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《吉林大学》 2007年
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人脂肪来源基质细胞的实验研究

王文加  
【摘要】: 脂肪来源的基质细胞(adipose derived stormal cells,ADSCs)是近年来从脂肪抽吸物中发现的一类成体干细胞,与较早被认识成体干细胞——骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)有很多相似的特性。 本研究建立了人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stormal cells,hADSCs)的分离和扩增方法,对其生物学特性做了系统性研究;探讨了hADSCs向脂肪细胞、成骨细胞、神经细胞方向分化的潜能。并对hADSCs规模化扩增进行了初步研究。采用胶原酶消化法分离扩增hADSCs,测定其生长的经时变化、累积生长倍数、EGF、FGF及HGF对其生长动力学影响、DNA含量及细胞周期、表面标志等。应用不同因子诱导hADSCs向脂肪细胞及成骨细胞分化并进行鉴定。建立了新的诱导hADSCs分化为神经细胞的方法;并对利用传统方法和新建方法诱导hADSCs向神经细胞分化的结果进行了比较。结果表明,每100ml脂肪抽吸物中可分离得到2×10~7~4×10~7个有核细胞,60d内扩增至P8;免疫细胞化学染色及RT-PCR证实hADSCs经诱导可分化为脂肪细胞、成骨细胞及神经细胞。利用新建方法可诱导hADSCs分化为形态及表型更接近于成熟的神经细胞。因此,hADSCs有望作为一种成体多能干细胞应用于组织工程及细胞治疗。
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