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卵清蛋白基复合载体的构建及其负载山奈酚/单宁酸的研究

史航  
【摘要】:天然活性成分不仅可以清除体内自由基,还能维持机体健康、体力活动和生长发育,然而存在生物利用度低、快速代谢、溶解性差和快速全身消除等问题。通过自组装方式构建的天然高分子材料用于传递运载体具有如环境友好型,可修饰性,保护性强,小尺寸、易渗透等多种潜在和可行的优势与价值。赋予运载体高效靶向性控制释放更是当前多酚药物递送系统的研究热点。本文以卵清蛋白(OVA)为基本材料,通过自组装制备卵清蛋白纳米粒子,进而引入海藻酸钠(SA)制备卵清蛋白-海藻酸钠复合运载体,并对疏水性药物山奈酚(KAE)和亲水性药物单宁酸(TA)进行保护与包封。然后,利用单宁酸与金属离子络合作用形成三维网状包被薄膜的特性,为已成功制备纳米粒子表层赋予一层具有pH响应性释放药物的TA-Fe3+包被膜以达到山奈酚/单宁酸的靶向释放。本文主要结论如下:1.山奈酚/单宁酸被很好的包封于卵清蛋白纳米粒子中。卵清蛋白与亲水性单宁酸结合较好,蛋白质结构稳定性最高,且蛋白质保持了稳定的三维结构;山奈酚的负载提高了复合粒子卵清蛋白负载单宁酸的热稳定性;亲水性单宁酸减弱了负载山奈酚复合粒子卵清蛋白的构象变化,而且增强了卵清蛋白与疏水性多酚山奈酚的相互作用,同时负载两种多酚的复合粒子的系统稳定性与抗氧化活性最强,三种复合粒子均分散均匀,大小均一。2.山奈酚与单宁酸以无定形态包被于卵清蛋白-海藻酸钠纳米粒子中,且包被效果良好由OVA-KAE-SAOVA-TA-KAE-SAOVA-TA-SA依次增强;OVA-SA包被多酚含量是OVA包被的2.7~3.2倍;且OVA-SA纳米粒子比单一OVA纳米粒子负载KAE/TA后,蛋白质构象变化小,有效粒径小,|ζ|值大;OVA-TA-KAE-SA的热变性中心温度最高可能是两种多酚的热稳定性协同发挥作用,OVA-TA-SA复合粒子抗氧化活性与抑菌能力最强,说明亲水性TA增强效果强于疏水性KAE。3.运载体中出现小衍射峰证明了复合粒子表面TA/Fe3+包被膜的形成;被TA/Fe3+包被的复合粒子构象发生改变。TA/Fe3+的包被增大了复合粒子的系统稳定性与热稳定性,运载体也被赋予抗氧化活性;抗氧化活性综合最强的为pHOVA-TA-KAE-SA复合粒子,与抑菌效果相同。


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