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《吉林大学》 2011年
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辽东楤木三萜皂苷合成相关基因克隆及功能研究

吴颖  
【摘要】:辽东楤木(Aralia elata (Miq.) Seem),系五加科楤木属落叶小乔木。传统中草药,入药部位是根皮、茎皮、叶及嫩芽,具有补气安神、强精滋肾、祛风活血、除湿止痛等功效,用于治疗神经衰弱、风湿性关节炎和恶性肿瘤等症。最新研究表明:辽东楤木茎、叶具有较强的抗肝损伤作用,而且已经研制、开发出治疗肝炎的新药。辽东楤木主要入药成分是齐墩果烷型三萜皂苷,而且含量较高。齐墩果烷型三萜皂苷的生物合成途径已经明确,法呢基焦磷酸合成酶(FPS)和β-香树素合成酶(β-AS)是本合成途径的两个关键酶。本研究旨在利用生物技术手段从辽东楤木中分离FPS和β-AS两个关键酶基因,利用转基因技术转入大肠杆菌和酵母中实现异源表达。目标是从转目的基因的微生物中获得抗肝炎药物齐墩果酸,从而解决临床上对齐墩果酸的大量需求。 本研究利用RT-PCR技术,首次在辽东楤木中克隆到法呢基焦磷酸合酶基因(FPS)和β-香树素合成酶基因(β-AS),GenBank的登录号分别是HM219226和HM219225,并对FPS和β-AS进行结构分析和功能验证。 法呢基焦磷酸合成酶(FPS:EC2.5.1.1/EC2.5.1.10)位于三萜皂苷生物合成途径中游,催化五碳原子的异戊烯基焦磷酸(IPP)和二甲丙烯基焦磷酸(DMAPP)以“头-尾”连续缩合,形成15碳的法呢基焦磷酸(FPP)。FPS基因cDNA全长1040bp,其中包括1029bp完整的开放阅读框(Open Reading Frame, ORF),推测编码342个氨基酸,通过DNAMAN与人参、三七等氨基酸序列比对发现,同源性达到80%以上。同时构建原核表达载体pET-28a-FPS,进行原核表达分析,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,诱导得到39.6kD的融合蛋白,由此表明FPS基因在E.coli BL21中获得成功表达。 β-香树素合成酶(β-AS:EC5.4.99.B1)的作用位点在三萜皂苷生物合成途径的下游,将2,3-氧化鲨烯催化合成五环三萜类骨架β-香树素。此酶属于氧化鲨烯环化酶(OSC)家族。β-AS基因cDNA全长2292bp,其中包括2292bp完整的ORF,推测编码763个氨基酸,通过DNAMAN与人参、苜蓿、青蒿等氨基酸序列比对,同源性达到70%以上。同时构建原核表达载体pET-28a-AS,进行原核表达分析,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,诱导得到87.8kD的融合蛋白,由此表明β-AS基因在E.coli BL21中获得成功表达。 将β-AS基因转入到Pichia pastoris中,进行基因功能验证。构建酵母表达载体pPIC9k-AS,表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测得到87.8kD的诱导蛋白,说明β-AS基因在酵母中成功表达。应用HPLC技术,对转β-AS基因酵母的代谢目标产物鉴定检测,结果显示,β-AS在酵母中不但表达且具有活性,能够催化2.3-氧化鲨烯生成β-香树素。 本研究利用Real-time PCR技术分析了辽东楤木法呢基焦磷酸合酶和p-香树素合酶基因在侧根、茎、叶和花器官中的表达差异。两个关键酶基因在茎、叶、花、侧根中均有表达,其中茎中的相对表达量最高,侧根中最低。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S567.19

【引证文献】
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1 刘小英;苏明华;吴少华;李惠华;;‘解放钟’枇杷香树脂醇合成酶基因ejAS保守区的克隆[J];亚热带植物科学;2013年01期
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1 黄福山;辽东楤木愈伤组织及植株皂苷含量的研究[D];东北农业大学;2012年
2 刘小英;枇杷细胞悬浮培养体系的建立及优化[D];福建农林大学;2013年
【参考文献】
