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《吉林大学》 2016年
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GRIM-19对头颈部皮肤鳞状细胞癌生长和侵袭的影响及机制研究

张维  
【摘要】:背景:头颈部鳞状细胞癌是一类最常见的皮肤癌症,在世界范围,每年约650000新发病例,每年死亡病例约35000人。头颈部鳞癌的发病率随着年龄的增加而增加。吸烟、饮酒、环境暴露和HPV感染已被确定为鳞癌发展的重要危险因素。虽然有手术、放疗和化疗等治疗办法的改进,但是晚期头颈部鳞癌患者的5年生存率仍然很低。有很多试验,试图找出在头颈部鳞癌的发生发展的分子机制,包括例如TP53突变失活、缺失和代谢产物的改变等。在头部和颈部肿瘤分子机制的发展,将进一步阐明,预计将有助于加速发展有效的抗癌制剂,和识别诊断或治疗的生物标志物。干扰素与维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因19(GRIM-19),是一种干扰素β/RA诱导基因产物,已被确定为一个的肿瘤抑制潜在基因,与抑制肿瘤生长相关。在皮肤鳞状细胞癌患者肿瘤组织中GRIM-19表达进行下调。然而,关于其在皮肤鳞状细胞癌中的作用却不太了解。在这里,重组真核表达质粒携带GRIM-19转染头颈部皮肤鳞状细胞癌细胞(HN5),探讨其对皮肤鳞状细胞癌细胞生长的作用,体外侵袭和迁移的几种方式。结果发现,上调GRIM-19可以显著抑制HN5细胞的细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭,以及诱导细胞凋亡。此外,上调GRIM-19也能抑制尿激酶型纤溶酶原激活物u-PA,金属蛋白酶分泌基质MMP2、MMP-9、血管内皮生长因子VEGF等。我们的研究还表明,GRIM-19表达下调将导致信号转导与转录激活因子3(STAT3)的激活。总之,过表达的GRIM-1 9基因可能是控制皮肤鳞状细胞癌细胞生长和侵袭的有效途径。目的:在本文的研究中,我们的目的是探讨在皮肤鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭中,通过将过表达GRIM-19质粒转染至细胞,分析其对细胞增殖、凋亡的影响。本研究也开发了一种双表达质粒共同表达GRIM?19和P16,评价同时表达质粒转染的两种基因对头颈部皮肤鳞状细胞癌细胞在体外和体内的综合影响。我们的发现将使皮肤鳞状细胞癌的基因治疗有所发展,它是以GRIM-19为目标的研究与开发。材料与方法:应用脂质体法将p GRIM-19质粒及对照质粒转染至人头颈部皮肤鳞状细胞癌细胞HN5内。STAT3和GRIM-19的RNA表达水平用RT-PCR来测定。Western-Blot法检测相关蛋白的表达。细胞增殖采用MTT细胞增殖试剂盒评估。验证细胞成瘤能力用克隆能力实验。用流式细胞术和凋亡试剂盒检测细胞凋亡率的变化。用划痕试验检测GRIM-19细胞的迁移能力。Transwell侵袭实验用来检测细胞侵袭能力。血管内皮生长因子的生成量由酶联免疫吸附试验测量。应用脂质体法将p GRIM-19-P16共表达质粒及对照质粒转染至人头颈部鳞状细胞癌细胞HN5内,通过MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术等观察细胞周期与凋亡,以RT-PCR、Western blot法检测目的基因与相关基因和蛋白的表达;复制裸鼠鳞状细胞癌皮下移植瘤模型,腹腔注射携带共表达质粒p GRIM-19-P16的细胞,进行抗肿瘤作用与机制的研究。结果:HN5细胞在经p GRIM 19转染后,GRIM-19表达增加。GRIM-19表达上调抑制STAT3的表达。GRIM-19表达上调抑制HN5细胞的增殖和克隆能力。GRIM-19表达上调促进HN5细胞的凋亡。GRIM-19表达上调抑制HN5细胞的迁移和侵袭能力。GRIM-19表达上调抑制HN5细胞中MMP-9,VEGF,u PA and MMP 2的表达水平。GRIM?19和P16的共表达质粒(p Grim19?P16)对HN5头颈部皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖,克隆形成、迁移和侵袭效应,与单独转染p Grim?19或p P16效应比较有明显的抑制增强作用。此外,经p Grim19?P16基因转染的HN5细胞诱导的细胞凋亡相比于p Grim?19或p P16单独转染的在G0/G1期细胞周期阻滞效应水平提高。在体内实验中使用一个HN5移植肿瘤模型表明,腹腔注射p Grim19?P16与p Grim?19或p P16单独注射相比,有对肿瘤生长的抑制有增强作用。结论:本研究结论是:(1)上调GRIM-19抑制人类头颈部皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,以及诱导细胞的凋亡。(2)在HN5细胞迁移和侵袭过程中GRIM-19过度表达,可以通过STAT3通路,使其介导的MMP-2、MMP-9,VEGF和u-PA表达降低。(3)在体外和体内试验中,同时表达GRIM?19和P16转染真核表达质粒能更有效地抑制的头颈部皮肤鳞状细胞癌的增长。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R739.91

