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《辽宁师范大学》 2011年
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C-myc单克隆抗体的制备及鉴定

孙慧慧  
【摘要】:原癌基因c-myc是myc家族的重要成员之一,是髓细胞性白血病病毒的癌基因v-myc的细胞同类物,定位于染色体8q24.12-8q24.13,其编码产物c-myc蛋白的分子量为62kDa。c-myc基因的功能甚多,它既是一种可易位基因,又是一种受多种物质调节、可使细胞无限增殖、获永生化功能、促进细胞分裂的可调节基因,在很多肿瘤中都高表达。在正常细胞中的c-myc原癌基因一旦被激活,转为癌基因,活化转录和翻译,c-myc mRNA和c-myc蛋白的表达便异常增高,使细胞脱离正常生长的调节限制而具有高度增生潜能,向恶性表型转化,抑制细胞分化,促进细胞恶变,最后导致肿瘤的发生。鉴于c-myc的过表达与肿瘤发生呈高度正相关,c-myc抗血清可以应用于肿瘤的诊断,本研究通过制备c-myc单克隆抗体,为肿瘤诊断试剂盒的研发提供基础实验数据。用原核表达及纯化的c-myc蛋白抗原免疫3只健康雌性BALB/c小鼠,3次免疫后取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞以10:1比例进行细胞融合,再经HAT选择培养基筛选、间接ELISA方法检测、有限稀释法克隆,最终获得2株能够稳定分泌抗c-myc特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并分别命名为SHH-1H11和SHH-2A9。抗体亚型鉴定表明,SHH-1H11、SHH-2A9分别为IgG1亚类和IgM。经BCA Protein Assay Reagent Kit检测显示,杂交瘤细胞SHH-1H11上清和腹水的抗体浓度分别为0.47mg/ml和2.51mg/ml,SHH-2A9的上清和腹水的抗体浓度分别是0.49mg/ml和2.45mg/ml。ELISA检测结果显示,这两株杂交瘤细胞培养上清效价分别为1:10240、1:5120;小鼠腹水效价分别为1:64000、1:32000,c-myc单克隆抗体只与c-myc蛋白反应,与其他蛋白没有交叉反应,这表明获得的单克隆抗体具有较高的特异性和敏感性。本研究为肿瘤诊断试剂盒的研发提供了良好的技术基础。
【学位授予单位】:辽宁师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R392

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 汪永和;魏祥志;何明坤;;杂交瘤细胞克隆化培养及其分泌的单克隆抗体的纯化[J];安徽卫生职业技术学院学报;2008年05期
2 崔彬彬;朱维红;冯大领;;细胞融合技术研究进展[J];保定师范专科学校学报;2007年02期
3 刘尔翔;细胞融合——淋巴细胞杂交瘤[J];北京医学;1980年04期
4 李娟,王沁,严祥;食管癌组织hTERT和c-Myc的表达[J];第四军医大学学报;2003年18期
5 南楠;张维元;;c-myc、P21~(WAF1)和LMP-1在鼻咽癌中表达的意义及其与Ki67的关系[J];贵阳医学院学报;2006年01期
6 杨静,葛曰萍;细胞杂交的电融合法与PEG融合法的比较研究[J];广州医学院学报;1995年04期
7 郭学民,徐兴友,王同坤,王华芳,尹伟伦;植物细胞融合的研究进展(综述)[J];河北科技师范学院学报;2005年01期
8 霍乃蕊;韩克光;;细胞融合技术的发展及应用[J];激光生物学报;2006年02期
9 许宁,郑学清,石爱平,赵忠文;肾癌细胞c-myc的表达分布及其临床意义[J];临床泌尿外科杂志;1999年09期
10 方志文;牟召霞;王新艳;翟玉栋;;p53与c-myc和cyclin B_1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义[J];中华肿瘤防治杂志;2007年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李卉;王洪江;陈艳;庞作良;张丽萍;李惠武;;c-myc与PCNA在哈萨克族食管癌组织中的表达及其临床相关性研究[J];癌变·畸变·突变;2010年06期
2 孙慧慧;朴敬爱;李文哲;朴君;;原核表达c-myc蛋白的多克隆抗体制备[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年01期
3 魏东;张乃生;;诺氟沙星多克隆抗体的制备[J];安徽农业科学;2007年04期
4 詹爱军;王新卫;王宪文;;抗H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的制备及亚型鉴定[J];安徽农业科学;2008年03期
5 魏东;徐彤;赵月平;黄智鸿;李秀娟;;抗阿莫西林多克隆抗体的制备[J];安徽农业科学;2008年09期
6 胡晓苗;余为一;张丹俊;;犬血清IgG的纯化、抗体制备及其鉴定[J];安徽农业科学;2008年21期