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1 秦亚平,吴大椿,肖锦和;龙牙楤木组织培养与快速繁殖技术研究[J];安徽农业科学;2004年01期
2 刘强;丛丽娜;张宗申;;植物甾醇与三萜类皂苷生物合成基因调控的研究进展[J];安徽农业科学;2006年19期
3 ;Transformation of Compound K from Saponins in Leaves of Panax notoginseng by Immobilized β-Glucanase[J];Chinese Herbal Medicines;2010年01期
4 陈永芳;芦韦华;王芳;麻浩;李建贵;;新疆紫草毛状根的诱导及培养[J];西北植物学报;2008年12期
5 周明兵,肖月华,朱冬雪,裴炎,赵德刚;杜仲胶合成相关基因EuFPS的克隆及序列分析[J];分子植物育种;2003年01期
6 王凌诗,黄其满;生物技术与药用植物的研究、开发和利用[J];高技术通讯;2003年11期
7 陈莉;吴耀生;;三萜皂苷生物合成途径及相关酶[J];国外医药(植物药分册);2004年04期
8 步怀宇;岑举人;王英娟;赵宇玮;李娜;毕彦博;;滇黄芩毛状根的诱导及其黄芩苷含量测定[J];基因组学与应用生物学;2010年01期
9 张淑慧;陈静;赵智勇;刘喜民;;龙牙楤木的研究概况[J];黑龙江医药;2001年04期
10 成慧;杨光;刘雅婧;赵春彦;原亚萍;吴颖;;龙牙楤木SE基因克隆与植物表达载体构建[J];吉林农业大学学报;2011年01期
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 侯巍;H-FABP表达、单克隆抗体制备、测定方法建立及临床应用研究[D];吉林大学;2006年
2 王广树;中草药刺人参和牛膝中的齐墩果烷型三萜皂苷及羽扇豆烯三萜皂苷的研究[D];吉林大学;2006年
3 马志强;刺龙芽化学成分和生物活性的研究[D];沈阳药科大学;2004年
4 晏琼;提高丹参毛状根生产丹参酮的诱导和过程策略研究[D];天津大学;2005年
5 吴耀生;药用植物三七三萜合成途径功能酶特征与植物三萜合成通路分子进化[D];广西医科大学;2008年
6 刘艳玲;高寒藏药材麻花艽及其体细胞杂种齐墩果酸合成关键酶-β-amyrin合成酶基因克隆及其功能鉴定[D];山东大学;2009年
7 侯春喜;人参皂苷生物合成关键酶基因MVD和βAS的克隆及βAS的反义表达[D];吉林大学;2009年
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1 杨立学;长白楤木快速扩繁途径的研究[D];东北林业大学;2003年
2 朱华;三七鲨烯合酶基因的克隆及其功能的初步研究[D];广西医科大学;2006年
3 王沛;Ri质粒介导八角莲遗传转化及毛状根鬼臼毒素产生的初步研究[D];浙江大学;2006年
4 贾冬梅;Ri质粒诱导西洋参产生发根及其发根培养条件的优化研究[D];吉林大学;2007年
【共引文献】
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1 赵泽贞,温登瑰,魏丽珍,黄民提;杏仁对12种抗肿瘤药物的诱变性的抑制效应[J];癌变.畸变.突变;1992年06期
2 徐鑫成,杨守志,彭一良;芦荟和大蒜抗诱发微核效应[J];癌变.畸变.突变;1999年05期
3 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
4 程烽;盛燕;施静艺;陈漪;徐潮;刘智;梁军;潘春明;朱忠勇;宋怀东;;重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
5 温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
6 金艺凤;李铁臣;王莹;刘东华;孙珍贵;;ERCC1和XPD单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
7 柳金矿,王明寿,周雪梅,张倩,陈卫红,周松林;嚼食槟榔人群末梢血淋巴细胞微核率的调查研究[J];癌变.畸变.突变;1994年04期
8 吴勃岩,王华江,赵玉桢,段玉芹,孙玉珍;赤包根茎醇提取物致突变性研究[J];癌变.畸变.突变;1998年03期
9 吴静;李玉峰;宋敏训;黄兵;马秀丽;李峰;;鸡α-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及其抗病毒活性测定[J];山东农业科学;2006年01期
