收藏本站
《吉林大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

血清多肽图用于急性白血病诊断及疗效评价的研究

梁婷婷  
【摘要】:急性白血病是一类造血干细胞异常的血液系统恶性肿瘤,严重威胁人类的生命。由于造血干细胞在发育过程中一系列基因的改变,从而使造血干细胞不能正常分化,对增殖调控因子失去反应能力,造成大量原始的造血干细胞积聚在骨髓、外周血和其他组织器官中,抑制正常造血细胞生长,进而产生一系列与此相关的临床表现,如贫血、出血、感染、肝脾及淋巴结肿大等表现。目前临床上通过骨髓细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学方法的联合应用对急性白血病做出诊断。治疗后,通过骨髓细胞形态学或其他分子生物学方法进行早期疗效评价,指导下一步治疗和做出预后评价。骨髓来源的检测分析需要在局部麻醉的条件下抽取病人骨髓,创伤性大、耗时长,而且存在一定的操作风险,目前尚缺乏一种无创、省时、灵敏度和特异性高的血清学诊断和评价方法。 血清/血浆检验具有创伤性小、花费少、易获得,处理简便的特点,而且在各种生理或病理状态下,血清/血浆中的蛋白质常有质或量的变化,因此广泛用于多种疾病诊断标志物的研究。血清多肽图(简称血肽图)方法是一种全新的诊断方法,以质谱作为主要检测手段,可检测到大量的血清多肽,根据谱图模式的差异做出诊断。血清多肽谱图技术用于肿瘤诊断研究之初就取得了令人振奋的结果。2002年发表在Lancet上的一篇题为“血清多肽组质谱扫描技术成功预警早期卵巢癌”的论文阐述了血清多肽谱用于肿瘤的诊断。此论文采用生物质谱技术比较了疾病组和对照组的血清多肽谱图模式,根据两组之间的差异特征分别对疾病组和对照组进行诊断。结果显示,50例卵巢癌患者全部被正确检出,而其中18例为Ⅰ期卵巢癌患者。该方法检测卵巢癌分别获得了100%的敏感性、95%的特异性和94%的阳性预测值,不仅优于传统的CA125检测,而且对于早期卵巢癌的诊断也十分有效。随后,国际上陆续发表了血清多肽图技术用于肿瘤诊断的论文。如,2006年初来至于Memorial Sloan-Kettering肿瘤中心的Villanueva等在The Journal of Clinical Investigation杂志发表了多肽分离技术与MALDI-TOF-MS联合诊断膀胱癌、乳腺癌和前列腺癌。2006年底Nature杂志上发表了对该文章的一篇评论,评论中对此方法给予了肯定。同时,Villanueva等再次在Molecular Cellular Proteomics杂志上发表了利用上述技术诊断转移性甲状腺癌的论文。此外,相关论文也在Clinical Cancer Research, Journal of Clinical Oncology以及Clinical Chemistry等杂志发表。值得一提的是这一方法不仅用于肿瘤的诊断,也可用于其它疾病的诊断。2006年Lancet上发表了一篇题为“血清蛋白质组谱图法检测结核诊断标志物”的论文,与传统的诊断方法相比,结核病诊断的特异性和灵敏度均超过95%。这些研究成果表明人的血清多肽,尤其是低分子量的多肽中存在大量与肿瘤诊断相关的重要信息,因此研究血清多肽谱图比传统研究单个肿瘤诊断标记物更具有优势和前景。 血清蛋白和多肽的提取是蛋白质组学用于疾病诊断研究的关键技术环节。在蛋白质组学研究中,双向凝胶电泳是蛋白质分离技术的典型代表。该技术充分利用了蛋白质的等电点和分子量两大物理特性将样品中的蛋白质复合物分离。但是它需要的样品量大、可检测的蛋白范围有限、重复性差以及耗时费力,并不适于临床诊断研究。大量血清多肽研究采用蛋白质芯片分离技术,该技术不需要对样品做预处理,样品点靶后可直接进行质谱检测分析,但是检测后的样品无法洗脱进行后续的鉴定分析,而且芯片制备工艺复杂、价格昂贵,限制了蛋白芯片的应用。随着高分辨质谱MALDI-TOF-MS应用于肿瘤诊断研究,多种血清蛋白或多肽分离方法可以与其联用,弥补了蛋白质芯片的不足。而超高分辨率和灵敏度的FT-ICR-MS质谱仪的出现,使血清多肽的鉴定成为可能。磁珠分离体系是近年兴起并广泛用于血清多肽制备的方法。它的组成通常包括磁性内核和表面的高分子外壳。其表面的大分子决定了结合蛋白质/多肽的性质和种类。由于磁珠表面积较大,结合能力高,因此具有较高的提取效率,而且操作简便,重复性较好,已用于疾病诊断的蛋白质组学研究。 在本研究中,我们选用金属螯合磁珠和高分辨质谱MALDI-TOF-MS作为急性白血病血清多肽谱图研究的技术体系。我们对磁珠分离和质谱检测的稳定性和重复性进行了实验评价,评价结果显示上述体系稳定,达到了国际要求。