收藏本站
《吉林大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

新型DNA聚合酶的基因工程改造及应用研究

盛彦敏  
【摘要】:聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction PCR)是一种模拟DNA聚合酶在体内的催化作用,在体外快速扩增特定DNA片段的技术,是现代分子生物学最重要的手段之一。1985年美国Cetus公司人类遗传部的KaryMullis等利用Klenow DNA聚合酶建立了该项技术。此项技术一经问世就因其操作简便、快速、灵敏度高、特异性强和对样品的耐受性好等优点迅速在与生物学相关的学科领域得到广泛应用,并不断发展和完善。 聚合酶链式反应存在扩增产物的忠实性和可扩增产物的大小两个主要限制因素,二者均对PCR效率有较大的影响,而影响上述两因素的关键是催化PCR反应的聚合酶。 早期应用于PCR的DNA聚合酶是Klenow片段,其缺点是在60℃时很快就失活,故每一轮PCR都需要追加Klenow DNA聚合酶,使PCR过程繁琐而复杂,因而限制了PCR技术的发展。 Taq DNA聚合酶是第一个应用于PCR技术的热稳定DNA聚合酶,该酶的引入使得PCR过程实现了自动化,但是Taq酶的一个重要缺陷是没有3′-5′核酸外切酶活性,在PCR反应过程中不能切除错误参入的单核苷酸,故不能很好保证其扩增产物的忠实性。 在发现Taq DNA聚合酶之后,人们又陆续发现了Vent、Deep、Pfu、
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:Q789

手机知网App
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张秀华;王文锋;;微卫星DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术的探讨[J];山东农业科学;2009年06期
2 罗佶;伍贤进;彭帅;刘选明;;翻白草总DNA的提取与ISSR-PCR体系的建立与优化[J];安徽农业科学;2008年03期
3 郑阳霞;李焕秀;严泽生;;RACE技术及其在植物基因研究中的应用[J];安徽农业科学;2008年07期
4 张金洲;项智锋;王清华;李学斌;赵海涛;张廷虎;郭玉娇;;利用RAPD标签分析3种鲤科鱼群体的遗传变异[J];安徽农业科学;2008年23期
5 王豪;孙晓红;;利用PCR技术快速检测水产品中副溶血性弧菌[J];安徽农业科学;2009年15期
6 徐亚维;王丕武;柴晓杰;;玉米淀粉分支酶sbeⅡb基因启动子的克隆与特异表达[J];安徽农业科学;2010年36期
7 王东生,袁肇凯,黄献平,谢梦洲,卢芳国,殷文学;冠心病痰瘀辨证与外周血单核细胞PDGF-A mRNA表达的关系[J];安徽中医学院学报;2003年02期
8 周向东,蔡文琴;芳香化酶P450 mRNA在肺癌和胚胎肺组织中的表达及其意义[J];癌症;2000年10期
9 施宗高,许良中,药锦娟,杨文涛,朱伟萍;PCR克隆技术构建抑癌基因NOEY2真核表达载体[J];癌症;2001年01期
10 王孝养,张珍祥,徐永健,何敏,陈仕新,方慧娟;肺癌组织端粒酶亚基的表达及与端粒酶活性的关系[J];癌症;2001年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 阮怀珍;李希成;蔡文琴;黎海蒂;;P物质和生长抑素在疼痛中的作用及机理[A];生命科学与生物技术:中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
2 王瑞娟;彭瑞云;高亚兵;徐新萍;常公民;马俊杰;李杨;王水明;王晓民;;AIF,Bax和Bcl-2在中子及γ射线照射致肠道损伤中的表达[A];第十二届中国体视学与图像分析学术会议论文集[C];2008年
3 杨素丽;明军;刘春;穆鼎;李名扬;;百合SSR反应体系的优化[A];中国园艺学会球根花卉分会2008年会暨球根花卉产业发展研讨会论文集[C];2008年
4 张书环;杨俊兴;晁彦杰;颜邦芬;吴波;曹莎;陈颖钰;谭亚娣;陈焕春;郭爱珍;;牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和初步运用[A];中国奶牛协会2007年会论文集(上册)[C];2007年
5 杨桂梅;高洪;徐自忠;花群义;周晓黎;;水泡性口炎病毒和牛病毒性腹泻病毒的检测方法研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
6 成子强;赵振华;张利;张二芹;高娃;;J亚群白血病病理学观察及抗原定位[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会鸡淋巴白血病防控技术研讨会论文集[C];2010年
7 宋小白;韩涛;曾令坤;韩忠燕;凌泽继;李瑞明;秦津;;两种免疫组化方法对催产素在下丘脑分布的测定影响[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