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 程勇;卫莹;李敏;周颖;冯定庆;肖卫华;凌斌;;GRIM-19的表达对人宫颈癌细胞移植瘤生长的影响[J];肿瘤防治研究;2010年12期
2 刘岩;李静;;GRIM-19及其靶基因产物STAT3与肿瘤关系的研究进展[J];辽宁医学院学报;2010年06期
3 周爱民;赵继京;叶静;肖卫华;Dhananjaya V.KalvakolanU;刘荣玉;;GRIM-19蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义[J];癌症;2009年04期
4 周颖;凌斌;;GRIM-19的功能及与肿瘤的相关性[J];医学分子生物学杂志;2008年03期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 邵月婷;siRNA-survivin与p53共表达质粒抗前列腺癌作用及其机制的实验研究[D];吉林大学;2008年
【共引文献】
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1 赵祯;沈国华;蔡华伟;;细胞凋亡基因GRIM-19研究进展[J];重庆医学;2016年14期
2 孙纪三;张建军;高伟;杨涛;郭庆军;马楠;王洪海;蒋文涛;;肝细胞癌组织HBXIP和GRIM-19表达及意义的探讨[J];天津医药;2015年12期
3 翟娜娜;黄器伟;陈奎生;刘军伟;李喜强;;GRIM-19蛋白在乳腺癌组织中的表达[J];肿瘤基础与临床;2014年06期
4 刘小娟;柏建印;李静;;GRIM-19及其靶基因产物STAT3在胰腺癌组织中的表达及相关性研究[J];医学与哲学(B);2014年06期
5 王同;武道荣;刘坤贺;;上调GRIM-19基因对SPC-A1生长影响观察[J];中华肿瘤防治杂志;2014年05期
6 陈铎;张牧霞;;食管鳞癌组织中GRIM-19的表达及意义[J];肿瘤基础与临床;2014年01期
7 李永光;朱伟;魏盟;;GRIM-19与STAT3蛋白作用及相关机制研究进展[J];医学研究杂志;2013年09期
8 彭晓晖;梁培育;欧善际;李浩勇;翁阳;许海波;颜毅;王声兴;黄用豪;符津山;陈松;;GRIM-19的表达与膀胱癌组织临床特征的相关性研究[J];海南医学院学报;2013年10期
9 周涛;王晓;;GRIM-19和STAT3在乳腺癌组织中的表达及相关性[J];中国现代普通外科进展;2013年06期
10 周涛;王晓;;GRIM-19在肿瘤及相关疾病中作用的研究进展[J];中国普通外科杂志;2012年11期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 张维;GRIM-19对头颈部皮肤鳞状细胞癌生长和侵袭的影响及机制研究[D];吉林大学;2016年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
1 周爱民;赵继京;叶静;肖卫华;Dhananjaya V.KalvakolanU;刘荣玉;;GRIM-19蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义[J];癌症;2009年04期
2 彭程;周颖;李敏;冯定庆;凌斌;肖卫华;;稳定表达GRIM-19的Hela细胞株的建立及其对STAT3的抑制作用[J];中国妇幼保健;2009年10期
3 李敏;周颖;彭程;冯定庆;蒋丽莎;凌斌;肖卫华;;GRIM-19在卵巢癌细胞株中的高表达及其意义[J];山东医药;2009年01期
4 周颖;凌斌;;GRIM-19的功能及与肿瘤的相关性[J];医学分子生物学杂志;2008年03期
5 龚龙波;罗学来;刘双又;陶德定;龚建平;胡俊波;;GRIM-19及其靶基因产物STAT3与结直肠癌恶性程度的关系[J];癌症;2007年07期
6 李智,段建敏,范维柯;Ki-67与恶性肿瘤预后的相关性[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2000年06期
7 赵京,孙玉鹗,张连斌;CD44的表达与人类非小细胞肺癌淋巴转移相关性的初步研究[J];中国肺癌杂志;2000年02期
【相似文献】
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1 章筝,江启富,水涛,钱智海;耳廓鳞状细胞癌(附12例报告)[J];中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志;1997年04期
