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胡桃楸树皮提取物体外抗肿瘤作用研究

潘丽艳  
【摘要】: 本项研究以人肝癌细胞株SMMC-7721、人乳腺癌细胞株MCF-7、人肺腺癌细胞株A549为靶细胞,研究胡桃楸树皮提取物(JMME)体外抗肿瘤作用及其机制。首先制备JMME,胡桃楸树皮以95%乙醇煮沸,有机溶剂萃取,取乙酸乙酯部分过柱层析硅胶,以氯仿和甲醇按4:1(体积)洗脱,将红色流分收集于旋转蒸发仪中蒸干,得到的粉末状物质留作实验用。以生长曲线法、MTT法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳法、端粒酶PCR-ELISA等方法研究JMME对肿瘤细胞增殖抑制作用、增强淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)的抑瘤作用、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制端粒酶活性。结果表明JMME作用于三种肿瘤细胞均显示出了抑制肿瘤细胞生长的作用。对同一种肿瘤细胞,JMME浓度增加抑制率增强。LAK与JMME合用对三种肿瘤细胞的抑制作用均强于单用JMME或单用LAK组。三种肿瘤细胞经JMME作用后单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象,琼脂糖凝胶电泳均出现DNA Ladder带,表明JMME可诱导肿瘤细胞凋亡。经过JMME处理后的SMMC-7721、MCF-7、A549三种肿瘤细胞株的端粒酶活性都受到了抑制,抑制率分别为42.86%、73.30%、58.78%。 实验表明JMME在体外可杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长,增强LAK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的端粒酶活性。


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