收藏本站
《吉林大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

虫草菌原生质体的制备及诱变

江波  
【摘要】:冬虫夏草是名贵中药,主要生长在我国青海,现已证明它具有多种药效价值。但由于其生长条件苛刻,目前产量较低。 依据原生质体制备的要求,本实验用正交法探索了菌龄、渗透压稳定剂、酶液组成和作用时间对虫草菌原生质体制备的影响,筛选出用浓度均为1%的溶菌酶和纤维素酶混合液,以甘露醇为渗透压稳定剂,对菌龄为4天的虫草菌作用3小时效果最佳。 将最佳条件下制备的原生质体分别进行紫外和NTG诱变剂诱变,以期得到高产菌株。紫外诱变分别选择了10s、15s、20s、25s和30s五个时间下进行诱变,结果表明25s为最佳诱变时间。选择不同浓度,作用时间的NTG进行诱变,再将各条件下制备的诱变体提取甘露醇,用比色法测量甘露醇含量,以此为标准筛选出最佳菌种。最终得以0.2mg/mlNTG作用15min所得菌种甘露醇含量最高,为33.9%。将甘露醇含量较高的突变株经传代培养,甘露醇含量稳定。 以青海产天然冬虫夏草为标准实验材料,对紫外诱变和NTG诱变的菌丝体分别进行有效成分的测定——虫草素、虫草酸、虫草多糖及氨基酸含量。检测结果表明,在相同的条件下: 1、天然冬虫夏草的虫草素含量为0.038%,紫外诱变后含虫草素为0.053%,NTG诱变后含虫草酸为0.068%; 2、天然冬虫夏草的虫草酸含量为6.35%,紫外诱变后含虫草酸5.97%,NTG诱变后含虫草酸6.81%; 3、紫外诱变虫草菌丝体(8.41%)和NTG诱变虫草菌丝体(9.08%)与天然冬虫夏草(8.92%)中多糖含量基本相近; 天然冬虫夏草的氨基酸总含量为259.87mg/g,紫外诱变后氨基酸总含量为232.96mg/g,NTG诱变后氨基酸总含量为257.67mg/g。 WP=61 以上结果表明,人工诱变所得虫草菌丝体虫草素、虫草酸、虫草多糖均高于天然冬虫夏草,氨基酸含量与天然虫草含量相当。而且NTG诱变所得虫草菌丝体虫草素、虫草酸、虫草多糖和氨基酸含量又高于紫外诱变所得虫草菌丝体,由此证明NTG诱变的虫草,缩短了虫草的生长周期,降低生产成本,而且可以作为天然虫草的替代品入药应用。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:TQ461

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 邹莉;孟雪;李绍鹏;;难栽培食用菌原生质体融合技术研究进展[J];黑龙江农业科学;2006年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 孟雪;松口蘑菌种的分离、纯化、鉴定及原生质体制备的研究[D];东北林业大学;2006年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 俞宙,何建新;冬虫夏草水提液对触发性心律失常的治疗作用[J];中国医药学报;1999年01期
2 徐曦,陈国桢;冬虫夏草对免疫及造血功能影响的实验研究[J];湖南医学;1995年04期
3 廖洪军,陈香美,黎磊石;冬虫夏草对大鼠缺血性急性肾功能衰竭治疗作用的初步实验观察[J];军医进修学院学报;1995年01期
4 靖大道,邱德凯,萧树东,曾民德;虫草多糖对人外周血IL-2、IL-ZR及IFN-γ调节作用的研究[J];上海免疫学杂志;1995年06期
5 沈晓云,李兆兰,田军;冬虫夏草与虫草菌丝有效成分分析比较[J];山西大学学报(自然科学版);1998年01期
6 王根维,唐仕川,陈向伟;冬虫夏草水提物对巨噬细胞吞噬功能的实验研究[J];山西医科大学学报;2000年01期
7 葛新,白小红,李云兰;分光光度法测定蛹草D-甘露醇的含量[J];山西医科大学学报;2001年04期
8 许建明,丁长海,李连德,梅俏,李春如,樊美珍;冬虫夏草多糖保护小鼠免疫性肝损伤的筛选研究[J];安徽医科大学学报;1999年03期
9 吴淦桐,赵明珠,徐端正;虫草多糖脂质体对小鼠肝损伤的保护作用[J];中成药;1995年02期