应用这一技术体系对147例急性白血病和107例对照血清进行检测,获得了两组的血清多肽谱图,通过Biosun_MS生物信息学软件中的支持向量机(support vector machine, SVM)算法和t检验分析,初步建立了急性白血病的血清多肽图诊断模型,该诊断模型的诊断特异性和敏感性分别为100%和97%。进一步分析55个特征多肽(P0.001)的峰强度在初治急性白血病、急性白血病血液学完全缓解、急性白血病分子缓解和健康对照组的分布趋势发现,两个血请多肽m/z 1865.13和1778.05的峰强度随着急性白血病治疗缓解程度提高有所降低,尤其在分子缓解时二者强度明显减低。上述趋势也同样存在于M3型急性白血病经治疗达分子缓解时,两个多肽的峰强度明显减低接近于健康水平,提示这两个多肽具有微小残留病监测的潜力。FT-ICR-MS质谱测序结果证明这两个多肽为补体C3f片段。此外,该技术体系还用于急性白血病的疗效评价研究,研究中通过检测分析30例初治急性白血病及其治疗两个疗程后达血液学完全缓解的血清,获得了初治与血液学缓解后的血清多肽谱图,通过Biosun_MS生物信息学软件中的SVM算法和检验分析,初步建立了急性白血病疗效评价的血清多肽谱图模型,该诊断模型的诊断特异性和敏感性分别为90%和100%。 上述研究结果表明血清多肽谱图模式能够反映急性白血病的病理状态,为我们进一步的研究提供了依据。综合我们的研究结果,本研究的主要结论如下:①本研究初步建立了急性白血病血清多肽谱图诊断模型和疗效评价模型,同时发现了与微小残留病监测相关的血清多肽。②测序分析所获得的7个特征血清多肽序列为急性白血病机制的探讨提供了线索。本研究的创新之处在于将血清多肽谱图模式诊断技术引入急性白血病研究,发现并探讨了其在急性白血病诊断、微小残留病监测和疗效评价方面的应用潜力。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R733.71

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 孙娜;夏薇;;白血病诊断与适配体技术[J];北华大学学报(自然科学版);2013年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 李立安;王娜;梁婷婷;李爱玲;李亚里;;血清多肽图技术建立子宫内膜异位症诊断模型[J];南方医科大学学报;2010年04期
2 徐琨;朱尔一;杨芃原;刘银坤;;由质谱分析数据建立乙肝病人与健康人的分类模型[J];分析化学;2009年02期
3 孙淳;刘银坤;;多因素癌症诊断分类模型的建立和应用[J];生命的化学;2010年03期
4 周桂娜;陈宝安;;M-FISH技术在复杂核型异常的急性白血病患者的诊断、预后分析中的应用[J];中国实验血液学杂志;2010年01期
5 张明智;付晓瑞;孙振昌;南飞飞;王瑞林;宋敏;;不同疗效的非霍奇金淋巴瘤血清蛋白质质谱分析[J];肿瘤防治研究;2008年09期
6 徐琨;朱尔一;杨芃原;刘银坤;;由质谱分析数据建立肝癌病人与健康人血清的分类模型[J];质谱学报;2008年05期
7 Toshimasa Uemura;;Screening serum hepatocellular carcinoma-associated proteins by SELDI-based protein spectrum analysis[J];World Journal of Gastroenterology;2008年08期
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 方均建;铜螯合纳米磁珠结合生物质谱检测血清中芋螺毒素的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
2 邓敬桓;SELDI蛋白芯片技术筛选HBsAg携带者和肝硬化患者血清蛋白标记物的研究[D];广西医科大学;2008年
3 朱彦慧;VEGF与Dll4/Notch信号通路在急性髓系白血病患者血管增生中的作用及相互关系[D];山东大学;2008年
4 徐琨;化学计量学技术用于肝脏疾病的研究[D];厦门大学;2008年
5 吉艳霞;应用SELDI-TOF-MS技术对肝硬化血清蛋白的初步探讨[D];山西医科大学;2009年
6 李莹;HBV cccDNA定量检测方法的建立及临床初步应用[D];天津医科大学;2009年
7 丰大利;广西肝癌、鼻咽癌高危人群的建立[D];广西医科大学;2010年
8 刘盛东;肝细胞癌肝内血管侵犯相关分子标记的血清蛋白质组学研究[D];复旦大学;2010年
9 于新哲;应用CLINPROT技术建立早期诊断结直肠癌及肝转移预测模型[D];复旦大学;2010年
