收藏本站
《吉林大学》 2015年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

NEFAs和BHBA对奶牛中性粒细胞TLR2/4-NF-κB信号通路的影响

张玉明  
【摘要】:奶牛酮病以血液中高浓度的非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFAs)和β-羟丁酸(β-hydroxybutyrate,BHBA)为临床病理学特征。高NEFA和BHBA血症参与奶牛中性粒细胞(PMN)免疫功能的调节,尤其是炎症性疾病(例如乳腺炎和子宫内膜炎)。然而,在奶牛中性粒细胞,高浓度的NEFAs和BHBA是否能够激活TLR2/4介导的核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路从而诱导奶牛中性粒细胞的炎性损伤,目前尚不清楚。 首先通过在体实验,观测酮病奶牛PMN中TLR2/4-NF-κB信号通路的变化,实验结果表明,酮病奶牛相比较于健康奶牛,PMNTLR2、TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-1β基因表达显著上调,IKKβ激酶活性显著增加,同时血清(浆)中炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌量显著增高,进一步说明酮病奶牛存在一定程度的炎症。 为确定NEFAs和BHBA血症引发酮病奶牛中性粒细胞炎性损伤的机制,体外中性粒细胞培养液中添加不同浓度的NEFAs、BHBA、NF-κB通路抑制剂PDTC,观察其对原代奶牛中性粒细胞TLR2/4-NF-κB信号通路及其介导的下游炎性因子的影响。首先分离奶牛中性粒细胞,并进行鉴定,之后添加不同浓度的NEFAs和BHBA,采用MTT法及CCK8检测其细胞的增殖活性,作用多个时间点后,最终确定NEFAs和BHBA最佳作用时间点分别为为4h和5h。随后添加不同浓度的NEFAs(0、0.125、0.25、0.5、1和2mM NEFAs)、10μM PDTC、10μM PDTC+0.5mM NEFAs作用4h和不同浓度的BHBA(0、0.5、1、2、4和6mM)、10μM PDTC、10μM PDTC+2mM BHBA、BHBA作用5h。实验结果表明,与对照组相比,高浓度NEFA(s≥0.5mM)和BHBA(≥1.2mM)试验组IKKβ激酶活性和磷酸化IκBá蛋白的表达显著增加,同时NF-κB p65蛋白表达和转录活性也表现出与之同样的趋势。而促炎因子TNFα、IL-6和IL-1β的表达和释放呈现出相同的趋势,这说明高浓度NEFAs(≥0.5mM)和BHBA(≥1.2mM)可触发奶牛中性粒细胞自身免疫性的炎性损伤。而在添加NF-κB通路抑制剂PDTC后,IκBα蛋白的磷酸化水平和NF-κB p65蛋白表达和转录活性及其靶基因的表达均显著降低。 以上结果表明,高浓度NEFAs(≥0.5mM)和BHBA(≥1.2mM)能够显著上调PMN TLR2和TLR4,激活NF-κB信号通路,促进中性粒细胞炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的合成和释放,引起奶牛PMN炎性损伤,从而导致酮病奶牛免疫机能低下。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:S823

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 薛俊欣;缪德年;黄克和;张克春;;亚临床酮病对围产期奶牛免疫功能的影响[J];上海交通大学学报(农业科学版);2011年01期
2 史晓霞;王建国;李玉;宋玉祥;丁红研;韩盈盈;张玉明;殷立恒;王婷婷;张仁和;郭立辉;邓清华;李心慰;李小兵;刘国文;王哲;;非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响[J];中国兽医学报;2014年01期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李鹏;酮病奶牛肝脏脂肪酸氧化代谢特征及其调控[D];吉林大学;2012年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈其新;劳风学;李明;;从Raji细胞克隆IL-10基因[J];安徽农业科学;2007年36期
2 刘兆喜;朱晓岩;王建国;王晓旭;李心慰;陈灰;杨文涛;刘国文;;奶牛酮病的研究进展[J];中国畜牧兽医;2012年04期
