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《吉林大学》 2006年
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尿胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及其药效学研究

王晓杰  
【摘要】:本文以健康男性尿为原料,经甲壳素吸附、65%硫酸铵盐析得到尿胰蛋白酶抑制剂粗品;经DEAE-Sepharose离子交换层析、胰蛋白酶-Sepharose-4B亲和层析、Sephacry-200HR凝胶层析得到UTI纯品。2000L原料经提取、纯化,最后可得到尿胰蛋白酶抑制剂纯品18.44g。 对尿胰蛋白酶抑制剂的基本性质进行了研究,利用HPLC进行了纯度检测和分子量测定,实验结果显示其纯度大于95%,分子量为67KDa;采用生化法测得尿胰蛋白酶抑制剂的等电点为2.76;紫外吸收性质研究表明尿胰蛋白酶抑制剂在278nm有最大吸收;氨基酸组成分析得到同文献近似的结果;C末端氨基酸残基分析结果表明尿胰蛋白酶抑制剂C-端氨基酸为Leu,蛋白质N-端序列结果显示尿胰蛋白酶抑制剂N-端序列为A-V-L-P-Q-E-E-E-G-S-G-G-G-Q-L。 药效学研究进行了尿胰蛋白酶抑制剂体外对胰蛋白酶、α-糜蛋白酶的抑制作用实验及其对由胰蛋白酶引起的大鼠急性胰腺炎的治疗作用实验。实验结果显示尿胰蛋白酶抑制剂抑制胰蛋白酶的IC50为5.11 U/ml;尿胰蛋白酶抑制剂抑制α-糜蛋白酶的IC50为9.54 U/ml;各种剂量的尿胰蛋白酶抑制剂对由胰蛋白酶引起的大鼠急性胰腺炎有明显的治疗作用,明显延长其生存时间。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R914;R96

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