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《吉林大学》 2008年
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酶促转化法和微生物发酵法制备S-腺苷甲硫氨酸的研究

罗赟星  
【摘要】: S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)是一种存在于所有活细胞中的重要代谢中间体。在临床上,SAM对肝病、抑郁症、关节炎等疾病有显著的治疗作用,并且易被人体吸收和利用,副作用小。目前,由于在SAM的制备方法中存在:采用酶促转化法不易获得SAM合成酶,采用微生物发酵法SAM纯化工艺复杂、生产周期长等问题,导致了SAM价格昂贵,这严重制约了SAM的广泛应用。针对这一情况,我们分别对制备SAM的酶促转化法和微生物发酵法提出了新的改进策略。 我们在毕赤酵母中高效分泌表达了来源于酿酒酵母的重组SAM合成酶,经过酶反应条件的优化,重组酶比活力比从酿酒酵母中提取的SAM合成酶比活力显著提高。通过对该酶性质的详细研究,加强了酶的稳定性。并对此酶实施“一步”纯化-固定化,固定化酶以相对廉价的DL-甲硫氨酸代替L-甲硫氨酸为底物,酶促转化合成SAM。这些研究从理论上进一步增加了对SAM合成酶的认识,为实现酶促转化法的工业应用提供了重要依据。 我们诱导重组大肠杆菌,强化表达SAM合成酶,在细胞内以自身底物合成SAM。SAM不仅在胞内得到了积累,而且被大量分泌到培养基中,这对简化SAM的分离、纯化步骤以及缩短生产周期大有帮助。在优化培养条件的过程中,我们发现细胞状态对SAM的胞外分泌有着重要影响。这些实验结果为利用代谢调控的方式提高发酵法制备SAM的生产效率奠定了良好基础。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:TQ463

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 江海洪;线粒体反应性氧类与细胞凋亡[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2000年03期
2 蒋太交,吉鑫松,章如安,黄艳红,吴祥甫,袁中一;甲醇酵母Pichia pastoris高水平表达有活性的辣根过氧化物酶[J];生物化学与生物物理进展;1999年06期
3 李东阳,于健,田露,吉鑫松,袁中一;利用重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸[J];生物工程学报;2002年03期
4 申丽,李东阳,姜涌明,袁中一;S-腺苷甲硫氨酸的稳定性及其稳定性盐[J];药物生物技术;2003年02期
5 朱剑昆,许志祥,黄伟达,闵太善,谢炜,徐颖,张学光;人重组白细胞介素11在毕氏酵母系统中的表达及纯化[J];中国医学科学院学报;2001年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王莲哲;张现青;李洋;杨广笑;何光源;;毕赤酵母分泌表达SAMS及表达产物活性分析[J];安徽农业科学;2009年10期
2 万红贵;赵宗松;蒋导航;袁建锋;吴启赐;;微生物全细胞催化技术在工业生产中的应用[J];安徽农业科学;2011年04期
3 陶敏,干信;S-腺苷甲硫氨酸的研究现状及应用前景[J];氨基酸和生物资源;2005年03期
4 刘坚;崔海容;郭坚;胡德聪;刘恭源;杨广笑;何光源;;高效液相色谱法测定酿酒酵母中S-腺苷-L-蛋氨酸[J];分析科学学报;2007年02期
5 华慧,周思翔,王正荣;外源基因在巴斯德毕赤酵母中的表达[J];国外医学.生物医学工程分册;2003年03期
6 唐元家,余柏松;巴斯德毕赤酵母表达系统[J];国外医药(抗生素分册);2002年06期
7 张建国,蔡瑞,李新华,袁中一;发酵重组Pichia pastoris生产腺苷甲硫氨酸的研究[J];工业微生物;2004年04期
8 张建国,李新华,袁中一;腺苷甲硫氨酸合成酶的基因及结构研究进展[J];工业微生物;2005年03期
9 罗赟星;赵辅昆;罗贵民;袁中一;;S-腺苷甲硫氨酸的细胞生物化学功能及其开发应用研究[J];工业微生物;2006年01期
10 张建国;王学东;魏东芝;;高效液相色谱法同时测定Pichia pastoris发酵过程中腺苷甲硫氨酸相关的六种物质[J];工业微生物;2008年01期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李秉玲;芍药属植物超低温保存花粉的差异表达蛋白质研究及花粉库的建立[D];北京林业大学;2010年
2 申茉函;重组人Aβ_(1-42)的制备及促进细胞凋亡作用的实验研究[D];吉林大学;2011年
3 高文瑞;鹰嘴豆耐旱种质的筛选、cDNA文库构建、EST数据分析及耐旱相关基因克隆[D];南京农业大学;2008年
4 汪小锋;解脂耶氏酵母脂肪酶LIP2在毕赤酵母中的高效表达及高密度发酵工艺研究[D];华中科技大学;2012年
5 韩雪清;猪瘟病毒E2基因遗传变异及体外表达研究[D];西北农林科技大学;2002年
6 刘惠;酵母生物转化生产S—腺苷—L—蛋氨酸辅产谷胱甘肽机理及工艺的研究[D];浙江大学;2002年
7 陈黄实;17位丝氨酸突变体干扰素β融合基因的克隆、构建、表达及纯化[D];第四军医大学;2004年
8 吴琦;枯草芽孢杆菌植酸酶phyC基因的克隆及其表达研究[D];四川大学;2004年
9 万家余;甲、乙型肝炎口服二价DNA疫苗的研究[D];吉林大学;2005年
10 夏燕莉;玉米愈伤组织分化的遗传分析及相关基因克隆[D];四川农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 潘海波;利用DNA体外重组技术构建高活性纤维素酶基因工程菌[D];安徽工程大学;2010年
2 朱晶莹;转SsBHMT基因拟南芥的抗逆性评价和玉米S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因家族成员的表达分析[D];河北农业大学;2011年
3 乔坤;裙带菜SAMS基因的克隆、分析及原核表达[D];辽宁师范大学;2011年
4 宣慧;高温胁迫对海带配子体的生理影响及SAMS基因的克隆与分析[D];辽宁师范大学;2011年
5 封晓霞;复合诱变和原生质体融合选育S—腺苷甲硫氨酸酿酒酵母高产菌株[D];北京化工大学;2011年
6 武林芝;香菇纤维素酶基因exgl的克隆及其表达[D];山西大学;2011年
7 沈天丰;S-腺苷-L-蛋氨酸发酵工艺优化及中试放大研究[D];浙江工业大学;2011年
8 陈小龙;生物合成法生产腺苷蛋氨酸[D];浙江工业大学;2002年
9 余志良;强化表达SAM合成酶促进SAM在Pichia pastoris中累积[D];浙江大学;2003年
10 申丽;重组Pichia pastoris的发酵条件研究及SAM的初步分离纯化[D];扬州大学;2003年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 项昱红,莫晓燕,詹谷宇;S-腺苷甲硫氨酸的制备与药理作用[J];西北药学杂志;1999年01期
2 杨静,王旻,韦平和;S-腺苷甲硫氨酸的临床及药理研究进展[J];药学进展;2001年03期
3 余志良,杨晟,蔡谨,袁中一;S-腺苷甲硫氨酸研究进展[J];中国医药工业杂志;2003年01期
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