8 王金玲;张莹;王芳;初小辉;李俊环;贾金生;庞杰;;饲料中鸡源性成分PCR-DHPLC检测技术的建立[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
9 刘宜存;董联合;王建伟;;某中小型猪场猪瘟野毒感染的净化及评估[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论文集[C];2010年
10 黄震;王望九;胡德宝;;中药复方治疗免疫性不育症的机制探讨[A];新编男科理论与临床——中华中医药学会第七届中医男科学术大会;全国中医男科临床与科研方法高级研修班;2006年云南省中医男科诊疗技术培训班讲义与论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 毛慧娟;新型血液净化方式治疗多器官功能障碍综合征及其对免疫功能影响的实验和临床研究[D];南京医科大学;2009年
2 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
3 赵珺;高温热应激环境对雄性小鼠生殖机能影响及其分子机理的研究[D];东北师范大学;2010年
4 林美娟;茶尺蠖小RNA病毒RNA依赖的RNA聚合酶功能研究及全长cDNA克隆构建[D];武汉大学;2009年
5 王越;渗透压补偿性溶质ECTOINE对酶稳定性影响的研究[D];大连海事大学;2011年
6 周仕轶;肿节风对人前列腺癌DU-145细胞PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的影响[D];成都中医药大学;2011年
7 王林;姜黄素对人前列腺癌DU-145细胞TGF-β/Smads信号传导通路的影响[D];成都中医药大学;2011年
8 徐萌杰;enJSRV及其受体HYAL2在蒙古绵羊子宫和胚胎中的表达与定位[D];内蒙古农业大学;2011年
9 刘红;版纳病毒全基因组序列特征及其分子进化研究[D];中国疾病预防控制中心;2011年
10 陈德芳;斑点叉尾鮰海豚链球菌病病原学、病理学和诊断方法研究[D];四川农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 丁烨;骨髓间充质干细胞对白血病细胞生长影响的研究[D];南京医科大学;2009年
2 王正茂;单纯疱疹病毒糖蛋白哺乳动物细胞表达系的建立、纯化鉴定及免疫原性分析[D];南京医科大学;2010年
3 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
4 于丽萍;玉米种子胚特异性启动子emb5的功能分析[D];山东农业大学;2010年
5 王卫杰;食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7和鼠伤寒沙门氏菌同时快速检测方法的研究[D];山东农业大学;2010年
6 邱波;血管瘤型J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达[D];山东农业大学;2010年
7 孙翠;核桃(Juglans regia L.)坚果仁维生素E含量分析及jrMPBQ基因克隆[D];山东农业大学;2010年
8 姚雪静;PRRSV安徽株的分离鉴定及感染仔猪病理学的研究[D];安徽农业大学;2010年
9 代鑫;海岛棉组培过程细胞形态特性与基因表达差异的研究[D];新疆农业大学;2010年
10 李超;新疆核桃种质资源遗传多样性分析[D];新疆农业大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 赵广荣;梁玲玲;刘春杰;祝琳琪;;邻近多位点基因突变的组合大引物PCR策略(英文)[J];中国生物工程杂志;2010年07期
2 唐愫;;基因工程法改造生物遗传物质的一个范例[J];科技通报;1985年03期
3 李尔炀;基因工程简介[J];江苏工业学院学报;1993年Z1期
4 孙毅;;转基因动物的研究现状及展望[J];科技情报开发与经济;2006年01期
5 杨学明;江林源;蒋和生;;水生动物抗菌肽及其基因工程研究[J];生物技术通讯;2006年01期
6 王文林;蔡开灿;王武军;;基因工程内皮细胞种植人工血管的研究进展[J];中国胸心血管外科临床杂志;2006年01期
7 孙毅;;人工种子的开发与应用研究进展[J];科技情报开发与经济;2006年05期
8 李赛男;;昆虫抗菌肽的研究进展[J];生命科学研究;2006年S3期
9 杨丰科;姜萍;李思东;王守满;;丝状真菌基因工程进展[J];氨基酸和生物资源;2009年01期
10 何秀苗;;生物技术专业《基因工程》课程教学探讨[J];安徽农学通报(下半月刊);2009年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李雅林;牛钟相;姜世金;常维山;;绿脓杆菌PA-SD-1株外毒素AⅢ区基因的克隆及序列分析[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年