7 钱鑫萍;杨雪飞;吕顺;周导南;范远景;;细胞骨架的显微镜观察实验方法改进研究[J];安徽农业科学;2008年22期
8 苏建青;褚秀玲;李俊霞;付本懂;申海青;韦旭斌;;中性红染色法检测人参皂苷及其衍生物对CEF增殖的影响[J];安徽农业科学;2009年35期
9 朱俊友;袁超;;SEB单克隆抗体的制备[J];安徽农业科学;2011年27期
10 周先韦;李伟莉;汪丹;万春艳;王金芳;吴海燕;;补肾安胎冲剂联合免疫疗法治疗反复自然流产40例[J];安徽中医学院学报;2011年01期
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1 许道艳;刘仁沿;李伟;梁玉波;;酶联免疫吸附法分析失去记忆性贝毒ASP[A];有毒化学污染物监测与风险管理技术交流研讨会论文集[C];2008年
2 邱妍;董发明;杨自军;刘凤军;胡元亮;崔保安;;四种多糖对鸡脾脏淋巴细胞的增殖和一氧化氮分泌的影响[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
3 曾立波;陈连康;胡小龙;张玉荣;张润生;曹芳琦;骆华;;胶体金法吗啡-甲基苯丙胺二合一免疫层析试剂盒的研制[A];公共安全中的化学问题研究进展(第二卷)[C];2011年
4 才琳;张甄;钱丽丽;张园园;裴世春;;黄曲霉毒素B1检测ELISA条件的优化[A];2009年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会论文集[C];2009年
5 齐岩;柯艳坤;张贺楠;亓文宝;袁润余;赵丽荣;陈晓春;李小康;廖明;;禽流感病毒H5亚型HA抗原位点的表达及抗原性检测[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
6 刘晔;张守峰;张菲;王颖;扈荣良;;动物狂犬病中和抗体竞争ELISA检测试剂盒的研制[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会论文集[C];2008年
7 彭伏虎;王政;毕丁仁;;H9亚型禽流感病毒胶体金免疫层析快速检测试纸条的研制及初步应用研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
8 高丽;杜莹;张忠湛;杨松涛;夏咸柱;高玉伟;;犬细小病毒荧光抗体的制备及其鉴定[A];第十三次全国养犬学术研讨会论文集[C];2009年
9 李青;许小琴;王志刚;王彬;;板蓝根多糖对小鹅瘟病毒体外抑制作用的研究[A];纪念中国畜牧兽医学会中兽医学分会成立30周年中国畜牧兽医学会中兽医学分会2009年学术年会、华东区第十九次中兽医科研协作与学术研讨会论文集[C];2009年
10 张海燕;马卫明;杨宏军;王长法;何洪彬;曹永芝;;奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌基因工程蛋白α-溶血素的纯化及其活性检测[A];中国畜牧兽医学会小动物医学分会第四次学术研讨会、中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术研讨会论文集(2)[C];2009年
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1 田壮;食品中甾体激素残留免疫分析技术与方法研究[D];江南大学;2010年
2 陈克研;猪血凝性脑脊髓炎免疫层析检测试纸及其灭活疫苗的研制[D];吉林大学;2011年
3 吴君;基于β_3-AR探讨缩泉丸补肾缩尿的作用机制[D];广州中医药大学;2011年
4 成毅明;精子发生相关蛋白LM23的研究[D];北京协和医学院;2009年
5 朱杰昌;阻断CD40/CD40L共刺激通路联合FTY720在小鼠心脏移植中的抗排斥反应作用研究[D];天津医科大学;2009年
6 郭昊;白介素35基因治疗协同地西他滨抑制小鼠心脏移植排斥反应的研究[D];天津医科大学;2011年
7 陈杨;PPV和PCV2核酸疫苗及PRV-PPV-PCV2基因工程疫苗的研究[D];四川农业大学;2011年
8 张博;H1N1亚型猪流感病毒分离鉴定、鉴别诊断及M2e重组质粒免疫效力研究[D];四川农业大学;2011年
9 何健;自然霉变玉米对肉鸭生产性能和免疫功能的影响及机制研究[D];四川农业大学;2011年
10 胡崇伟;去甲肾上腺素与铝免疫毒性的关系[D];东北农业大学;2011年
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1 张利芳;苦瓜多糖的纯化及其免疫和抗氧化活性作用[D];华中农业大学;2010年
2 徐娟;T-2毒素多克隆抗体的制备及其化学发光免疫检测的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3 汪晶;二倍体马铃薯原生质体融合创制抗青枯病的新种质[D];华中农业大学;2009年
4 谭雯雯;猪β-防御素2多克隆和单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
5 喻翠翠;猪结合珠蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[D];华中农业大学;2010年
