤细胞自噬的机制研究

李海波  
【摘要】:厚朴,为木兰科植物厚朴(Magnolia officinalis Rend.)或凹叶厚朴(Magnoliabiloba Rehd.)的干燥干皮、枝皮或根皮,是我国重要的传统中药,一直用于治疗咳嗽、泻泄和过敏性炎症等。厚朴酚(Magnolol)是厚朴的主要有效成分(Fig.1-1),是从厚朴中分离出的具烯丙基取代的联苯酚类化合物。近年来随着现代医学的发展,发现厚朴酚具有抗炎、抗菌、肌肉松弛、抗肿瘤和抗氧化的作用。但有关其抗肿瘤和抗氧化的作用机制缺乏探讨。本文研究了不同浓度的厚朴酚抗氧化和诱导肿瘤细胞自噬的机制。 本文采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)法测定不同浓度的厚朴酚对H460细胞生存的影响;Wright-Giemsa染色观察H460细胞的形态学改变;胞浆空泡用monodansylcadaverine(MDC)染色;DNA合成用DNA合成分析试剂盒分析;流式细胞术检测细胞周期改变;乳酸脱氢酶(LDH)活性分析测定细胞凋亡和坏死的比率;彗星实验观察DNA的损伤;免疫印迹法分析相关的蛋白表达。结果表明厚朴酚对DNA的合成具有双相调节作用,在低浓度(≤20μM)时对H460细胞的生长具有刺激作用,而在高浓度(≥40μM)时具有抑制作用。在对DNA合成的抑制作用的过程中伴随着胞浆内空泡的出现,这些空泡通过自噬标记物MDC和3-甲基腺嘌呤(3-MA)证明是发生了自噬现象。流式细胞术结果证明高浓度厚朴酚诱导H460细胞周期S期阻滞,这些结果提示高浓度厚朴酚早期通过自噬起到抗肿瘤的作用。LDH活性的分析结果表明高浓度厚朴酚是通过自噬诱导肿瘤H460细胞坏死,而不是通过诱导凋亡。此外,Akt和PTEN等也参与到增殖和自噬的过程,包括ClassⅠPI3K/PTEN/Akt途径。ClassⅢPI3K在这一过程中刺激了自噬现象的发生。因此,进一步的研究,厚朴酚可能作为一种具有新机制的潜在的抗癌药物。 同时,我们还观察了低浓度厚朴酚保护H460细胞免受叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激诱导的氧化应激损伤。20μM的厚朴酚可增加TBHP刺激后细胞的存活率。低浓度厚朴酚对细胞的保护作用明显强于N-乙酰半胱氨酸(NAC)。彗星实验检测证明厚朴酚作用后的DNA损伤明显减少。TBHP(0.15mM)作用24小时后的细胞生存能力减弱,并诱导细胞的凋亡。TBHP诱导的细胞毒性与细胞凋亡被20μM预作用的厚朴酚明显抑制或减轻。厚朴酚通过下调P53磷酸化和PTEN的表达及上调Akt的磷酸化来增强细胞的存活率。 低浓度厚朴酚具有对抗TBHP诱导的单链DNA破坏(SSB)形成、细胞毒性和脂质过氧化的作用,通过调整P53磷酸化,PTEN和Akt磷酸化而发挥抗氧化功能,这种保护作用部分是通过依赖P53的作用机制。 因此,不同浓度厚朴酚对H460细胞呈现双相作用,低浓度厚朴酚呈现刺激细胞增殖,抗氧化的作用。高浓度厚朴酚还可以诱导肿瘤细胞自噬,使肿瘤细胞发生细胞周期S期阻滞,而不是凋亡。上述研究为阐明厚朴酚作用机制,为新药研究提供先导化合物,及进一步的进行活性追踪、开发新的用途及临床应用提供理论依据。
【学位授予单位】:沈阳药科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R285.5

免费申请
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 夏明钰,王敏伟,田代真一,池岛乔;厚朴酚通过改变Bax/Bcl-X_L表达和激活caspase诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡[J];中国药理学通报;2005年03期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王海燕;王启会;王高芳;余海忠;林淦;;植物诱导Hela细胞凋亡的机制[J];安徽医药;2007年07期