10 李雪芹,包天桐,王雁;比色法测定冬虫夏草中甘露醇的含量[J];中草药;1999年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 徐天惠;刘强;;黄山非褶菌目真菌的初步研究[J];安徽大学学报(自然科学版);1989年01期
2 余应建;;一株撑绿杂交竹内生菌的分离鉴定及主要培养特性研究[J];安徽农学通报;2008年17期
3 许新玉;何德;;华山松孢锈病研究概述[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年21期
4 刘天学;朱自学;;一种大型野生真菌子实体解剖学和可食性研究[J];安徽农业科学;2006年10期
5 李守勉;李明;邢蕾;王俊玲;张殿生;;食用菌原生质体技术应用的研究[J];安徽农业科学;2007年25期
6 肖春玲;贺晖;廖信军;邹小明;李晓红;;井冈山植物根际土壤微生物的初步研究[J];安徽农业科学;2008年08期
7 樊有赋;甘金莲;陈晔;彭琴;詹寿发;;药用蕨类植物狗脊内生真菌的初步研究[J];安徽农业科学;2008年09期
8 廖春丽;方改霞;王莲哲;王国贞;万亚涛;;蛹虫草主要有效成分分析[J];安徽农业科学;2008年12期
9 曹晋静;康冀川;何劲;莫莉;苏昊;;喜树根际和内生真菌多样性研究[J];安徽农业科学;2009年05期
10 王迎春;李春华;王云;唐晓波;;茶园叶面真菌与茶云纹叶枯病原菌的互作关系研究[J];安徽农业科学;2009年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 卢宗荣;田文利;樊艾;;云南松毛虫天敌的初步研究[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(三)[C];2007年
2 肖晶晶;郭萍;田云龙;于江;朱昌雄;;不同腐植酸原料中的微生物分离与鉴定[A];第六届全国绿色环保肥料新技术、新产品交流会论文集[C];2006年
3 王迎春;李春华;王云;唐晓波;;茶园叶面真菌与茶云纹叶枯病原菌的互作关系研究[A];中国茶叶科技创新与产业发展学术研讨会论文集[C];2009年
4 战琳;杨晓彤;;药用真菌抗癌生物活性肽的研究进展[A];首届海峡两岸食(药)用菌学术研讨会论文集[C];2005年
5 陈晔;樊有赋;彭琴;刘瑜琦;罗敏;李军;;银杏内生真菌Ⅳ——银杏不同生长期内生真菌的分布[A];中国菌物学会第二届青年菌物学术讨论会论文集[C];2006年
6 詹寿发;甘金莲;樊有赋;彭琴;陈晔;;凤尾蕨内生真菌的研究Ⅰ——菌种分离及其分类鉴定[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
7 陈晔;樊有赋;甘金莲;彭琴;詹寿发;;药用蕨类植物狗脊内生真菌的初步研究[A];2008全国药用真菌学术研讨会论文集[C];2008年
8 桂仲争;朱雅红;;蛹虫草的人工培育、有效成分及其药理作用[A];2008全国药用真菌学术研讨会论文集[C];2008年
9 田贞乐;徐春花;郑惠华;吴伟杰;陈锷;陈国良;;HPLC-RID法测定虫草菌丝体中甘露醇[A];第九届全国食用菌学术研讨会论文集[C];2010年
10 韦继光;秦武鸣;黄勇;潘秀湖;;广西相思树病虫害调查与防治[A];植物保护与现代农业——中国植物保护学会2007年学术年会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈宏伟;蛹拟青霉对三种重要微量元素的有机转化及有机转化物的功能研究[D];安徽农业大学;2010年
2 李蓉;一种新型虫草生物学及其活性物质的研究[D];中国海洋大学;2009年
3 那坤;柔肝颗粒对肝纤维化大鼠TGF-β_1/Smads信号转导通路的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年
4 鄢小宁;利用黄瓜幼苗内生真菌种子处理防治南方根结线虫的研究[D];浙江大学;2010年
5 赵冰洁;加味达原饮对急性肝损伤湿邪内蕴证模型大鼠的治疗作用研究[D];成都中医药大学;2011年
6 孙丽娟;Withanolide类成分的活性筛选及抗自身免疫性疾病的实验研究[D];华东理工大学;2011年
