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《吉林大学》 2007年
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植物激素和诱导子对人参发根皂苷含量的影响研究

徐立新  
【摘要】: 人参发根是经发根农杆菌A4菌株浸染人参外植体遗传转化而成,属非天然植物。与传统的细胞悬浮培养相比,植物发根具有生长速度快、活性物质含量高和遗传性状稳定等特点。人参发根培养目的之一就是要获得相对含量较高的人参皂苷,实现人参皂苷工厂化生产。随着生物工程的进一步发展,应用代谢工程手段来增加次级代谢产物产量的研究已成为热点。发根中次级代谢产物的产量受营养因子、植物激素、前体物和诱导子等的影响。本文向人参发根中添加了植物激素及诱导子,其目的是调控人参皂苷生物合成途径,提高培养物中人参总皂苷及Rb1的含量。 本文对人参发根进行继代和扩大培养,经过四个月的继代和扩大培养,由最初的1瓶固体培养基的人参发根获得了40瓶的固体培养基和52瓶液体培养基的人参发根,取得了后续实验所需的人参发根材料。在MS液体培养基中加入了不同的植物激素(3-吲哚丁酸、萘乙酸和2,4-二氯苯氧乙酸)和诱导子(水杨酸和茉莉酸甲酯)对人参发根进行培养,然后利用索氏提取法对人参发根进行了总皂苷的提取,再经过大孔树脂D101去除多糖,并通过香草醛比色法确定总皂苷的含量,利用高效液相色谱法测定了人参皂苷单体Rb1的含量,通过对比总皂苷及Rb1的含量,最终确定了最优的培养方法,即浓度为0.050mg/L的添加NAA的MS培养基更有利于人参发根中有效物质的积累。 本文所研究的茉莉酸甲酯对人参发根的生长、人参发根中总皂苷和Rb1含量的影响,此前未曾报导。其成果可提高培养物中人参发根总皂苷和Rb1的含量,从而降低生产成本。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:R284

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