2 李海波;谷建军;英锡相;关洪全;;厚朴酚通过自噬途径促进HepG-2细胞死亡[J];长春中医药大学学报;2010年05期
3 翟梅枝;晏婷;王元;贾彩霞;;胡桃属植物青皮和叶的化学成分及其生物活性研究进展[J];西北植物学报;2011年10期
4 刘琼;叶秀峰;张徽;;熊果酸抑制胶质瘤裸鼠移植瘤生长及其机制的初步探讨[J];第三军医大学学报;2009年11期
5 殷帅文;何旭梅;郎锋祥;肖宜安;;厚朴化学成分和药理作用研究概况[J];贵州农业科学;2007年06期
6 王海燕;钱伟丽;余海忠;林淦;;宫颈癌细胞中调控基因的研究进展[J];广东医学;2011年23期
7 杨鹏宇;张建生;;mTOR抑制剂治疗胶质瘤的研究进展[J];国际神经病学神经外科学杂志;2009年06期
8 张咏莉;詹苗;潘育方;范为;李红枝;黄清松;;核桃楸树皮水提物对BALb/c荷瘤小鼠免疫细胞因子影响的实验研究[J];海峡药学;2009年06期
9 徐永忠;;自拟四君头翁汤治疗溃疡性结肠炎48例临床观察[J];中医药导报;2009年03期
10 刘丽;彭枫;;和厚朴酚的抗肿瘤作用研究进展[J];华西医学;2006年03期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
1 吴晓骏;吴威;赵余庆;;山核桃化学成分和生物活性研究进展[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
2 ;Micronization of Magnolia bark extract with enhanced dissolution behavior by RESS[A];2010年广东省药师周大会论文集[C];2011年
3 ;A new benzofuran constituent from the husk of Carya cathayensis Sarg.[A];第三届中国森林保护学术大会论文摘要集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曾建国;基于代谢框架和鲜药材的炮制“幼朴”与厚朴的等效性研究[D];湖南中医药大学;2010年
2 韩荣;高脂血症中医“血脉微型癥瘕”论及其软坚散结法方药的研究[D];新疆医科大学;2011年
3 董瑞华;百里酚及异百里酚的体外代谢研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
4 黄冰冰;厚朴活性成分的提取及抗龋机制研究[D];武汉大学;2005年
5 陈晓宇;野菊花总黄酮对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及机制探讨[D];安徽医科大学;2007年
6 杨红兵;湖北恩施产厚朴的品质研究[D];湖北中医学院;2007年
7 冯瑾;天然药物厚朴防龋作用的药效学研究[D];四川大学;2007年
8 刘屹;和厚朴酚脂质体治疗卵巢癌的实验研究[D];四川大学;2007年
9 袁铸;小鼠PNAS-4基因的克隆、特征及其对顺铂与和厚朴酚抗肿瘤效果的增强作用[D];四川大学;2007年
10 邓俊芳;和厚朴酚抗胰腺癌作用及其机制的实验研究[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李慧;厚朴中有效成分活性检测及结构鉴定[D];辽宁师范大学;2010年
2 王麟;温厚朴的现代炮制加工及UPLC-DAD-TOF-MS指纹图谱研究[D];河南中医学院;2010年
3 陈凌燕;和厚朴酚通过诱导凋亡增强奥沙利铂对人PC-9细胞的抗肿瘤作用[D];浙江大学;2010年
4 金晶;中药和厚朴酚抗真菌活性及其作用机制的初步研究[D];吉林大学;2011年