7 王绪霞;苎麻炭疽病菌的分离鉴定及抗病基因文库的构建[D];华中农业大学;2011年
8 游崇娟;中国鞘锈菌的分类学和分子系统发育研究[D];北京林业大学;2012年
9 王志娟;东北主要非褶菌和木生伞菌培养特性及分类研究[D];东北林业大学;2001年
10 刘学耀;尿毒清胶囊治疗慢性肾功能衰竭及对一氧化氮和血浆内皮素水平的影响[D];广州中医药大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘兰杰;一株热带假丝酵母利用木糖生长及其产酒精特性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 宋鸽;抗甲醛微生物的分离鉴定及其相关基因的克隆[D];哈尔滨师范大学;2010年
3 吴良庆;砀山梨炭疽病菌鉴定及有效药剂筛选[D];安徽农业大学;2010年
4 刘芳;栲属植物生斑痣盘菌目的分类和皮下盘菌种内遗传多样性的ITS序列分析[D];安徽农业大学;2010年
5 杨中周;万佛山国家森林公园斑痣盘菌科的种群结构研究及散斑壳属两近似种的分子确认[D];安徽农业大学;2010年
6 刘伟;海洋小链霉菌DY2741菌株抗菌活性物质的初步研究[D];安徽农业大学;2010年
7 蔡锐;中药加味四逆散对血吸虫病小鼠肝纤维化治疗作用的实验研究[D];湖南中医药大学;2010年
8 李晓林;海参虫草复剂对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制的研究[D];中国海洋大学;2010年
9 黄亚鹏;肾素—血管紧张素系统在大鼠肝纤维化形成过程中的动态变化及桃核参术汤的干预作用[D];浙江中医药大学;2010年
10 刘松灿;肝康颗粒对免疫性肝损伤模型小鼠CD_4~+、CD_8~+、IL-12及IFN-γ的影响[D];河南中医学院;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨民和,刘咏梅,杨新美,陈立国;松茸的菌丝分离及纯培养研究[J];华中农业大学学报;1997年03期
2 刘振钦,高勇秀,王子权;松茸菌丝体分离培养研究初报[J];吉林农业大学学报;1989年02期
3 李刚,李宝健;灵芝原生质体分离与再生研究[J];菌物系统;1999年01期
4 邱龙新;食用菌原生质体技术研究现状[J];龙岩师专学报;2002年06期
5 王淑珍,白晨,高雁,范俊,杨家峰,杨英杰;松茸与香菇原生质体融合的研究[J];食用菌;2003年02期
6 王淑珍,白晨,高雁,范俊,杨家峰,杨英杰;松茸与香菇原生质体融合子生物学特性的研究[J];食用菌;2003年03期
7 全雪丽;傅伟杰;吴基日;;长白山区松口蘑与栎松口蘑子实体解剖学研究[J];食用菌;2006年02期
8 沙涛,张汉波,丁骅孙,程立忠,周帼萍,陈虹颖,朱宏;松茸菌丝原生质体形成与再生条件的研究[J];生物技术;2001年02期
9 曹文芩,郭顺星,徐锦堂;大型真菌原生质体融合技术研究进展[J];生物学通报;1998年10期
10 谭伟;松口蘑栽培理论及方法[J];食用菌学报;1994年01期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 陈晓琳;两种虫草无性型原生质体融合及蜂头虫草发酵条件的研究[D];安徽农业大学;2001年
2 魏铁铮;松口蘑纯培养及其发生地土壤微生态的研究[D];延边大学;2001年
3 牛艳芳;蒙古口蘑与双孢蘑菇原生质体融合育种研究[D];内蒙古师范大学;2004年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 胡开辉;刘建忠;孙淑静;饶榆平;陈明祥;张俊兰;肖雅敏;熊芳;;斑玉蕈育种中漆酶转化体系建立的初步研究[J];菌物学报;2010年04期
2 华宝珍;马成杰;罗玲泉;;现代生物技术在食品工业中的应用研究进展[J];江西农业学报;2009年05期
3 李晓静;黄丽萍;刘建忠;孙淑静;胡开辉;;真姬菇与凤尾菇融合菌株筛选鉴定及营养成分分析[J];中国农学通报;2011年22期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 吴飞;真姬菇品种改良及其相关性研究[D];福建农林大学;2011年
