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《吉林大学》 2007年
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骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞的研究

石丹  
【摘要】: 本实验探讨了骨髓间充质干细胞(MSCs)体外原代的培养方法,及MSCs传代后在某些诱导条件下,分化为胰岛样细胞的实验方法。通过免疫细胞化学实验及动物实验,验证了MSCs在体外成功诱导分化为胰岛样细胞,并且可以修复坏死胰腺细胞。 在MSCs的原代培养过程中,采用高速离心法及贴壁法分离纯化细胞。选用含10%胎牛血清(FBS)的低糖DMEM培养基作为扩增细胞的培养基。选择第三代状态良好的MSCs,进行诱导实验。采用三种不同的诱导途径,对诱导过程进行比较。发现最佳诱导方法如下:向生长状态稳定的第三代MSCs内加入内含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(10ng/ml),表皮细胞生长因子(EGF)(10ng/ml)的无血清的LG-DMEM培养基,培养6~7d;然后,换用无血清的高糖DMEM培养基,添加胰腺条件培养液、胰岛素(25mg/ml)、地塞米松(10μg/l)、尼克酰胺(10mM/l),继续培养6~7d;在显微镜下观察MSCs,可以看到细胞形态渐发生改变,细胞由原来的梭形渐变为圆形及不规则形,最后细胞聚集成团、悬浮逐渐增多。 经过细胞鉴定实验,证明已成功诱导分化为胰岛样细胞。这一研究,为临床胰腺类疾病(如胰腺炎及糖尿病等)的治疗提供了一个新的方向。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R329

【共引文献】
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1 肖乐;曹建彪;;体外诱导细胞转化为胰岛细胞的研究进展[J];中国全科医学;2007年10期
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3 孙超;金晓龙;肖家诚;;干细胞移植治疗糖尿病[J];上海第二医科大学学报;2005年04期
4 李艳华,张锐,王韫芳,赵连旭,陈琳,岳文,裴雪涛;腺病毒载体介导PDX-1在骨髓间充质干细胞中的表达[J];生物化学与生物物理进展;2004年06期
5 邱丽燕,王金福;骨髓间充质干细胞的研究进展[J];生物工程学报;2003年02期
6 张丽新;滕春波;安铁洙;;利用成体干细胞治疗糖尿病[J];生物工程学报;2008年02期
7 那春鑫;王彦红;王麟;林雪松;;干细胞治疗糖尿病的研究进展[J];生物医学工程学进展;2010年02期
8 王菊;符毓豪;谢松松;周宗瑶;;小鼠精原干细胞的体外培养与鉴定[J];石河子大学学报(自然科学版);2009年04期
9 何旭;杨旭芳;张丽红;何牮;高云鹤;谭小华;李玉林;;人脂肪干细胞的形态学特征[J];生物医学工程学杂志;2011年02期
10 于瑾,王启伟,陈昭烈;间充质干细胞诱导分化为胰岛β细胞的研究进展[J];中国生物工程杂志;2005年08期
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1 王文明;董雅娟;柏学进;村上正夫;刘玮;张守宝;董懿为;;不同供体核对牛核移植胚胎发育的影响[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
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1 欧阳建;同基因造血干细胞移植治疗1型糖尿病小鼠的疗效及机制研究[D];南京医科大学;2010年
2 王建伟;供体源性骨髓间充质干细胞调节非协调性异种肝脏移植免疫排斥反应的实验研究[D];浙江大学;2004年
3 李家一;自体骨髓间充质细胞心肌内移植治疗急性心肌梗死的实验研究[D];第四军医大学;2004年
4 王陆飞;骨髓间充质干细胞向视网膜样结构诱导分化的体外和体内研究[D];吉林大学;2004年
5 张秀英;VEGF在骨髓间充质干细胞向内皮细胞诱导分化中的作用及分化机制研究[D];吉林大学;2004年
6 马勇江;骨髓与脂肪间质干细胞分离与诱导分化为成骨细胞的研究[D];西北农林科技大学;2004年
7 庞全海;山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及体外分化潜能的研究[D];西北农林科技大学;2005年
8 李艳华;骨髓间充质干细胞向胰岛样细胞分化及对糖尿病治疗作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年
9 徐卫袁;构建骨髓间充质干细胞/牛骨形态发生蛋白/丝素蛋白组织工程骨的实验研究[D];苏州大学;2005年
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