10 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
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1 朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 凌铁军;夏涛;李大祥;魏孝义;宛晓春;;Cerebrosides from the roots of Serratula chinensis[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
3 李珊;王丹;吕剑波;李向日;;生晒参中9种人参皂苷含量测定的方法研究[A];中华中医药学会中药炮制分会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 徐波;张莉;李启云;王景会;姜媛媛;杨贞耐;;牛凝乳酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达[A];中国奶业协会年会论文集2008(下册)[C];2008年
5 刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
6 王景会;姜媛媛;李玉秋;李达;杨贞耐;;微小毛霉凝乳酶基因的克隆及在毕赤酵母中的重组表达[A];首届中国奶业大会论文集(下册)[C];2010年
7 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
8 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
9 李玫;廖宝文;;红树林湿地烷烃降解菌的分离筛选[A];第十三届中国科协年会第16分会场-沿海生态建设与城乡人居环境学术研讨会论文集[C];2011年
10 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
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1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 彭维兵;四种新型18β-甘草次酸和齐墩果酸修饰物成药性的初步评价[D];中国海洋大学;2010年
5 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
7 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
8 米东;PTHrP和BMP-6在乳腺癌中的表达机制研究[D];南开大学;2010年
9 王俊峰;川西獐牙菜体细胞杂交及其环烯醚萜类化合物合成相关基因香叶醇-10羟化酶的克隆和功能验证[D];山东大学;2010年
10 陈丛瑾;香椿有效成分的提取纯化和生物活性研究[D];中南林业科技大学;2010年
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1 赵付伟;猪Ⅲ型干扰素IFN-λ1的克隆、表达和抗病毒活性研究[D];华中农业大学;2010年
2 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
3 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
4 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
5 王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
6 黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
7 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
8 龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
9 刘源;猪胸膜肺炎放线杆菌双组分调控系统ΔnarQ/narP突变株构建及功能研究[D];华中农业大学;2010年
10 张惠芝;茅苍术种子育苗关键技术研究[D];华中农业大学;2010年