5 吕廷洪;倍半萜化合物chabranol对4种肿瘤细胞凋亡和自噬的研究[D];兰州大学;2011年
6 杨犇;核桃花絮成分及花絮与核桃叶挥发性成分的对比研究[D];兰州大学;2011年
7 李瑞峰;大黄素型蒽醌化合物结构修饰及其放射增敏活性的研究[D];北京协和医学院;2011年
8 李伟;熊果酸对血管内皮细胞增殖的影响及其机制[D];重庆医科大学;2011年
9 马沛;白藜芦醇、和厚朴酚、黄芩苷对羊肝原代细胞Angptl6 mRNA表达影响[D];湖南农业大学;2011年
10 高万举;洛铂对SGC-7901细胞凋亡及Akt,PTEN,ERK mRNA表达的影响[D];郑州大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 张春玲,吴立军,田代真一,小野寺敏,池岛乔;冬凌草甲素通过激活caspase诱导HeLa细胞凋亡[J];中国药理学通报;2003年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴经耀;陈素红;吕圭源;;厚朴归脾、胃、肺经及相关药理作用研究进展[J];亚太传统医药;2011年02期
2 刘可云;董志;朱毅;;厚朴酚与和厚朴酚的药理学研究现状[J];中成药;2006年05期
3 宁华;王振宇;李颖;张玉领;孙长颢;;厚朴酚超声提取条件优选[J];中国公共卫生;2009年07期
4 赵春颖;毛晓霞;张梓倩;;大孔吸附树脂分离纯化厚朴酚的方法研究[J];承德医学院学报;2009年04期
5 董秀;韩兆峰;王晓波;王淳;蔡硕;;厚朴酚对人小细胞肺癌H446细胞增殖的影响[J];中国民族民间医药;2011年05期
6 董秀;韩兆峰;王晓波;蔡硕;;厚朴酚对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响[J];中国医药指南;2011年08期
7 冯雅琪,吴国江,郝庆红,陈冠华;厚朴酚抗脂质过氧化作用研究[J];河北大学学报(自然科学版);2005年01期
8 李宗,周继斌,陈在敏,徐淑贞,陈鼎雄;厚朴花的质量研究[J];中国药学杂志;1997年12期
9 江汉美,孙代华,芦金清,黄芳,曹杨;聚酰胺色谱法鉴别不同产地的厚朴药材[J];中国医院药学杂志;2004年04期
10 梅林;宋世远;化岩;查忠勇;胡承波;;HPLC法测定藿香正气颗粒中的厚朴酚[J];激光杂志;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王卓;蔡和平;黄瑾;;从我院抗肿瘤药品不良反应报告分析谈临床药师对肿瘤患者用药监护的要点和重要性[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
2 李雪梅;潘达鑫;;抗癌新药槐定碱的基础研究[A];第四届中国肿瘤大会中国药理学会肿瘤药理专业委员会分会场学术会议论文摘要[C];2006年
3 李雪梅;潘达鑫;;抗癌新药槐定碱的基础研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
4 任海祥;李志裕;周晓东;陆晓和;;长春碱类抗肿瘤药研究进展[A];2004年中华医院管理学会学术年会论文集[C];2004年
5 黄贤华;黄常亮;宋微微;方伟;杨芳炬;;迎春花对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用[A];第十届全国中药药理学术会议论文集[C];2007年
6 张俊刚;徐颖;陈淑芬;杨卫超;姜红;郭金铭;;葡萄籽提取物复合物对溴代苯油造模小鼠抗氧化作用的研究[A];第四届第二次中国毒理学会食品毒理学专业委员会与营养食品所毒理室联合召开学术会议论文集[C];2008年
7 范超君;毕和平;陈湛娟;陈光英;鲍长余;;番木瓜提取物对猪油抗氧化作用的研究[A];海南省药学会二○一○年学术年会会议论文集[C];2010年