2 王义;亚侧耳生物学特性及与松口蘑原生质体融合的研究[D];东北林业大学;2009年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 金永日,张甲生,何玲,马冰如,苑贵华,谷恒生,陈丹,李景洛,梁曼逸,李崇靖;蚕蛹虫草和冬虫夏草中D—甘露醇的分析[J];白求恩医科大学学报;1992年01期
2 李毓,陈国桢,蒋德昭,张自强,陈国林;冬虫夏草对小鼠红系造血机能的影响[J];湖南医科大学学报;1990年01期
3 徐仁和,陈国桢;冬虫夏草对小鼠造血干细胞的影响[J];湖南医科大学学报;1990年01期
4 康四清,邹肇娥,王化远,邱永梅;荧光探剂在生命科学中的应用[J];华西药学杂志;1996年01期
5 陈道明,张淑兰,李政年,程振球,刘晓平;冬虫夏草及其菌丝体对小鼠巨噬细胞系统和免疫功能的影响[J];解放军医学杂志;1984年04期
6 李兆兰;;中国弯颈霉新种及产环孢菌素的研究[J];真菌学报;1988年02期
7 许志勤,高兰兴;组织羟脯氨酸测定方法的改进[J];解放军预防医学杂志;1990年01期
8 季健平;吴再彬;刘歧山;张运生;叶铭;李明举;;超氧化物岐化酶超微量快速测定法[J];南京铁道医学院学报;1991年01期
9 彭国平,李红阳,袁永泰;冬虫夏草与人工蛹虫草的成分比较[J];南京中医药大学学报;1996年05期
10 张传开,袁盛榕;冬虫夏草及其人工菌丝的免疫药理学研究进展[J];首都医科大学学报;1997年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周菁,周健明,陈孝康,盛祖嘉;绛红色小单孢菌丝和孢子诱变效应的比较[J];中国抗生素杂志;1987年06期
2 吴红宇,彭友良,郑应华;新型杀虫剂Spinosad产生菌株的诱变选育[J];农药;2003年07期
3 朱宝成,成亚利,李庆余,王俊刚,赵素瑛,史静,李良生;青霉素生产菌原生质体诱变选育[J];中国抗生素杂志;1994年06期
4 徐鑫成;吐温-80对紫露草微核的诱变检测[J];黑龙江农垦师专学报;1999年04期
5 冯建成,崔贞华,尹姣,曾洁莉,杨艳燕;透明质酸产生菌的紫外诱变及摇瓶条件的优化[J];湖北大学学报(自然科学版);2005年01期
6 景晓辉,王之婉;诱变温特曲霉转富马酸为L-苹果酸的研究[J];化学世界;2005年08期
7 董静,孟宪军,郑艳,牛广财;复合诱变对米曲霉2336产酸量的影响[J];食品与发酵工业;2005年09期
8 吴瑜;许明耀;陈飞明;胡毓华;王守国;;等离子体喷枪氩等离子体处理苎麻脱胶菌引发诱变的重复性实验(英文)[J];武汉科技学院学报;2008年05期
9 朱丕基;杨长海;张国军;王喜章;;提高黑曲霉糖化酶活力的研究——Ⅱ 浓醪发酵技术[J];辽宁食品与发酵;1998年04期
10 王战勇,张洪林,陈珊;降解聚β-羟基丁酸菌株的诱变育种[J];抚顺石油学院学报;2001年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨大荣;;我国虫草资源的合理利用与保护[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第二卷)[C];1991年
2 王薇;王利丽;王青龙;李迪强;茆灿泉;;虫草ITS基因指纹及生信分析[A];首届中国蕈菌与健康高峰论坛论文集[C];2010年
3 韩玉梅;金莹;李安娜;丁爱云;;两株泰山蝉虫草菌的28S rDNA序列比对及其对黄粉虫的侵染性研究[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
4 李用芳;何方淑;李大卫;李景原;李金婷;;不同培养基培养虫草子座研究简报[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第四卷)[C];1996年
5 孙一晟;许勤勤;李永泉;;囊菌虫草的活性成分分析[A];2010年第四届全国微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2010年