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1 刘露;王正;杨青松;;熊果酸与胰岛素抵抗研究综述[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年07期
2 邹盛勤;陈武;;千屈菜中熊果酸和齐墩果酸含量的测定[J];安徽农业科学;2006年22期
3 陈红;王永清;;枇杷花药培养诱导愈伤组织的研究[J];安徽农业科学;2007年27期
4 刘艳芳;安广杰;;微波辅助提取夏枯草中熊果酸的工艺[J];安徽农业科学;2007年34期
5 罗容珍;杜怀明;张利;易学文;;微波-超声波协同作用提取熊果酸的工艺研究[J];安徽农业科学;2011年04期
6 王培忠;赵欣;张宗申;;东北矮紫杉细胞悬浮培养中褐化问题的研究[J];安徽农业科学;2012年10期
7 于明明;周富强;刘军海;;熊果酸提取工艺的研究进展[J];氨基酸和生物资源;2009年01期
8 赵得萍;唐道城;刘米会;郭志;;东方百合花器官组织培养研究[J];北方园艺;2008年02期
9 师海波,刘威,苗艳波,孙英莲,周重楚;龙芽楤木总甙对小鼠B型单胺氧化酶及蛋白质合成的影响[J];白求恩医科大学学报;1999年05期
10 葛敬岩,郭春尧,赵春燕,张学新;龙牙葱木皂苷对大鼠血流动力学的影响[J];白求恩医科大学学报;2001年06期
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1 潘学武;喜树胚轴悬浮培养细胞喜树碱生物合成影响因素的研究[D];武汉大学;2004年
2 刘春生;ITS序列和β-香树酯醇合成酶基因与甘草酸形成和积累的相关性研究[D];北京中医药大学;2006年
3 马志强;刺龙芽化学成分和生物活性的研究[D];沈阳药科大学;2004年
4 王莉;长鞭红景天细胞悬浮培养及其次生代谢调控研究[D];北京林业大学;2007年
5 唐晓敏;水分和盐分处理对甘草药材质量的影响[D];北京中医药大学;2008年
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1 万春阳;盐分对甘草酸和甘草苷积累的影响及其作用机制研究[D];北京中医药大学;2011年
2 彭晓军;枇杷胚乳离体培养及植株再生的研究[D];四川农业大学;2002年
3 范美华;半夏细胞悬浮培养和次生代谢物提取的初步研究[D];华中师范大学;2004年
4 沈庆斌;枇杷高频率体胚发生体系的建立及其遗传转化初步研究[D];福建农林大学;2005年
5 韩小龙;从枇杷叶中提取、分离熊果酸的工艺研究[D];西北大学;2005年
6 王影;前体物质对西洋参愈伤组织生长及代谢的影响研究[D];吉林农业大学;2007年
【二级参考文献】
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1 齐香君;郭乐康;陈秀清;;黄芩毛状根的生长与产物代谢动态研究[J];安徽农业科学;2008年30期
2 高昌琨,高建,马如龙,徐先祥,黄鹏,倪受东;牛膝总皂苷抗炎、镇痛和活血作用研究[J];安徽医药;2003年04期
3 王春雷,芦柏震,侯桂兰;熊果酸抗肿瘤作用研究进展[J];安徽医药;2005年10期
4 王先远,金宏,许志勤,高兰兴;苦瓜皂甙降血糖作用及其机制初探[J];氨基酸和生物资源;2001年03期
5 张明哲;王真慧;张美萍;王义;孙春玉;蒋世翠;;人参SQS和SE酶基因的克隆及其表达载体的构建[J];现代农业科技;2010年04期
6 葛君;朱妤婕;吴军;姚蓓蓓;;绞股蓝皂苷对家兔肠缺血再灌注致心肌损伤的保护作用[J];蚌埠医学院学报;2006年04期
7 孔祥生,张妙霞,张益民;甜柿组织培养中玻璃化现象的发生与防治[J];北方园艺;1999年04期
8 王志洁,黄铁牛,刘焱文,杨占秋,方学韫;黄芪总皂甙抗HSV_2的实验研究[J];浙江中医学院学报;2001年05期
9 王彭伟;肾蕨组培快速繁殖的研究[J];北京林业大学学报;1998年02期
10 冯炜权;运动疲劳及过度训练的生化诊断——运动生物化学动态之三[J];北京体育大学学报;2000年04期
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1 侯巍;许淑芬;刘玲丽;杨晓虹;;人心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在大肠杆菌中的表达和纯化[A];第十届全军检验医学学术会议论文汇编[C];2005年
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1 刘春生;ITS序列和β-香树酯醇合成酶基因与甘草酸形成和积累的相关性研究[D];北京中医药大学;2006年