6 崔翔;动物可食组织中安眠酮残留的ELISA检测方法研究[D];华中农业大学;2010年
7 贾丽锋;A型流感病毒NP蛋白的原核表达及初步应用[D];郑州大学;2010年
8 祁艳华;猪圆环病毒2型ELISA抗体检测方法的建立及PCV2单克隆抗体的制备[D];郑州大学;2010年
9 徐谦;拟南芥原生质体诱导愈伤组织的研究[D];山东农业大学;2010年
10 赵秀新;牛消化道Ⅰ型肽载体(bPepTⅠ)部分序列的克隆、表达及多克隆抗体的制备[D];山东农业大学;2010年
【二级参考文献】
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1 李小华,陈德基,江曼,张玉霞,叶波,杨飞,刁路明,唐志佼,夏东,刘铭球;实验性肺癌癌变过程中p53、mdm2、K-ras及PCNA蛋白的表达[J];癌症;2001年09期
2 李红钢,喻伦银,刘铭球,陈洪雷,张玉霞,刘绚,唐志佼,夏东,邹祖玉;大鼠实验性肺鳞癌癌变各阶段环氧化酶-2表达及微血管密度的动态研究[J];癌症;2002年06期
3 杨静,邓锡云,邓琳,丁琳,顾焕华,易薇,曹亚;EBV LMP1通过诱导c-myc表达活化端粒酶hTERT[J];病毒学报;2003年03期
4 高晓虹,李光三,杜淼,冯燕玲,曹明丹,陆德裕,李素文;电脉冲介导金鱼囊胚细胞融合及其发育能力的研究[J];动物学报;1990年02期
5 霍乃蕊,孟利梅;细胞融合技术的应用研究进展[J];动物医学进展;2005年03期
6 杨飞,喻伦银,刘铭球,陈德基,夏东,邹祖玉,江曼,胡雪峰,凌长明;鳞癌相关抗原、癌胚抗原及糖链抗原15-3在诱发性肺鳞癌癌变过程中的研究[J];中国肺癌杂志;2001年01期
7 林顺权,陈振光;山梨醇对枇杷原生质体分离和培养的效应[J];福建农业大学学报;1997年04期
8 邓占鳌,邓秀新,章文才,万蜀渊;柑桔抗盐突变体的原生质体培养与分离纯化研究[J];果树科学;1989年03期
9 曾嵘,李进;c-myc的结构和功能[J];国外医学.遗传学分册;1997年03期
10 郭学民,徐兴友,王同坤,王华芳,尹伟伦;植物细胞融合的研究进展(综述)[J];河北科技师范学院学报;2005年01期
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1 于辉;唐旭;吕葆真;金晓航;黄威权;;抗解脲脲原体单克隆抗体的制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2006年02期
2 裴秀英;文润玲;戴寿芝;;酶联免疫离心法筛选B细胞杂交瘤[J];宁夏医学杂志;1992年05期
3 潘晓蔚;苏艳阳;曾艳;;应用抗真菌药物处理染菌杂交瘤细胞对抗体产生的影响[J];沈阳医学院学报;2007年01期
4 王燕琴;李克生;杜蕙芬;胡永浩;;抗大肠杆菌O157单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的观测[J];甘肃农业大学学报;2008年03期
5 马可为,袁育康,范桂香,吕卓人,王军阳,李建国,任会勋;抗哇巴因单克隆抗体的制备及初步鉴定[J];西北药学杂志;2005年05期
6 陈红杰,刘德文,张悦红,沃兴德,赵革平,何─中;─株特异抗人血浆Lp(a)单克隆抗体(A5g3)的制备及特征分析[J];中国免疫学杂志;1996年05期
7 谭胜,张其刚,张林,刘楠,谢成耀;β-catenin和c-myc在侵袭性胸腺瘤中的表达及临床意义[J];中国医科大学学报;2005年05期
8 颜苹苹;李文展;张子伯;林文光;叶庆林;;肿瘤坏死因子单克隆抗体(TNF—McAb)的制备获得成功[J];福建医科大学学报;1989年03期
9 王国钦;金伟;漆满英;裴兆辉;陈勤;戴刚;马虹;;稳心颗粒对大鼠心肌肥厚的影响及作用机制研究[J];中西医结合心脑血管病杂志;2011年04期
10 陈火胜;;单克隆抗体技术[J];宁夏医学杂志;1985年04期
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1 于翠;施曼铃;王桂珍;吴建祥;周雪平;;几种重要植物病毒单克隆抗体的制备和快速检测方法的建立[A];第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会论文集[C];2003年
2 郑骏年;武艺;吴阳;李望;刘俊杰;温儒民;朱海涛;孙晓青;;抗人肾癌G250单克隆抗体的制备及其功能鉴定[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
3 侯淑萍;刘原君;姚卫峰;胡春燕;齐蔓莉;王惠平;刘全忠;;抗衣原体噬菌体衣壳蛋白VP1单克隆抗体的制备和应用研究[A];中华医学会第十五次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2009年
4 刘健宏;王标;庄向生;王长兵;周伦江;刘玉涛;;单克隆抗体与免疫荧光染色技术[A];福建省科协首届学术年会卫星会议——畜牧业持续发展对策学术研讨会论文集[C];2001年
5 魏莹;盖新娜;贾红;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
