收藏本站
《吉林大学》 2005年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

应用PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌

王韶  
【摘要】:致病微生物污染食品而引起的食物中毒是直接造成人体健康损害的主要食源性危害因素,而金黄色葡萄球菌肠毒素引起的中毒占整个细菌性食物中毒的首位,但目前尚缺乏理想的,特别是快速的检测方法,因此易造成实验室漏检和临床诊断的延误。本研究利用国家标准规定的方法(GB4789.10-2003)和PCR方法分别对采自吉林省9个地区的180份食品样品进行了检测,初步了解了我省食品中金黄色葡萄球菌的污染情况,并对两种监测方法进行了比较,以期找到一种更加快速、敏感、特异、理想的检验方法。实验结果表明,PCR方法检测出阳性样品为45份,阳性率25%,其中鱼和熟食的阳性率最高皆为40%,袋装牛奶未检出;国标法检测出阳性样品为42份,阳性率23.3%,其中散装牛奶的阳性率最高为37%,袋装牛奶和蔬菜均未检出。PCR检测法与国标法的阳性率无显著性差异(?2=3.0,P﹥0.05)。 本研究所建立的PCR方法是针对金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计的一对引物,该基因为金葡菌所特有并且具有较高的保守性,扩增的目的片段长度为422bp。在建立PCR方法的同时,优化了反应条件,并进行了敏感性试验和特异性试验。试验结果表明,该方法的检测极限为4.32pg的金黄色葡萄球菌DNA,具有较好的敏感性;本试验用蜡样芽孢杆菌、沙门氏菌等菌种检测PCR方法的特异性,结果表明,金黄色葡萄球菌特异的扩增出目的片段,其他菌种均呈阴性反应,具有较好的特异性。PCR方法可在24小时内完成,国标法需要4~7天,可见所建立的针对金黄色葡萄球菌nuc基因的PCR方法具有较好的敏感性和特异性,较国标法更快速简便。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R155.5

手机知网App
【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 易明梅;上海地区奶牛乳房炎主要致病菌分析及基因治疗初探[D];上海交通大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 吴斌,秦成,裴轶君,金凤燮;食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的快速检测方法[J];微生物学通报;2004年05期
2 高正琴,邢华,李厚达;PCR技术在检测鼠金黄色葡萄球菌中的应用研究[J];中国实验动物学报;2003年01期
3 陈靖,陈叶;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测金黄色葡萄球菌肠毒素[J];中国食用菌;1999年05期
4 吴雅儿;橙汁饮料中金黄色葡萄球菌的检测与研究[J];职业与健康;2000年11期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 龙军,陈清,俞守义;多重PCR检测金葡菌肠毒素基因型的研究[J];中国公共卫生;2003年12期
2 郑玉玲,雷祚荣;反向乳胶凝集法快速检测肉毒A、B型毒素[J];中国公共卫生;1996年01期
3 雷祚荣,郑玉玲,姜结根;PCR扩增试验快速检测金黄色葡萄球菌肠毒素A~E型基因的研究[J];中华微生物学和免疫学杂志;1997年05期
4 王东生,袁肇凯,黄献平,谢梦洲,卢芳国,殷文学;冠心病痰瘀辨证与外周血单核细胞PDGF-A mRNA表达的关系[J];安徽中医学院学报;2003年02期
5 施宗高,许良中,药锦娟,杨文涛,朱伟萍;PCR克隆技术构建抑癌基因NOEY2真核表达载体[J];癌症;2001年01期
6 王孝养,张珍祥,徐永健,何敏,陈仕新,方慧娟;肺癌组织端粒酶亚基的表达及与端粒酶活性的关系[J];癌症;2001年06期
7 张宏,肖文华,梁后杰;正反义人DNA(5-胞嘧啶)甲基转移酶基因片段真核表达载体的构建[J];癌症;2001年11期
8 洪桂云,陈宏权;牛SRY序列的体外扩增[J];安徽农业大学学报;2004年04期
9 程安春,汪铭书,刘菲,宋涌,袁桂萍,韩晓英,徐超,廖永洪,周伟光,文明,贾仁勇,陈孝跃;PCR在鸭瘟临床诊断和免疫及致病机理研究中的初步应用[J];病毒学报;2004年04期
