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卵巢功能衰退的比较蛋白质组学及相关蛋白差异表达的研究

张利群  
【摘要】:卵巢功能提前衰退,严重影响女性生殖健康及生活质量。因此关于卵泡发育成熟及卵巢功能衰退方面的研究一直是关注的热点。本研究取绝经期与育龄期女性卵巢组织进行比较蛋白质组学分析,也是对卵巢功能衰退及卵巢功能正常的卵巢组织进行比较分析,提取两组卵巢组织蛋白质,应用荧光差异凝胶电泳(difference gel electrophoresis,DIGE)及MALDI-TOF质谱技术筛选出功能蛋白,通过western blot技术行蛋白差异表达分析、免疫组化技术行蛋白定位表达分析。 功能衰退与功能正常卵巢组织中存在差异表达蛋白点31个,其中表达上调14个,表达下调17个。存在4个差异表达蛋白质乙二醛酶I(Glyoxalase I,GLO I)、泛素羧基末端水解酶L1(Ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1,UCH-L1)、热休克蛋白27(heat shock protein27,HSP27)、血清淀粉样蛋白P(serum amyloid P,SAP)。将这4种蛋白作为功能蛋白,它们在两组人群卵巢组织中均有表达,在功能衰退卵巢组织中表达升高。且4种蛋白均在功能衰退卵巢闭锁卵泡中表达增强;并在不同发育阶段卵泡细胞中表达水平强弱不一。SAP在不同发育阶段卵泡细胞中均有较强表达;HSP27在原始卵泡、初级卵泡卵母细胞胞浆及闭锁卵泡表达增强;GLO I在成熟卵泡颗粒细胞及卵泡膜细胞胞浆中表达增强,在闭锁卵泡中表达最强;UCH-L1在成熟卵泡颗粒细胞及卵泡膜细胞胞浆中呈强表达,闭锁卵泡中表达较生长卵泡细胞中减弱;4种蛋白在卵巢白体中均不表达。 本实验首次应用比较蛋白质组学技术分析人类育龄期与绝经期女性卵巢组织的蛋白差异表达。4种差异表达蛋白可以作为判断卵巢功能的指标,作为调控卵泡发育、预防及诊治卵巢早衰及延缓卵巢功能衰退的理想研究靶点。


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