10 吴孔江;蚁群分类规则挖掘算法改进及遥感分类应用[D];中南大学;2012年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 付玉荣,邱宗荫;SELEX技术及其应用研究进展[J];国外医学.病毒学分册;2005年03期
2 王超;李明;刘跃平;黄君富;;骨髓涂片免疫组化在形态学难以诊断的急性白血病中的临床研究[J];国际检验医学杂志;2009年06期
3 郭磊;;SELEX技术及寡核苷酸适配体的近期研究进展[J];国际药学研究杂志;2010年04期
4 朱竑;崔雯;;骨髓细胞化学染色对急性白血病分型的诊断意义[J];国际检验医学杂志;2012年17期
5 邵宁生;李少华;黄燕苹;;SELEX技术及Aptamer研究的新进展[J];生物化学与生物物理进展;2006年04期
6 王成刚;莫志宏;;核酸适体技术研究进展[J];生物医学工程学杂志;2006年02期
7 霍菲菲;刘欣;孙自敏;朱薇波;郑昌成;汪健;邬志伟;;397例急性白血病细胞遗传学与FAB分型相关性研究[J];中国实验血液学杂志;2011年01期
8 张书芹;王光平;朱平;梁嘉佳;徐雅静;彭敏源;陈炎;谭三勤;陈方平;;急性髓系白血病CD33~+/CD34~+细胞表面核酸适配体的筛选及结构分析[J];中国实验血液学杂志;2011年03期
9 肖志坚,郝玉书;免疫表型分析与急性白血病诊断[J];中华血液学杂志;1997年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 刘文伟;诊断慢性粒细胞白血病的电化学生物传感器的研究[D];兰州大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 魏琪,姚汝华,鲍时翔;两种固定化金属螯合复合亲和膜色谱介质制备[J];功能高分子学报;2000年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈朝仕;;急性白血病合并感染时血清 C-反应蛋白水平的运用[J];国际输血及血液学杂志;1985年01期
2 高绍华;;血清LDH、HBDH水平与急性白血病患者临床转归的关系[J];武警医学院学报;2009年04期
3 严碧芸;;急性白血病患儿血清中β_2—微球蛋白含量研究[J];广西医学;1995年06期
4 孙酬经;;骨髓原始细胞减少指数预测急性白血病疗效的评价[J];实用肿瘤杂志;1993年04期
5 吴振添;刘会兰;耿良权;童娟;汤宝林;孙自敏;邬志伟;魏海明;;NK细胞活化性受体NKG2D及其配体MICA/B在急性白血病免疫逃逸机制中的初步研究[J];中国实用内科杂志;2007年S1期
6 阳本孝;李安柏;何铁山;陈松年;;血清铁蛋白测定在急性白血病中的意义[J];现代医学;1993年04期
7 丛佳;汪洪毅;张翠玲;;垂体肿瘤转化基因与碱性成纤维细胞生长因子在急性白血病中的表达和临床意义[J];中国实验血液学杂志;2005年06期
8 李岭;;急性白血病患者乳酸脱氢酶水平变化及临床价值[J];社区医学杂志;2008年13期
9 刘昌勋;侯艳秋;彭亚兰;曹文玲;王冬冬;李术霞;陈超美;;乳酸脱氢酶及a-羟丁酸脱氢酶对早期白血病筛查及预后评估[J];内蒙古医学杂志;2010年10期
10 吴音;冷青;季征;张桂敏;马清君;郑芳;宋扬;;乳酸脱氢酶、β_2微球蛋白在急性白血病中的临床意义[J];中国医疗前沿;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陆滢;金洁;徐伟来;;WT1基因在骨髓增生异常综合征和急性白血病中的表达[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
2 王金贵;高唐;;试谈中医对急性白血病的认识[A];全国中西医结合血液病学术研讨会、浙江省中西医结合学会血液病专业委员会成立大会首次学术年会暨继续教育学习班论文汇编[C];2006年
3 金璐;张学进;杨玮;赵毅;许晓峰;;结核后发生急性白血病2例[A];2007年浙江省血液病学术年会论文汇编[C];2007年
4 刘艳慧;王兆钺;张威;戴兰;沈文红;白霞;阮长耿;;急性白血病纤溶活性的临床研究[A];第十一届全国血栓与止血学术会议暨血栓栓塞性疾病(血栓与止血)基础与临床研究进展学习班论文摘要汇编及学习班讲义[C];2007年
5 赵丙瑞;唐晓文;岑建农;金松;施晓兰;魏孝艾;常伟荣;孙爱宁;吴德沛;;急性白血病造血干细胞移植后WT1检测与临床预后相关性研究[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
