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《吉林大学》 2005年
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马铃薯转FMDV P1全长基因的研究

李景文  
【摘要】:口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种烈性家畜传染病,为了制备安全、有效的新型基因工程疫苗,人们积极探索FMDV转基因植物的研究,研究结果表明用植物表达系统生产安全有效的口蹄疫口服疫苗是完全可行的。 本实验室已构建了FMDV P1全长基因的高效植物表达载体并用于转化马铃薯。本研究在此基础上,寻找影响口蹄疫基因在马铃薯中高效表达的主要因子,对抗性筛选标记和抑制剂进行浓度筛选试验,对不同的马铃薯品种材料确定适宜的预培养时间、农杆菌载体、农杆菌菌液浓度及侵染时间,建立了比较完善的遗传转化体系。 通过农杆菌介导法与基因枪法对2 个马铃薯品种和3 种马铃薯外植体进行遗传转化,对获得的抗性苗应用PCR、PCR-Southern、Southern杂交、斑点杂交等技术进行检测,得到了转目的基因马铃薯阳性植株,表明已将FMDV P1 全长基因导入马铃薯中。对阳性植株进行 SDS-PAGE 实验,初步推断FMDV P1 全长基因在马铃薯中进行了表达。FMDV P1 全长基因转化马铃薯阳性苗的获得以及目的基因的有效表达,为用马铃薯作为生物反应器生产口蹄疫病毒疫苗提供了理论依据,为研制开发新型基因工程药物奠定了基础。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S532

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