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人外周血循环FS、MUC1 mRNA的检测及其在临床中的应用

王奭骥  
【摘要】: 卵泡抑素(follistatin,FS)是一种单链糖蛋白,具有广泛的组织分布及多种生物学活性。同时,FS作为激活素(Activin,ACT)结合蛋白,参与多种生理、病理功能的调节,如在胚胎发育、卵巢颗粒细胞分化、成骨细胞功能的调节、红细胞生成、维持神经细胞存活、肝纤维化、脑损伤、动脉粥样硬化、生殖及肿瘤形成中均具有重要的作用。 粘蛋白-1(mucins-1,MUC1)是广泛分布于机体多种组织、器官粘膜表面的高分子量糖蛋白,具有多种功能,如其粘附和抗粘附作用,免疫活化和免疫抑制作用等,且与肿瘤抗原递呈、肿瘤的侵袭和转移、肿瘤的预后等密切相关。 本研究采用荧光定量RT-PCR检测临床中常见的一些疾病,如肿瘤(肺癌、卵巢癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、肾癌及良性肿瘤)、非肿瘤(糖尿病、高血压、急性心梗、肺炎、肺结核)及妊娠妇女和流产患者外周血循环FS、MUC1 mRNA表达水平,探讨其临床意义;并通过免疫组织化学染色对FS、MUC1成熟蛋白在组织中的表达进行研究。 实验结果显示,良性疾病组糖尿病患者外周血循环FS mRNA表达水平明显升高,与健康对照组比较具有显著性差异,p0.01。肿瘤患者组卵巢癌及肺癌患者外周血循环FS mRNA表达水平升高明显,与健康对照组比较具有统计学差异,p0.01。健康成年人外周血循环FS mRNA表达水平在老年组轻度升高,但与青壮年组比较无统计学意义,p0.05。正常早期与晚期妊娠女性外周血循环FS mRNA表达水平亦无明显变化。先兆流产患者外周血循环FS mRNA表达明显增加,与正常早期妊娠组比较具有显著性差异,p0.05。ELISA检测结果显示健康成年人外周血FS蛋白水平在老年组明显升高,统计学比较差异显著,p0.05;正常晚期妊娠女性外周血FS蛋白水平明显高于早期妊娠女性组,p0.01。上述结果提示成年人外周血循环FS mRNA表达水平受年龄及妊娠状态影响较小,在肿瘤诊断上可能较外周血FS蛋白检测更有意义。 检测不同疾病患者外周血循环MUC1 mRNA结果显示,良性疾病组心肌梗塞患者外周血循环MUC1 mRNA表达水平明显升高,与健康对照组比较,具有统计学差异,p0.05。肿瘤患者中,卵巢癌、乳腺癌和肺癌患者外周血循环MUC1 mRNA水平明显高于对照组,统计学比较差异显著,分别为p0.01,p0.05,p0.01;而肝癌、胃癌、肾癌及良性肿瘤患者外周血循环MUC1 mRNA水平无明显变化。健康老年组与青壮年组外周血循环MUC1 mRNA表达水平比较无统计学差异,p0.05。正常晚期妊娠与早期妊娠女性外周血循环MUC1 mRNA表达水平比较明显升高,p0.01。先兆流产患者外周血循环MUC1 mRNA表达水平也明显升高,与正常早期妊娠组比较具有统计学差异,p0.01。 为了进一步研究肿瘤患者及妊娠女性外周血循环FS、MUC1 mRNA的来源,采用免疫组织化学染色观察部分肿瘤及胎盘绒毛组织FS、MUC1成熟蛋白表达情况。抗FS及MUC1抗体组化染色结果显示,肺癌、乳腺癌及卵巢癌组织均呈阳性染色;胎盘绒毛组织FS、MUC1成熟蛋白也有明显表达。上述结果提示肿瘤患者血循环FS及MUC1 mRNA表达增加可能直接来源于肿瘤细胞;妊娠期MUC1 mRNA升高可能来自胎盘组织。 综合上述资料,FS作为激活素结合蛋白可能参与糖尿病的形成过程,循环FS、MUC1 mRNA的检测有助于临床肿瘤诊断,胎盘组织FS及MUC1的表达可能与生理及病理妊娠有关。


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