2 丁卯章;;动物福利理论问题研究[A];林业、森林与野生动植物资源保护法制建设研究——2004年中国环境资源法学研讨会(年会)论文集(第二册)[C];2004年
3 邵鹏柱;余满堂;黄家乐;宗玉英;车镇涛;;应用5S rRNA基因鉴定川西獐芽菜和同属混淆品种(英文)[A];2006第六届中国药学会学术年会论文集[C];2006年
4 褚志义;;基因工程与医药创新(摘要)[A];上海市老科学技术工作者协会一、二、三届学术年会论文选集[C];2006年
5 张晓珍;钟建民;霍小春;余继英;;不明原因智力低下儿童脆性X综合征的筛查和基因诊断[A];第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)论文摘要汇编[C];2009年
6 励建安;;基因工程与康复医学[A];中国康复医学会全国运动疗法学术会议暨心脑血管病康复研讨班论文汇编[C];2000年
7 苏玉安;左鉴均;;股骨头坏死修复与重建基因工程-三活疗法探讨[A];中国骨伤发展战略高层论坛暨中西医结合骨伤学术大会论文集[C];2004年
8 张上隆;;植物类胡萝卜素的生物合成及其调控[A];张上隆果树学文选[C];2006年
9 张上隆;;类胡萝卜素合成的相关基因及其基因工程[A];张上隆果树学文选[C];2006年
10 李明魁;郭菊;张遂平;;抗菌肽的研究与应用[A];河南省畜牧兽医学会第七届理事会第二次会议暨2008年学术研讨会论文集[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 金永红;医院缺乏知识产权保护意识[N];健康报;2006年
2 金利;基因工程国家一类新药haFGF获证书[N];科技日报;2007年
3 记者 杨维忠 通讯员 吴延华;东阿阿胶推出溶栓基因工程药[N];中国知识产权报;2007年
4 海文;美探索基因工程治孤独症方法[N];中国医药报;2008年
5 本报记者 李远方;通威基因工程打造现代渔业样板[N];中国商报;2005年
6 徐敏;基因工程妙解中药资源“困境”[N];解放日报;2008年
7 宋张泽宇;我国基因工程药物领域又一新突破[N];大众科技报;2007年
8 贾士荣;基因工程——农业进步的助推器[N];中华合作时报;2002年
9 中国科学院动物研究所研究员 沈孝宙;关于GMO的对话[N];中国国门时报(中国出入境检验疫报);2001年
10 ;中国基因工程现状与展望[N];证券时报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 盛彦敏;新型DNA聚合酶的基因工程改造及应用研究[D];吉林大学;2005年
2 周雪艳;瑞替普酶(rPA)及其突变体的构建和在大肠杆菌与CHO细胞中的表达研究[D];吉林大学;2006年
3 刘荭;聚合酶链式反应和基因芯片技术的研究及在主要水生动物病毒检疫和监测中的应用[D];华中农业大学;2004年
4 赵梅生;真菌性眼内炎的实验研究[D];吉林大学;2006年
5 郑伟;中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究[D];吉林大学;2005年
6 陈洪武;基于基因工程的机械产品设计理论与技术研究[D];山东大学;2005年
7 王宏勤;原发性中枢神经系统淋巴瘤的临床病理、免疫表型和bcl-6基因重排研究[D];四川大学;2004年
8 唐月军;纳米增韧(HA-ZrO_2系)生物复合多孔陶瓷的制备及其颌骨缺损修复实验研究[D];第二军医大学;2006年
9 李志军;食品中生物胺及其产生菌株检测方法研究[D];中国海洋大学;2007年
10 陈杰;高密度培养盘基网柄菌及重组可溶性人Fas配体表达的研究[D];浙江大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨顺利;茶叶中β-葡萄糖苷酶基因cDNA克隆与序列分析[D];安徽农业大学;2003年
2 王宇平;扩张型心肌病与血小板活化因子乙酰水解酶基因的相关性研究[D];四川大学;2004年
3 王瑞;重组疟疾疫苗PfCP-2.9单克隆抗体的制备与特性分析[D];第二军医大学;2005年
4 宁召峰;奶牛酵母菌性乳房炎的快速诊断及其中药治疗效果的研究[D];山东农业大学;2005年
5 戴黎华;不同的DNA制备方法对单细胞PCR扩增率和ADO率影响的比较研究[D];江西医学院;2005年
6 王健;温氏附红细胞体对牛血液生化指标的影响及双抗体夹心ELISA、PCR诊断方法的建立[D];河北农业大学;2006年
7 郭盟华;重组人白细胞介素18表达质粒的构建、蛋白的表达和纯化研究[D];吉林大学;2006年
8 吕海沧;食品中五种主要的致病性弧菌的多重PCR检测方法研究[D];福建农林大学;2007年
9 刘宏;子宫内膜异位症患者ACE、AT1R基因多态性分析[D];河北医科大学;2008年
10 杨静红;免疫组化和PCR方法检测鹅细小病毒在感染雏鹅体内分布规律研究[D];东北农业大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026