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《吉林大学》 2005年
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乳腺成体干细胞体外分离、培养、鉴定及乳腺癌细胞模型的构建

王英超  
【摘要】:体外分离、培养、鉴定乳腺成体干细胞,通过电离辐射及雌激素作用诱导细胞发生癌变,从而构建乳腺癌的细胞模型,研究乳腺癌的发病机制。 本课题用免疫磁珠的分离方法,从乳腺癌癌旁正常组织中分离了乳腺上皮细胞:腺泡上皮细胞和肌上皮细胞。其中腺泡上皮细胞在体外培养可以向肌上皮细胞转变,可以形成乳腺终末导管结构,通过免疫组化及免疫印记杂交的方法检测其抗原的表达。发现其表达乳腺上皮细胞特异性抗原和细胞角质素19。通过脂质体转染的方法向腺泡上皮细胞内转导SV40,经端粒酶重复序列扩增法检测,细胞表达端粒酶活性,并可以多次传代不死,获得了永生化,通过RT-PCR 及免疫组化的方法未检测C-myc 基因和P53,C-erbB-2 蛋白的表达,细胞的性质无明显变化。 腺泡上皮细胞在体外通过电离辐射和雌激素的作用,发生癌变。检测其细胞形态变化,表面标记物,侵袭性,BRCA1和BRCA2基因及在裸鼠体内生长等情况,从而构建乳腺癌的初步细胞模型,为乳腺癌的病因研究,药物治疗奠定基础。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R737.9

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