10 吴彩云,蔡俊鹏,杨汝德,陈清,罗立新,吴后波,俞守义;双重PCR检测携带有tl和tdh基因的副溶血弧菌毒力菌株[J];水产科学;2004年05期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 蓝天;;彻底杀灭空调冷却塔军团菌的方案设想[A];中国工程建设标准化协会建筑给水排水专业委员会、中国土木工程学会水工业分会建筑给水排水委员会20周年庆典论文集[C];2007年
2 杨桂梅;高洪;徐自忠;花群义;周晓黎;;水泡性口炎病毒和牛病毒性腹泻病毒的检测方法研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王昌源;多房棘球绦虫亚单位疫苗及DNA疫苗初步研究[D];重庆医科大学;2003年
2 蒋国芳;蚱总科昆虫线粒体细胞色素b基因序列及系统进化研究[D];陕西师范大学;2000年
3 赵越;氮调控对甜菜(Beta Vulgaris.L)氮同化和蔗糖代谢关键酶的影响[D];湖南农业大学;2001年
4 张万君;免疫效应分子的定量检测对移植肾急性排斥诊断价值的实验研究[D];第二军医大学;2001年
5 王凤阳;重组逆转录病毒-精原干细胞介导的转基因研究[D];中国人民解放军军需大学;2001年
6 郭建增;脑血红素加氧酶功能研究[D];重庆医科大学;2001年
7 郭波;酵母表面呈现技术体外进化DAF的研究及DAF促衰变机制的探讨[D];第三军医大学;2001年
8 刘建平;腺病毒介导AT2R转基因对血管平滑肌细胞生物学行为影响的研究[D];第三军医大学;2001年
9 周艳春;人CD7 cDNA的克隆、表达及功能研究[D];第三军医大学;2001年
10 刘仲荣;8-MOP/UVA对人类皮肤光老化形成的影响及芳维A酸乙酯拮抗作用研究[D];第三军医大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 于师宇;食物中毒菌多联融合毒素广谱抗体的制备及免疫特性研究[D];吉林大学;2005年
2 黄志峰;杂合抗菌肽基因MA-E的改建及用一步蛋白纯化克隆系统表达[D];暨南大学;2000年
3 桑红;新生隐球菌产黑素野生株与白化突变株酚氧化酶结构基因(CNLAC1)的比较研究[D];第二军医大学;2000年
4 侯玉峰;新城疫病毒F48E8株F基因的克隆及其在鸡痘病毒中的表达和免疫效果检测[D];南京农业大学;2000年
5 任晓峰;猪传染性胃肠炎病毒TH-98株S基因的克隆与鉴定[D];东北农业大学;2001年
6 杨中汉;高脂血症患者脂蛋白脂酶基因异常的初步研究[D];暨南大学;2001年
7 吴明玮;白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段简并引物PCR、克隆及鉴定[D];暨南大学;2001年
8 刘滔滔;大鼠血小板和血小板型磷脂酶A_2在宿主防御细菌感染中的作用[D];广西医科大学;2001年
9 张增利;农药辛硫磷与氰戊菊酯混配后的毒代动力学及毒效应研究[D];苏州大学;2001年
10 陈雷;志贺样毒素Ⅱ型变异体A亚单位(SLT-ⅡeA)的突变与缺失株构建及其表达产物的免疫生物学特性鉴定[D];扬州大学;2001年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 何英;陆学东;;液相芯片技术及其临床应用[J];国际检验医学杂志;2006年12期
2 钟彦伟,汪力亚,周继文,夏光明,杨守纯;建立斑点金免疫渗滤法检测O_(157):H_7型肠出血性大肠杆菌[J];细胞与分子免疫学杂志;2000年01期
3 吴雅儿;橙汁饮料中金黄色葡萄球菌的检测与研究[J];职业与健康;2000年11期
4 刘士喜,杨克礼,方绪兵,郭希保,金松青;奶牛临床型乳腺炎病原菌药敏试验[J];安徽农业科学;2000年04期
5 吴国娟,张中文,沈红,孔刚;北京地区奶牛乳房炎阳性率及发生规律的研究[J];北京农学院学报;2001年03期
6 张中文,吴国娟,刘凤华,马淑媛,李焕荣,李诺;北京地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验[J];北京农学院学报;2002年04期
7 杨慧萍,张周,肖乃志;奶牛隐性乳房炎研究进展[J];黄牛杂志;2005年02期
8 邓斌,邓春来,张曦;牛奶中抗生素残留及其检测方法研究[J];饲料工业;2003年04期
9 曹随忠,杜立新,赵兴绪;16S-23S rDNA间隔区在奶牛乳房炎诊断中的应用[J];中国畜牧兽医;2005年02期
10 任平;梁运霞;庞淑华;宋德花;刘广文;高明辉;;双城地区奶牛乳房炎主要病原菌分离与药敏试验[J];黑龙江畜牧兽医;2006年07期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 赵春燕;检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7及其它产志贺毒素大肠埃希菌的一种新的DNA扩增技术[D];吉林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前9条
