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《吉林大学》 2003年
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缝裂层孔菌抗肿瘤作用的实验研究

刘妍  
【摘要】:恶性肿瘤是威胁人类生命的主要疾病之一,传统的治疗手段和药物对某些恶性肿瘤的治疗效果并不理想,寻找新的高效抗肿瘤药物成为当务之急。肿瘤细胞生物学及分子生物学的研究进展,为中药抗肿瘤研究提供了新的思路及方法。中医药抗肿瘤治疗和研究强调高效、实用、综合、全面。从拾遗补缺开始,向综合全面发展。可以预言,新千年初期的10年中,中医药抗肿瘤研究将呈现越来越热的局面。中医药在抗肿瘤治疗中的作用和地位也将逐步明确。缝裂层孔菌(Phellinus linteus, PL)是一种高等真菌,属多孔菌科针层孔菌,是目前公认的珍贵食用菌和重要药材。缝裂层孔菌具有多种药理作用, 对机体免疫力呈双向调节作用,可提高癌症患者的免疫力,同时也能改善糖尿病患者和自身免疫性疾病患者的免疫机能异常状况; 抑制肿瘤细胞增殖与转移,发挥抗癌作用; 强化肝脏机能; 帮助胃肠道功能恢复,用于治疗消化系统疾病;利尿作用,治疗腹水;抗氧化作用(即SOD样作用); 抑制炎症反应; 解毒作用,如酒精性中毒。此外还有降血糖降血压等作用。我们对从缝裂层孔菌中提取、分离出的缝裂层孔菌多糖就其抗肿瘤及减毒增效作用进行实验研究,并从肿瘤免疫角度初步探讨其抗肿瘤作用机制。 1.缝裂层孔菌体内抑瘤实验 通过建立小鼠胃癌MFC、肝癌H22及肉瘤S180体内移植性肿瘤模型,观察缝裂层孔菌对小鼠MFC、H22、S180的抑瘤作用。结果表明,缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg三个剂量组对小鼠MFC移植性肿瘤的生长有抑制作用,重复三次实验,平均抑瘤率分别为30.46%、35.08%、42.84%;缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg三个剂量组对小鼠H22移植性肿瘤的生长有抑制作用,重复三次实验,平均抑瘤率分别为36.30%、37.62%、44.71%;缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg三个剂量组对小鼠S180移植性肿瘤的生 WP=47 长有抑制作用,重复三次实验,平均抑瘤率分别为28.98%、36.60%、46.36%。同时缝裂层孔菌对荷瘤小鼠体重增长没有明显影响。 2.缝裂层孔菌对腹水型荷瘤小鼠生存期的影响 通过腹腔注射EAC建立荷瘤小鼠模型,连续灌胃给予缝裂层孔菌0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg三个剂量14天后停药,观察小鼠生存时间。结果表明,缝裂层孔菌可延长艾氏腹水癌(EAC)荷瘤小鼠生存期,重复三次实验,平均生命延长率为31.69%、41.34%、51.87%。 3.缝裂层孔菌减毒增效作用 3.1缝裂层孔菌的增效作用 用小鼠胃癌MFC建立小鼠体内移植性肿瘤模型,观察缝裂层孔菌对CTX的抗癌增效作用。结果表明,缝裂层孔菌对CTX治疗小鼠胃癌MFC具有增效作用。CTX 5mg/kg剂量组治疗MFC抑瘤率为40.27%,而加用缝裂层孔菌0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg实验组抑瘤率分别为58.29%、58.47%、61.82%;CTX 10mg/kg剂量组治疗MFC抑瘤率为44.81%,而加用缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg实验组抑瘤率分别为62.76%、62.90%、64.75%;CTX 15mg/kg剂量组治疗MFC抑瘤率为51.47%,而加用缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg实验组抑瘤率分别为64.94%、65.30%、67.22%;CTX 20mg/kg剂量组治疗MFC抑瘤率为61.88%,而加用缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg实验组抑瘤率分别为77.60%、78.45%、80.94%; 以上结果表明,缝裂层孔菌分别与CTX联合应用可以提高抑瘤率,增强治疗效果,而且缝裂层孔菌与CTX联合用药优于CTX单纯用药,增效作用明显。 3.2缝裂层孔菌的减毒作用 在小鼠胃癌MFC肿瘤模型中,CTX 20mg/kg剂量组抑瘤作用同时白细胞数明显下降,有些小鼠在停药前就已经死亡。缝裂层孔菌与CTX合用可对 WP=48 此起保护作用,对抗白细胞下降,降低荷瘤小鼠死亡率,减轻CTX的毒性。 4.缝裂层孔菌的体外抑瘤作用 离体条件下,缝裂层孔菌在250μg/ml~0.025μg/ml剂量之间对MFC及S180肿瘤细胞无直接杀伤作用。 5.缝裂层孔菌对小鼠免疫功能的影响 5.1缝裂层孔菌对淋巴细胞活性的影响 用MTT法检测有丝分裂原ConA体外刺激小鼠T淋巴细胞增殖反 应。结果表明缝裂层孔菌有提高T淋巴细胞转化的能力。250μg/mL 、25μg/mL、2.5μg /mL 、0.25μg /mL四个剂量组脾细胞对ConA的反应明显高于对照组和CTX组。 5.2缝裂层孔菌对荷瘤小鼠TNF-α的影响 连续灌胃缝裂层孔菌 10天后处死小鼠,取血清,用ELISA检测荷瘤小鼠产生TNF-α的能力。结果表明,缝裂层孔菌 0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg三个剂量组对荷瘤小鼠产生TNF-α的能力较荷瘤小鼠对照组明显降低,而阳性对照CTX组TNF-α的产生水平明显高于给药组。 5.3缝裂层孔菌对荷瘤小鼠IL-2活性的影响 连续灌胃缝裂层孔菌10天后处死小鼠,取血清,用ELISA检测荷瘤小鼠产生IL-2的能力。结果表明,缝裂层孔菌0.5g/kg、1.0g/kg、2.0g/kg三个剂量组对荷瘤小鼠产生IL-2的能力较荷瘤小鼠对照组和CTX组明显提高,而阳性对照CTX组IL-2的产生水平明显低于给药组。 综上所述,缝裂层孔菌具有良好的抗肿瘤作用,并能对其他化疗药物(CTX)起到减毒增效的作用,而且缝裂层孔菌本身安全无毒,是值得我们深入开发的一种新型抗癌药。本研究认为缝裂层孔菌是通过免疫调节的途径实现抗肿瘤作用的?
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R73-3

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【参考文献】
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