6 周海霞;钱江潮;江明华;王菊香;阮积晨;李原;;急性白血病患儿Th亚群细胞因子IFN-γ、IL-4的变化及意义[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年
7 冯丹;侯科佐;刘云鹏;;急性白血病患者P-gp、GST-Pi的表达及其与预后关系的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年
8 李英;林宏杨;;急性白血病临床回顾性统计分析[A];中华医学会第八次全国血液学学术会议论文汇编[C];2004年
9 赵朋敏;;针对急性白血病中出血的治疗[A];第八届全国中西医结合血液病学术会议论文集[C];2007年
10 林秀梅;钟文婷;王顺清;;组蛋白去甲基化酶LSD1在急性白血病的表达及其临床意义[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 任敏;急性白血病的预防[N];青海日报;2004年
2 陈华;梁爱斌急性白血病的诊治情结[N];科技日报;2007年
3 记者 王彦春 王梅;42个白血病孩子一个妈[N];通辽日报;2008年
4 本报记者 李颖 通讯员 林夕夕;“血癌”已不再难缠[N];科技日报;2006年
5 记者 赵长春;女性孕前感染疱疹能使儿童患急性白血病[N];新华每日电讯;2003年
6 本报记者  郭静 通讯员 陈飒 崔伟历;白血病面面观[N];广东科技报;2006年
7 齐文中;山西医大二院治疗急性白血病又有新贡献[N];山西科技报;2000年
8 张东风;一种白血病用药被暂停使用销售[N];中国中医药报;2007年
9 甘培华 余宽平;慈善受助学子回校感恩[N];镇江日报;2010年
10 荣生;儿童白血病多数可治愈[N];中国妇女报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 梁婷婷;血清多肽图用于急性白血病诊断及疗效评价的研究[D];吉林大学;2011年
2 王新荣;DNA启动子区甲基化状态改变在急性白血病微小残留病检测中的临床意义[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年
3 黄利华;青蒿琥酯对人急性白血病原代细胞增殖抑制作用及其机制的研究[D];广州中医药大学;2011年
4 许洪志;急性白血病医院感染及其危险因素的研究[D];山东大学;2004年
5 李宏良;清毒片及hTERT mRNA反义核酸对急性白血病影响的研究[D];广州中医药大学;2006年
6 徐开林;Evi-1和MDS1-Evi-1基因在骨髓增生异常综合征发病机制中作用的研究[D];中国协和医科大学;1998年
7 陈怡宏;清毒片、养正片治疗急性白血病的临床及实验研究[D];广州中医药大学;2005年
8 阴怀清;急性白血病NO、NOS、VEGF、IL-6、IFN-γ、血小板膜糖蛋白及RP水平研究及临床意义[D];山西医科大学;2003年
9 丁晓庆;复方浙贝颗粒降低化疗毒性反应的临床观察[D];北京中医药大学;2011年
10 杨洪涌;清毒饮(片)和养正片联合化疗治疗急性白血病疗效及其分子机制的研究[D];广州中医药大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 陈明;急性白血病和淋巴瘤线粒体基因组D-loop区不稳定性研究[D];山西医科大学;2011年
2 时昊;c-kit R在急性白血病中的表达及其临床意义研究[D];苏州大学;2001年
3 张晓丽;MTA与MEA方案治疗难治或复发急性白血病的临床研究[D];郑州大学;2010年
4 冯丹;GST-Pi和P-gp在急性白血病中的表达及临床意义[D];中国医科大学;2004年
5 李蕊;人类白细胞抗原-G在急性白血病中的表达及意义[D];南方医科大学;2010年
6 于萍;急性白血病患者MRP1与LRP的表达及临床意义[D];中国医科大学;2004年
7 郑晓丽;COX-2在急性白血病骨髓细胞中的表达及其与Bcl-2的相关性研究[D];郑州大学;2004年
8 周可树;白血病细胞Ki-67抗原表达和化疗后24小时体内细胞凋亡预测急性白血病疗效的研究[D];郑州大学;2002年
9 高峰;急性白血病患者P-糖蛋白表达及功能的检测[D];中国医科大学;2002年
10 马静静;IL-21,IL-6与IFN-γ在急性白血病患者中的表达及相互关系研究[D];山东大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026