1 杨洋;PCR技术检测测乳品中金黄色葡萄球菌研究[D];河北农业大学;2005年
2 何洋;应用基因芯片检测食品中金黄色葡萄球菌[D];西华大学;2006年
3 于广福;实时荧光PCR检测肠出血性大肠杆菌O157和禽流感H5亚型的研究[D];厦门大学;2005年
4 梅明珠;大肠杆菌O157的PCR检测及Vero毒素单克隆抗体的制备[D];南京农业大学;2006年
5 范一灵;金黄色葡萄球菌多重PCR和基因芯片检测方法的建立[D];上海交通大学;2008年
6 郑浩;南京地区奶牛隐性乳房炎流行调查与病原分析及PCR检测[D];南京农业大学;2004年
7 王贇;奶牛乳腺炎多联疫苗的研制[D];西北农林科技大学;2004年
8 刘珍;呼和浩特地区临床型奶牛乳腺炎病原分离鉴定及其对小白鼠致病性的研究[D];内蒙古农业大学;2005年
9 张忠厚;呼市地区奶牛隐性乳房炎主要病原菌的分离鉴定及药敏试验[D];内蒙古农业大学;2005年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 周彦春;微生物性食物源性疾病的流行概况[J];河北职工医学院学报;1996年01期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高世光;郝陶光;;丹东口岸出口食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素检测分析[J];中国国境卫生检疫杂志;2010年03期
2 高彭;梁和平;陈东宛;刘秀峰;王瑞霞;甄国新;黄晓凤;谈敦芳;孙雪媛;刘晓涛;;北京市顺义区食源性致病菌污染调查[J];现代预防医学;2009年14期
3 齐月敏;;太和区熟食中食源性致病菌污染状况调查[J];辽宁医学院学报;2008年05期
4 冼慧霞;阳帆;杨洪;张海龙;王冰;;金黄色葡萄球菌食品分离株耐药谱研究[J];实用预防医学;2009年06期
5 李小春;;近5年来温州市食品中食源性致病菌主动监测[J];中国卫生检验杂志;2007年10期
6 方叶珍;徐丹戈;包芳珍;高海明;黄世旺;;2006年杭州市江干区食源性致病菌污染状况分析[J];中国卫生检验杂志;2008年03期
7 杨修军;刘桂华;孔祥云;黄鑫;杨红;;2002~2007年吉林省食品中食源性致病菌监测结果分析[J];中国卫生检验杂志;2008年07期
8 蒋德媚;林笑容;李小春;董雪;陈佩;金筱碧;詹珍洁;;温州市瓯海区主要食源性致病菌的污染现状研究及耐药状况分析[J];中国预防医学杂志;2009年04期
9 郑官增;裘丹红;沈伟伟;阮琦;王敬;葛素君;包文君;陈忠妙;;5类市售食品5种致病菌污染状况的主动监测[J];中国卫生检验杂志;2006年12期
10 杨娟;周静;杨海玉;蔡震;;泰州市2005~2006年食品致病菌污染状况调查[J];中国热带医学;2007年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘奇才;杨滨;;合并感染铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌的危险因素分析[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
2 刘敏;于志红;富晶;王彦;吕鹏;冯仲珉;孙卫兵;;金黄色葡萄球菌与肠毒素联合对白细胞水平恢复的研究[A];第七届全国肿瘤生物治疗学术会议论文集[C];2001年
3 杨云江;;一例金黄色葡萄球菌所致的食物中毒报告[A];四川省营养学会2003年学术会议专题报告及论文摘要汇编[C];2003年
4 余雁;易智彪;梁逸曾;;代谢组学中细胞破碎方法的研究[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(下册)[C];2006年
5 邓津菊;魏莲花;邹凤梅;刘刚;司小强;高育新;;烧伤病房感染细菌716株分布及耐药性分析[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年
6 魏军;贾伟;赵志军;杨晓燕;;05~08年350株葡萄球菌属细菌耐药性变迁的分析[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