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1 王莉;何首乌毛状根培养及其活性成分的产生[D];沈阳药科大学;2001年
2 李忠超;特有濒危植物八角莲遗传多样性研究[D];浙江大学;2002年
3 陶均;发根农杆菌对蓝猪耳的遗传转化及其毛状根再生植株的初步研究[D];华南师范大学;2004年
4 徐洪伟;高山红景天毛状根培养系统的建立[D];东北师范大学;2004年
5 张广求;Ri质粒介导紫锥菊的遗传转化及其毛状根中次生代谢产物的含量分析[D];重庆大学;2005年
6 郑祥正;葡萄鲨烯合酶基因的克隆与原核表达[D];福建农林大学;2007年
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1 隋姗姗;马江锋;侯顾伟;奚永兰;姜岷;;肠膜明串珠菌蔗糖磷酸化酶基因在大肠杆菌中的表达[J];生物技术通报;2011年05期
2 王丽;杜晓明;王林林;史西保;藤蔓;李功权;权凯;郭军庆;张改平;;人热休克蛋白10和鼠热休克蛋白10的克隆、序列分析及其原核表达[J];华北农学报;2011年03期
3 王彦红;马怀良;胡顺林;仇旭升;刘秀梵;;鸡痘病毒ORF073基因克隆及原核表达[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2006年04期
4 王素华;曲道峰;蔡渭明;杜爱芳;;弓形虫P30基因的克隆及其在E.coli中的融合表达[J];检验检疫科学;2008年04期
5 南晓伟;杨少华;高运东;王长法;杨宏军;刘晓;仲跻峰;申之义;何洪彬;;牛A组轮状病毒VP4全基因的克隆与原核表达[J];贵州农业科学;2009年07期
6 芦晓立;颜新敏;吴国华;叶奕优;李健;朱海霞;王建科;赵志荀;崔力凡;朱彩珠;张强;;绵羊CD58基因的克隆与原核表达[J];甘肃农业大学学报;2010年05期
7 刘劲;赵敏;程廷才;朱勇;鲁成;;家蚕尿酸氧化酶基因BmUo的克隆及其序列分析与原核表达[J];蚕业科学;2008年02期
8 郭露玲;刘海滨;石剑;李谷;肖庚富;;传染性造血组织坏死症病毒囊膜蛋白在原核细胞中的表达[J];华中农业大学学报;2009年02期
9 王松涛;陈丽丽;杜启艳;常重杰;;淇河鲫生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达[J];贵州农业科学;2009年07期
10 双宝;李明;李成;王晴;高继国;向文胜;刘忠华;;人痩素基因的克隆及原核表达[J];东北农业大学学报;2010年04期
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1 黄友谊;刘敬卫;丁建;倪德江;;茶树多酚氧化酶的基因克隆与原核表达[A];2008茶学青年科学家论坛论文集[C];2008年
2 李宏;张宏誉;胡鸢雷;林忠平;;花生过敏原Arah_1的基因克隆与原核表达[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年
3 赵宇玮;贾敬芬;;青稞甜菜碱醛脱氢酶基因hvbadh1的克隆及原核表达[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年
4 傅本重;吴茂森;何晨阳;;水稻白叶枯病菌TCS应答调节子GacAxoo的分子克隆及其原核表达[A];植物保护科技创新与发展——中国植物保护学会2008年学术年会论文集[C];2008年
5 江涛;周艳琴;刘琴;聂浩;姚宝安;赵俊龙;;弓形虫ROP2基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
6 张清霞;黄姗姗;童蕴慧;徐敬友;;地衣芽孢杆菌W10 β-甘露聚糖酶基因的克隆及原核表达[A];江苏省植物病理学会第十一次会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2008年
7 刘昭华;王冕;郭兴启;胥保华;;中华蜜蜂Accl2efl基因的克隆及其表达分析[A];中国养蜂学会中蜂协作委员会“2009年学术交流会”论文集[C];2009年
8 窦永喜;景志忠;候俊琳;骆学农;张强;刘奇;左志林;才学鹏;;猪CD58分子基因克隆、表达及其结构功能预测[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