3 Jinshan ZHAO;Ke JIANG;Zhenghao DAI;Xiaoli REN;Yumei WANG;Yongping JIANG;Mingtuan LIU;Yonglian DAI;Lele HOU;Hegang LI;;Advances in Mathematical Modeling of NFκB Signal Transduction in Mammals[J];Agricultural Biotechnology;2013年04期
4 杨琴;熊本海;韩英东;杨亮;;奶牛采食调控理论与干物质采食量模型研究现状和分析[J];动物营养学报;2014年01期
5 何宁;张静姝;张静;姜淑卿;刘英华;管彤;李新;;乙醇诱导小鼠急性肝细胞损伤模型中NF-κB的表达[J];癌变.畸变.突变;2014年01期
6 李文利;刘媛;李凤娟;李亚洁;;柞蚕免疫相关基因Apdorsal的克隆鉴定与表达分析[J];蚕业科学;2014年01期
7 弓剑;闫素梅;;硒对奶牛乳腺氧化应激与乳腺免疫功能的调节作用[J];动物营养学报;2014年03期
8 唐媚;胡松;唐信威;刘阳;王衍堂;邹强;;成纤维样滑膜细胞Toll样受体在类风湿性关节炎的研究进展[J];成都医学院学报;2014年02期
9 王孝武;王旭荣;杨志强;常瑞祥;李建喜;;奶牛子宫内膜炎研究进展[J];动物医学进展;2014年07期
10 朱卫华;杜恒;杨勇;薛玮玮;孟云;黄龙;张晓东;丁月云;殷宗俊;;霍寿黑猪和长白猪TLR4基因第3外显子的SNP检测及其遗传差异分析[J];安徽农业大学学报;2014年05期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 呙于明;贺喜;;多不饱和脂肪酸营养与免疫反应[A];家禽营养与饲料科技进展——第二届全国家禽营养与饲料科技研讨会论文集[C];2007年
2 呙于明;贺喜;龙芳羽;;多不饱和脂肪酸营养对免疫的调节作用与机理[A];动物营养研究进展——中国畜牧兽医学会动物营养学分会第八届全国代表大学暨第十届学术研讨会论文集[C];2008年
3 潘振亮;郭新伟;王成;白娜仁吐雅;周娟;;预防高产奶牛皱胃移位的营养调控措施[A];第二届中国奶业大会论文集(上册)[C];2011年
4 陈以意;黄克和;张克春;;亚临床酮病对奶牛产后子宫恢复状况和血液中白细胞数量的影响[A];第三届中国奶业大会论文集(上册)[C];2012年
5 薛俊欣;缪德年;黄克和;张克春;;亚临床酮病对围产期奶牛免疫功能的影响[A];第三届中国奶业大会论文集(上册)[C];2012年
6 王亮;张克春;;分娩应激对围产期奶牛免疫机能的影响[A];第三届中国奶业大会论文集(上册)[C];2012年
7 薛俊欣;张铮臻;黄克和;张克春;;奶牛亚临床酮病对乳房炎发病情况和抗氧化功能的影响[A];第三届中国奶业大会论文集(上册)[C];2012年
8 邱少辉;张然;方鑫;何鹏;梁争论;郑直;胡忠玉;;乙型肝炎疫苗及抗原免疫早期相关细胞因子及抗体反应的研究[A];2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集[C];2012年
9 孙丽萍;杨利国;;奶牛分娩期管理[A];第四届全国牛病防制及产业发展大会论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王建国;围产期健康奶牛与酮病、亚临床低钙血症病牛血液代谢谱的比较与分析[D];吉林大学;2013年
2 王席娟;SP-B-C/A(-18)基因多态性与高氧肺损伤易感性关系研究[D];华中科技大学;2013年
3 韩鑫;抑制IKK/NF-κB信号通路在脊髓损伤中的作用及其机制的实验研究[D];大连医科大学;2012年
4 张洪菊;CUEDC2在慢性粒细胞白血病细胞伊马替尼耐药中的作用[D];北京协和医学院;2013年
5 朱玮;β-葡聚糖增强大鼠乳腺上皮细胞的自主防御及其机制研究[D];南京农业大学;2011年
6 楼彩霞;髓系细胞特异性Sptlc2基因缺失对小鼠动脉粥样硬化病灶的影响[D];中央民族大学;2013年
7 方琦;脑内组胺及H1受体对星形胶质细胞谷氨酸代谢通路的调控作用[D];浙江大学;2013年
8 邢颖;FTY720诱导人结肠癌细胞凋亡、增强化疗药物敏感性的作用及其机制研究[D];中国人民解放军医学院;2013年
9 薛冰;LRP16基因对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及分子机制[D];中国人民解放军医学院;2011年
10 宋爽;PRRSV诱导炎症反应及其调控机制[D];华中农业大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 江玲;PD-L2在冠心病患者外周血单核细胞的表达及辛伐他汀的调节作用[D];南方医科大学;2011年