7 丁晓飞;郝莉;李冰燕;张增利;;1,25(OH)_2D_3对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌过程的影响[A];中国营养学会第十届微量元素营养学术会议论文摘要汇编[C];2009年
8 周平;沈默;黄学忠;林佩佩;黄绍光;;烧伤患者静脉留置针金黄色葡萄球菌检出及耐药性分析[A];2006年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2006年
9 杨广宇;吕火祥;胡庆丰;林月;;溶血葡萄球菌红霉素诱导克林霉素耐药的表型检测及耐药性分析[A];2006年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2006年
10 马琳;刘盈;张霞;邢环;孔繁荣;杨永弘;;儿童皮肤感染金黄色葡萄球菌的耐药研究[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 成吉;阻击耐药菌的七大后卫[N];医药经济报;2006年
2 张小社 刘国信;兔葡萄球菌病的防治[N];农民日报;2005年
3 记者 蔡岩红;湛江海关销毁60吨带菌走私冻品[N];法制日报;2010年
4 孔令文;别让硬物扎鸭脚[N];河南科技报;2009年
5 实习生 孙晓翠 记者 郑野军;“问题水饺”我市有售[N];烟台日报;2007年
6 北京大学临床药理研究所 卫生部全国细菌耐药监测网 王进;金黄色葡萄球菌在蔓延[N];健康报;2008年
7 上海光明荷斯坦牧业有限公司 刘振华;奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎研究进展[N];中国畜牧兽医报;2009年
8 王小龙;夏秋两季易感染金黄色葡萄球菌[N];科技日报;2011年
9 侯震;金黄色葡萄球菌致中毒[N];大众卫生报;2000年
10 孔令文;别让硬物扎鸭脚[N];农民日报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨光;抗金黄色葡萄球菌感染的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
2 吴晓倩;金黄色葡萄球菌可选择性σ因子σ~H调控原噬菌体的整合与切出[D];中国科学技术大学;2010年
3 崔俊昌;金黄色葡萄球菌耐药突变选择窗的体内外研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2005年
4 向华;厚朴酚抗金黄色葡萄球菌作用机制的研究[D];吉林大学;2010年
5 冯百岁;肥大细胞在细菌性腹泻中的作用机制研究[D];郑州大学;2009年
6 甄宇红;抗奶牛乳腺炎特异性卵黄抗体的制备及活性研究[D];大连理工大学;2008年
7 刘苏俊;人表皮角质形成细胞Toll样受体的表达以及Toll样受体2功能的初步研究[D];中国协和医科大学;2008年
8 吴旧生;基于纸片保存奶样的奶牛隐性乳腺炎诊断技术研究[D];浙江大学;2007年
9 周彦娇;松鼠葡萄球菌mecA和金黄色葡萄球菌mecA在松鼠葡萄球菌耐药机制及细胞壁合成中的作用[D];天津医科大学;2007年
10 尹荣兰;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗构建及实验免疫[D];吉林大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王韶;应用PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌[D];吉林大学;2005年
2 周全;IL-6在鸡葡萄球菌性关节炎发病机制中的作用研究[D];华中农业大学;2005年
3 徐磊;脱镁叶绿酸α的制备及抑菌研究[D];江南大学;2005年
4 孙凤军;金黄色葡萄球菌sigB同源重组质粒的构建[D];第三军医大学;2006年
5 林树乾;奶牛金黄色葡萄球菌性乳腺炎新型疫苗的研制[D];山东农业大学;2006年
6 马菊;干腌牛肉中金黄色葡萄球菌生长规律及其抑菌因素研究[D];内蒙古农业大学;2007年
7 纪冰;金黄色葡萄球菌耐药表型特征及耐药机制研究[D];安徽医科大学;2007年
8 索玉娟;食品中金黄色葡萄球菌的分布及其肠毒素基因的研究[D];河北农业大学;2008年
9 丛府;新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌生物学特性及基因分型研究[D];新疆农业大学;2008年
10 黄丹;乳源性金黄色葡萄球菌耐药及产肠毒素特性研究[D];内蒙古农业大学;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026