9 王运华;张耀洲;;一个新的家蚕基因的克隆及其原核表达研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
10 辛英豪;高继明;刘标;李莎莎;姜世金;;Ⅰ型鸭病毒性肝炎VP1基因的克隆与原核表达[A];山东畜牧兽医学会禽病学专业委员会第一次学术研讨会论文集[C];2009年
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1 记者 李秀萍;石河子大学转基因克隆绵羊研究取得突破[N];兵团日报(汉);2011年
2 刘越西 徐仁元 记者 金姝;世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛在吉大农学部培育成功[N];吉林日报;2011年
3 黄勇娣;世界首例转基因克隆兔在沪诞生[N];解放日报;2007年
4 曹斌;血癌新病毒基因克隆成功[N];团结报;2000年
5 许沈华;什么是基因克隆[N];家庭医生报;2007年
6 王婷婷;我国完成世界首例转基因克隆兔实验[N];科技日报;2007年
7 王有佳;全球首例转基因克隆兔在沪诞生[N];人民日报;2007年
8 李建平;首例荧光转基因克隆猪所产猪崽再次被确认具有荧光特征[N];大众科技报;2008年
9 记者 王中宙;25只转基因克隆绵羊在内蒙古农业大学诞生[N];呼和浩特日报(汉);2010年
10 吴一福;四军医大构建HBV全基因克隆质粒细胞系[N];中国医药报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吴颖;辽东楤木三萜皂苷合成相关基因克隆及功能研究[D];吉林大学;2011年
2 李静;海洋酵母菌Metschnikowia reukaufii W6b酸性蛋白酶的生产、基因克隆和表达的研究[D];中国海洋大学;2008年
3 游向荣;龙眼成花转变与成花逆转的差异蛋白质组学研究[D];福建农林大学;2009年
4 黄小波;猪传染性胃肠炎检测基因芯片与猪传染性胃肠炎病毒SC-H株N基因表达研究[D];四川农业大学;2006年
5 陈立志;牛源致病性坏死梭杆菌分离鉴定及其白细胞毒素免疫特性研究[D];吉林大学;2008年
6 陆秀君;苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因的克隆与表达研究[D];河北农业大学;2005年
7 赵宇军;猪戊型肝炎病毒结构蛋白基因表达及其基因特异性噬菌体展示肽库构建[D];中国农业科学院;2005年
8 韩俊友;牛蛙皮肤抗菌肽分离纯化、基因克隆表达及生物学特性的研究[D];吉林大学;2007年
9 许波;抗菌/抗内毒素多肽葛佬素的表达、纯化及其生物活性的初步研究[D];第四军医大学;2004年
10 孙照刚;传染性喉气管炎病毒糖蛋白G基因的克隆、表达、蛋白功能研究以及缺失该基因病毒的重组[D];中国农业大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李会娟;家蚕转胶蛋白基因的原核表达及功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
2 张曙光;中国林蛙皮肤丝氨酸蛋白酶抑制剂RCSPI2的基因克隆和原核表达[D];辽宁师范大学;2010年
3 谢辉;阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因的克隆与表达[D];四川大学;2005年
4 刘进军;人巨噬细胞移动抑制因子的原核表达及其单克隆抗体的制备[D];第三军医大学;2005年
5 黄姗姗;地衣芽孢杆菌W10β-甘露聚糖酶基因的克隆、表达及功能[D];扬州大学;2009年
6 王辉;斑马鱼多聚免疫球蛋白受体(zplgR)基因的克隆[D];山东师范大学;2007年
7 曹凤;小麦尿卟啉原Ⅲ合酶基因克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达[D];西北农林科技大学;2007年
8 冯海燕;猪T细胞受体α、β链基因的克隆、多态性分析及α链基因的表达[D];中国农业科学院;2009年
9 吴任;凡纳滨对虾一种HSC70的cDNA克隆,原核表达及其体内表达分析[D];暨南大学;2006年
10 李学仁;重组奶牛α、γ干扰素的研制及其抗病毒作用[D];南京农业大学;2005年
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