2 张文兰,何志恒,刘宁里;眼球表面鳞状细胞癌的病理改变和原因分析[J];中国病理生理杂志;2000年10期
3 聂军,张汉武,杨国强;右外耳廓鳞状细胞癌1例[J];罕少疾病杂志;2002年04期
4 张晓丽,李贞,张传山;原发性胃鳞状细胞癌1例[J];陕西肿瘤医学;2002年01期
5 林挺,杨妙文,杨慧兰;头部鳞状细胞癌1例[J];临床皮肤科杂志;2005年08期
6 陈仕高;;肾鳞状细胞癌1例[J];四川医学;2007年08期
7 李娟娟;黎铧;胡竹林;;角膜鳞状细胞癌病理分析[J];国际眼科杂志;2009年03期
8 肖艳景;张全武;娄欣;赵红梅;和莹莹;;大肠鳞状细胞癌的临床病理特征(附1例报道并文献复习)[J];现代肿瘤医学;2011年01期
9 顾立怡;侯晓丽;;眼球表面鳞状细胞癌临床病理分析[J];新疆医学;2011年05期
10 张玉勤;;鳞状细胞癌的位置与扩散有关[J];国外医学情报;1990年16期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王炳亮;;眼表鳞状细胞癌97例临床资料分析[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年
2 王晓彦;郭利平;;巨大透明细胞鳞状细胞癌1例报告[A];中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2012年
3 顾科峰;;鳞状细胞癌[A];浙江省中西医结合学会皮肤性病专业委员会、中华医学会杭州分会皮肤科专业委员会第二十四次疑难皮肤病研讨会资料汇编[C];2007年
4 艾勇;罗来华;;疣状表皮发育不良伴鳞状细胞癌一例[A];江西省第五次中西医结合皮肤科学术交流会论文集[C];2006年
5 林世庄;;鳞状细胞癌1例[A];2013浙江省医学会皮肤病学学术年会论文汇编[C];2013年
6 张永侠;张彬;高黎;徐震纲;唐平章;;318例口咽鳞状细胞癌临床总结及预后因素分析[A];中华医学会第十三次全国耳鼻咽喉——头颈外科学术会议论文汇编[C];2013年
7 李喆;杨东运;李世荣;许森林;;面部鳞状细胞癌1例[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年
8 段奇文;;不能手术食管的鳞状细胞癌放疗剂量探讨[A];第四届湖北省抗癌协会青年委员会学术交流会论文集[C];2012年
9 程冬;马成民;马克;李波;朱敬波;;肾鳞状细胞癌1例[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
10 舒国斌;赵红磊;王松挺;;鳞状细胞癌1例[A];2012年浙江省皮肤病性病学术会议论文集[C];2012年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 ;晚期局部头颈部非转移鳞状细胞癌:哪种联合放化疗效果好[N];医药经济报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 张维;GRIM-19对头颈部皮肤鳞状细胞癌生长和侵袭的影响及机制研究[D];吉林大学;2016年
2 魏东敏;DAPK1在下咽鳞状细胞癌中的异常甲基化及表达[D];山东大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 赵慧娜;PDCD5、eIF4E、iNOS在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中的表达及临床意义[D];郑州大学;2015年
2 周新林;43例头部瘢痕鳞状细胞癌的回顾性分析[D];南华大学;2012年
3 姚磊;下咽鳞状细胞癌中Slit2的表达及其与微血管密度关系的临床研究[D];山东大学;2009年
4 吕佳宝;Skp2和p27~(kip1)在下咽鳞状细胞癌中的表达及其意义[D];福建医科大学;2010年
5 林树春;下咽鳞状细胞癌组织中△Np63和TAp63蛋白的表达及临床意义[D];福建医科大学;2006年
6 吴健;口腔黏膜鳞状细胞癌Pax9基因的表达及意义[D];吉林大学;2005年
7 李静;EGFR、C-erbB2及Ki-67在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中表达及意义的实验研究[D];山东大学;2007年
8 李羽;口腔多原发鳞状细胞癌p16、p53表达及相关性研究[D];南昌大学;2011年
9 李利红;EGFR,PRL-3在人鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中的表达及意义[D];郑州大学;2011年
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