8 郭长江;韦京豫;杨继军;葛玉章;;坚果类食物抗氧化作用的研究[A];中国营养学会第五次营养资源与保健食品学术会议论文摘要汇编[C];1999年
9 谢鸣;袁学勤;张家俊;陈文为;张伟;王雪;;地黄饮子抗氧化作用的实验研究[A];全国中药研究与开发学术研讨会论文摘要集[C];2001年
10 李文钧;彭小英;马张英;郑永兴;;口服抗肿瘤药赛特铂在大鼠的药动学[A];浙江省医学科学院建院55周年院庆论文专辑[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郭艾琳;安柯瑞上市三维生物掘金抗肿瘤药[N];第一财经日报;2006年
2 李天晴;抗肿瘤药:市场逐步扩大 竞争日趋激烈[N];中国医药报;2003年
3 李宗品;跨国药企叼上抗肿瘤药这块肥肉[N];市场报;2006年
4 记者 夏冰冰 通讯员 张迪;廉价抗癌药环磷酰胺遭遇停产[N];医药导报;2006年
5 本报实习记者  林喆;新一轮降价牵动药企神经[N];中国证券报;2006年
6 记者 向永志;部分抗肿瘤药重庆市场难买[N];医药导报;2006年
7 本报特约撰稿人 干荣富 曹师越;销售曲线平稳上移[N];医药经济报;2006年
8 记者 徐瑞哲;上海抗肿瘤药专利创收四亿元[N];解放日报;2010年
9 记者 王彩华;抗肿瘤药品降价 最高降幅57%[N];广元日报;2006年
10 吴德岭 贺耀堂;四种抗肿瘤药即日起限价[N];连云港日报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李海波;厚朴酚抗氧化及诱导H460肿瘤细胞自噬的机制研究[D];沈阳药科大学;2007年
2 向华;厚朴酚抗金黄色葡萄球菌作用机制的研究[D];吉林大学;2010年
3 韦晓洁;人参皂甙Rg3不同构型免疫佐剂作用和抗氧化作用及其机理的研究[D];广西大学;2012年
4 梁欣;新型Naphthalimide类衍生物B1抗肿瘤药理学作用及分子机理研究[D];华东理工大学;2012年
5 黄冰冰;厚朴活性成分的提取及抗龋机制研究[D];武汉大学;2005年
6 刘迪;杜仲叶抗疲劳功效分子机制与抗氧化作用关联性研究[D];陕西科技大学;2011年
7 王东兴;抗肿瘤药雷替曲塞的脑靶向给药系统研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
8 张晓丽;雨生红球藻抗氧化作用及藻粉质量安全性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2006年
9 尹俐;含硒谷胱甘肽硫转移酶的真核表达及抗氧化作用研究[D];吉林大学;2012年
10 赵超;两类新木脂素类天然产物和1,2,4-噁二唑类衍生物抗氧化活性的研究[D];吉林大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋湘莲;穴位注射香丹液对大鼠高脂血症的治疗作用[D];南华大学;2006年
2 葛蕾;苹果渣多酚浸提物及其抗氧化性研究[D];西北农林科技大学;2005年
3 厉阗;蜂花粉抗氧化性研究[D];西北大学;2005年
4 崔文新;天然植物色素抗氧化作用的比较研究[D];山东师范大学;2006年
5 李建昌;山茱萸总皂苷提取纯化及其体外抗氧化性研究[D];陕西师范大学;2006年
6 王永萍;雷公藤多甙片的抗氧化作用对类风湿性关节炎影响的实验研究[D];成都中医药大学;2006年
7 李莉蓉;3种黑色粮油作物种皮花色苷的抗氧化作用及其理化特性比较[D];西北农林科技大学;2006年
8 李牧;五味子提取物对断奶仔猪生产性能与抗氧化机能的影响[D];东北农业大学;2007年
9 赵晋;生姜姜辣素的提取及其功能性质研究[D];西南大学;2008年
10 马颖芳;益智胶囊的药效学实验研究[D];辽宁中医药大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026