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《辽宁师范大学》 2011年
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刺松藻多糖生物活性的初步研究

汪艳秋  
【摘要】:本文采用热水浸提-乙醇沉淀法提取刺松藻多糖,并对刺松藻多糖抑制肿瘤细胞生长、诱导凋亡、抑制肿瘤细胞迁移的生物活性进行研究,并对其抗凝血作用进行初步探讨。采用MTT比色法检测刺松藻多糖对人肺腺癌A549细胞增殖的影响; Hoechst33258染色,观察被刺松藻多糖处理后的A549细胞是否发生凋亡的形态学改变。采用免疫细胞化学、Western Blot法检测刺松藻多糖对A549细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平。利用Boyden chamber模型实验观察刺松藻多糖作用A549细胞以后,细胞的迁移能力发生的变化。 通过心脏抽取新西兰白兔血液制得血浆,分别与生理盐水、浓度为125、250、500、1000μg/mL刺松藻多糖溶液等体积混合,利用血液凝聚仪测定兔血的活化部分凝血酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT),检测刺松藻多糖对抗凝血作用的影响。采用颈动脉插管法抽取新西兰白兔血,制备富血小板血浆(PRP)、贫血小板血浆(PPP),分别与生理盐水、浓度为250、500、1000μg/mL刺松藻多糖溶液混合, ADP为诱导剂,检测最大聚集率。 实验结果显示刺松藻多糖对肺腺癌系A549细胞的增殖有明显的抑制作用,且与多糖浓度及其作用时间有密切的依赖关系,而且经刺松藻多糖处理过的A549细胞发生明显的形态学改变,细胞中Bcl-2蛋白水平下降,表明刺松藻多糖具有诱导A549细胞凋亡的作用; Boyden chamber模型结果显示刺松藻多糖能显著抑制A549细胞的迁移能力。刺松藻多糖在体外能明显延长家兔APTT、PT、TT,差异有显著性;能抑制血小板聚集率,随多糖浓度增加,血小板聚集率呈明显下降趋势。 本实验证明了刺松藻多糖能够抑制肿瘤细胞的增殖及迁移能力,诱导细胞凋亡,具有抗凝血、抗血栓等作用,为进一步研究刺松藻多糖的生物活性具有一定的意义。
【学位授予单位】:辽宁师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:Q946

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【参考文献】
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