6 黄红亮;陈焕春;陈美玲;贝为成;严琳;;胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3’-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年
7 肖海燕;朱平;蒋小滔;富宁;;人HbA_2单抗制备及ELISA检测体系的建立[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
8 黄红亮;陈焕春;陈美玲;贝为成;严琳;;胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3'-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)[C];2004年
9 赵巧香;马忠辉;尹位;李士泽;;冷诱导RNA结合蛋白CIRP单克隆抗体的制备与鉴定[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
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1 贾超时李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年
2 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年
3 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年
4 本报特约撰稿人 李朝;单抗:生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年
5 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年
6 记者 杨俊坚;单抗药物:站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年
7 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年
8 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年
9 张骁束;梅英;单克隆抗体的研究进展[N];中国医药报;2003年
10 邹平;单克隆抗体研究取得突破[N];医药经济报;2001年
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1 秦迎松;人促血液血管细胞生成素(Haemangiopoietin, HAPO)单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年
2 郭莉;一个新的白细胞膜抗原ZCH-2B8a编码基因及其生物学特性的研究[D];浙江大学;2006年
3 白艳艳;幽门螺杆菌感染在特发性血小板减少性紫癜发病中的意义[D];苏州大学;2006年
4 谢光洪;黄曲霉毒素B1免疫层析试纸条快速检测方法的研制[D];吉林大学;2008年
5 李宝全;H9亚型禽流感病毒抗独特型抗体的研制与其免疫原性的初步分析[D];山东农业大学;2005年
6 潘雪娜;抗人膀胱癌单抗BDI-1的制备、鉴定及~(99m)Tc-标记的放射免疫显像实验研究[D];吉林大学;2007年
7 李英;大鼠抗肝癌单域抗体与力达霉素强化融合蛋白的构建及其抗肿瘤活性研究[D];中国协和医科大学;2005年
8 王殿冰;单克隆抗体检测炭疽芽孢[D];华中农业大学;2008年
9 覃雅丽;猪伪狂犬病鉴别诊断方法的研究及单克隆抗体的制备[D];华中农业大学;2002年
10 王永刚;抗人肝肠钙黏附蛋白(CDH17)单克隆抗体治疗肝癌的实验研究[D];复旦大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙慧慧;C-myc单克隆抗体的制备及鉴定[D];辽宁师范大学;2011年
2 邓志华;苦参素对人肝癌细胞株Bel-7404细胞增殖和E2F1、c-myc表达的影响[D];广西医科大学;2011年
3 辛小川;75例儿童淋巴瘤临床病理分析及EB病毒感染、c-myc基因改变的相关性研究[D];中国医科大学;2010年
4 蔡贵阳;膀胱尿路上皮癌中C-myc, FBP1及FIR的表达及临床意义[D];中国医科大学;2010年
5 严晓梅;MiRNAlet7、Ras、HMGA2、C-myc在非小细胞肺癌中的表达及临床病理学意义[D];苏州大学;2010年
6 杜海爽;Notch1、c-myc及p21在乳腺癌中的表达及冬凌草甲素对乳腺癌Bcap-37细胞的作用研究[D];苏州大学;2010年
7 刘赫;FBP1和C-MYC在肾透明细胞癌中的表达及意义[D];中国医科大学;2010年
8 甘伟;MiR143和C-Myc在直肠腺癌中的表达及意义[D];中南大学;2010年
9 张巧琳;HepaCAM通过调节c-Myc抑制肾癌增殖[D];重庆医科大学;2011年
10 黄子逸;LIGHT基因转染细胞株和单克隆抗体的研制及其对T细胞的共刺激效应[D];苏州大学;2010年
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