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《辽宁师范大学》 2011年
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木犀草素对金黄色葡萄球菌的抑菌活性及其作用机制

王倩  
【摘要】:木犀草素(Luteolin)是一种典型的天然黄酮类化合物,广泛存在于中草药和蔬菜果实中,因其毒副作用低,不易产生耐药性,且具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌消炎等多种生物活性而受到国内外学者的广泛关注。为使木犀草素在医药和食品防腐中有更好的开发和应用,对其抑菌活性及作用机制的研究就具有十分重要的意义。本文以金黄色葡萄球菌为供试菌株,对从天然中草药中提取的木犀草素等六种黄酮类化合物的抑菌活性及耐药性进行了测定,并对木犀草素的抑菌机制进行了系统研究。研究结果如下: 1.利用牛津杯法和2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法对木犀草素的抑菌活性进行了研究,实验结果显示木犀草素对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性,最低抑菌浓度为0.09 mg/mL。 2.利用耐药菌株筛选实验对木犀草素的耐药性进行了测定,结果显示木犀草素不易产生耐药性,且耐药菌株突变位点与喹诺酮药物不同。 3.通过测定培养液电导率及大分子物质含量的变化情况对木犀草素作用菌体后细胞膜的破坏程度进行了研究,结果显示木犀草素可改变金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性,但不会破坏细胞膜的完整性。 4.采用SDS-PAGE蛋白谱带分析和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染色法对木犀草素作用菌体前后可溶性蛋白和核酸含量的变化进行了测定,结果显示药物作用16 h后,金黄色葡萄球菌可溶性蛋白含量减少了64.54%,DNA含量减少了48.44%,RNA含量减少了39.35%,说明木犀草素可明显抑制菌体可溶性蛋白及核酸的合成。 5.通过对超螺旋DNA解旋情况的分析来研究木犀草素对DNA拓扑异构酶活性的影响,结果显示木犀草素对金黄色葡萄球菌拓扑异构酶Ⅰ(TOPOⅠ)和拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)具有明显的抑制作用。其中木犀草素对TOPOⅠ的作用机制研究表明,木犀草素不会阻碍DNA与TOPOⅠ的结合,但会稳定DNA-TOPOⅠ断裂复合物以阻止DNA断链的再连接,说明木犀草素是一种TOPOⅠ毒剂。 6.采用紫外可见分光光谱法和琼脂糖凝胶电泳对木犀草素与DNA的作用方式进行了研究,结果表明,木犀草素的吸收峰会因DNA的加入发生红移,峰值出现减色效应,且木犀草素能使超螺旋DNA解旋并产生部分断裂,说明木犀草素是通过嵌入DNA来发挥作用的。
【学位授予单位】:辽宁师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:Q93

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【引证文献】
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