2 张金生;调和玉米油对肉仔鸡抗氧化应激、脂质代谢酶及免疫基因表达的影响[D];河南农业大学;2011年
3 易龙;Rho GTP酶在ω-3多不饱和脂肪酸抑制肿瘤转移中的作用[D];第三军医大学;2007年
4 谢雷星;~(18)F-FDG PET/CT与MRI联合用于颈动脉粥样硬化易损斑块早期诊断的临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
5 王秋玲;火龙果籽的研究[D];广西大学;2012年
6 李奎;DHA对高饱和脂肪酸负荷所致肝细胞损伤的保护作用与机制[D];武汉工业学院;2012年
7 许远靖;β-羟丁酸对皱胃平滑肌细胞氧化应激及收缩相关蛋白表达的影响[D];吉林大学;2013年
8 刘兆喜;NEFA和BHBA对酮病奶牛氧化应激状态的影响[D];吉林大学;2013年
9 张弘韬;转TLR2基因绵羊鉴定及其炎症反应研究[D];黑龙江八一农垦大学;2013年
10 孙照磊;奶牛酮病的发病调查及酮病与胰岛素抵抗的关系[D];黑龙江八一农垦大学;2013年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
1 王素玲;王切;姜玲玲;;胆汁酸合成增加与肝D-双功能蛋白表达增强、活性升高的相关性[J];第四军医大学学报;2008年06期
2 黄志坚,黄依明,邱承亮,罗金木,吴移山;MTT比色法检测孕牛淋巴细胞转化的效果[J];福建农业大学学报;1996年04期
3 何生虎;王明成;傅邵刚;;奶牛低血钙症与阴阳离子平衡[J];甘肃畜牧兽医;2006年04期
4 张克春;谭勋;;围产期奶牛NEFA的营养调控研究进展[J];乳业科学与技术;2007年03期
5 叶承荣;张克春;谭勋;;能量负平衡对高产奶牛繁殖性能影响的研究进展[J];上海交通大学学报(农业科学版);2006年04期
6 石如玲;姜玲玲;;过氧化物酶体脂肪酸β氧化[J];中国生物化学与分子生物学报;2009年01期
7 张才;王利民;刘国文;苏蔚;黄建龙;谢光洪;王哲;;犊牛肝细胞的分离与原代培养[J];细胞生物学杂志;2007年06期
8 冯新为,龚非力,芦巧风,李卓娅,张强华,姜晓丹,段小初,张业平;人体中性粒细胞移动的微孔滤膜检测法[J];病理生理学报;1985年03期
9 宋华容;李正国;关辉;罗瑞卿;张飞;谷新利;;复方中药对乳房炎奶牛细胞免疫功能的影响[J];中国动物检疫;2009年04期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 孙玉成;围产期奶牛肝VLDL组装与分泌主要相关蛋白基因表达的调控[D];吉林大学;2006年
2 张辉;脂联素对围产期奶牛脂肪动员的相关性研究[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 苏蔚;NEFA对体外培养肝细胞PC mRNA和PEPCK mRNA丰度及其活性的影响[D];吉林大学;2007年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 沈敏;围产期奶牛及新生犊牛中性粒细胞粘着分子表达水平的检测[J];中国奶牛;1998年06期
2 姚建龙;徐军;戴莉;何高明;;奶牛中性粒细胞抗菌肽的提取及其对大肠杆菌的抑菌效果[J];安徽农业科学;2012年01期
3 刘双龙;王长法;杨宏军;杨少华;阿合买提·买买提;高运东;仲跻峰;;荷斯坦奶牛中性粒细胞β-防御素cDNA的克隆与序列分析[J];动物学杂志;2007年05期
4 李英俊,臧丽,张乃生,郭顺元;奶牛外周血中性粒细胞分离方法的优化[J];动物医学进展;2005年07期
5 ;[J];;年期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 康静静;牛中性粒细胞β-防御素4和5成熟肽的毕赤酵母表达及其抗分枝杆菌活性研究[D];中国农业大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 杨帆;金黄色葡萄球菌诱导奶牛中性粒细胞凋亡的基因表达研究[D];华中农业大学;2013年
2 臧丽;奶牛L-选择素McAb的制备及在乳腺炎奶牛中性粒细胞表达规律的研究[D];吉林大学;2007年
3 张玉明;NEFAs和BHBA对奶牛中性粒细胞TLR2/4-NF-κB信号通路的影响[D];吉林大学;2015年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026