6 黄罗冬;索菲娅;虞泓;代永东;龚健;;基于ITS和18S序列对新疆一种虫草的分类鉴定[A];2011年全国系统与进化植物学暨第十届青年学术研讨会论文集[C];2011年
7 杨跃雄;杨大荣;舒畅;李朝达;;虫草菌的聚丙烯酰胺蛋白质凝胶电泳研究[A];中国虫生真菌研究与应用[C];1991年
8 杨荣玲;刘学铭;;巴西虫草菌液体培养条件的优化及其营养成份分析[A];广东省食品学会第六次会员大会暨学术研讨会论文集[C];2012年
9 陈维霞;张伟云;;虫草菌菌丝体多糖对小鼠巨噬细胞功能的调节作用[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
10 李春如;;近十年虫草无性型研究进展[A];《中国虫生真菌研究与应用》(第五卷)[C];2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;平邑成功培育出蒙山虫草菌[N];山东科技报;2009年
2 何文;几种有开发价值的虫草菌[N];云南科技报;2002年
3 何文;几种有开发价值的虫草菌[N];中国特产报;2002年
4 真先;福建首创“离子轰击诱变”技术[N];中国渔业报;2010年
5 记者白剑峰;我国培育成功水培诱变花卉[N];人民日报;2003年
6 常药师;虫草,非虫非草[N];医药经济报;2004年
7 郑亚平;虫草的种类[N];中国特产报;2000年
8 马宗文 张道桢;生物技术发展史上的里程碑[N];农民日报;2003年
9 本报深度报道组记者 谈洁;“我原本是个地道农民”[N];南京日报;2008年
10 记者 李荣;院士质疑“太空育种”:请拿数据说话[N];新华每日电讯;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李蓉;一种新型虫草生物学及其活性物质的研究[D];中国海洋大学;2009年
2 李正红;地锦与五叶地锦种质创新研究[D];中国林业科学研究院;2005年
3 湛雪辉;微生物絮凝剂MBFXH的制备及其性能研究[D];中南大学;2004年
4 谷运红;离子束诱变和介导转化在拟南芥中的应用[D];郑州大学;2003年
5 韩蕾;太空环境对草地早熟禾的诱变效应及其诱成突变体的生物学变化[D];中国林业科学研究院;2005年
6 丛延广;弗氏枸椽酸杆菌群集运动的分子机制研究[D];第三军医大学;2004年
7 田小群;红发夫酵母(Phaffia rhodozyma)的诱变和原生质体融合及发酵优化研究[D];华南理工大学;2003年
8 李羿;茯苓优良菌种的选育、保藏和液体发酵的研究[D];成都中医药大学;2005年
9 赵永强;人工发酵虫草菌醇提取物CsB-851对实验性兔腹主动脉血栓形成的抑制作用[D];中国协和医科大学;1989年
10 路福平;无抗菌活性放线菌的激活和抗生素筛选新方法的研究[D];华南理工大学;1996年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 江波;虫草菌原生质体的制备及诱变[D];吉林大学;2004年
2 赵品苍;泰山虫草多基因分子系统学研究[D];曲阜师范大学;2012年
3 王进;糖蜜酒精废液回用与发酵酵母菌种选育的研究[D];广西大学;2004年
4 曾俊华;微生物转化法生产S-腺苷-L-蛋氨酸的研究[D];天津科技大学;2005年
5 王卫东;离子束诱变和介导转外源DNA小麦初步研究[D];郑州大学;2001年
6 杨晓忠;Z市某综合卫生填埋场垃圾渗滤液有机污染及其遗传毒性的研究[D];山东大学;2006年
7 穆云龙;子囊霉素菌种选育及发酵条件初步研究[D];昆明理工大学;2008年
8 赵世敏;微生物发酵法生产2,3-丁二醇[D];江南大学;2008年
9 熊明勇;L-缬氨酸产生菌的选育及其发酵条件研究[D];天津科技大学;2002年
10 徐广伟;康氏木霉的诱变、选育及纤维素酶的初步分离纯化[D];吉林大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026