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《吉林大学》 2008年
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转基因神经干细胞移植治疗臂丛根性撕脱伤的实验研究

陈雷  
【摘要】: 臂丛神经根性撕脱伤是指脊神经根在脊髓起点的断裂,造成神经连续性的中断、脊髓细胞的损伤,从而导致上肢功能部分或完全丧失,临床上难于治愈,是一世界性的难题。神经根回植术治疗臂丛神经根性撕脱伤是一种新的尝试方法,但疗效尚不肯定。本实验以成年Wistar大鼠为对象,采用颈胸椎后路建立颈5、6、7神经根撕脱、颈6神经根脊髓内回植的动物模型;以PGET-1 TA质粒及pLEGFP-C1质粒为载体将体外扩增的NT-3基因导入由胎鼠脑组织分离到的神经干细胞内;于神经根回植后第二天,将该转NT-3基因的神经干细胞移植于臂丛根性撕脱伤模型大鼠相应的脊髓节段内,分别于术后1、2、4、6个月观察实验动物患肢功能、检测肌皮神经诱发电位潜伏期和诱发电位波幅、观察脊髓前角的病理改变并进行细胞计数、移植部位行免疫组化检测移植细胞的迁移、存活与分化。探讨神经根回植术结合转NT-3基因神经干细胞移植对大鼠臂丛神经根性撕脱伤的实验性治疗作用。经过对实验结果的分析,我们得出以下结论: 1.大鼠肌皮神经的纤维成分主要来自于C5~C7,未见C8的纤维成分加入; 2.经颈胸椎后肩胛下入路可顺利建立大鼠臂丛神经根性撕脱伤神经根回植模型; 3.利用无血清培养技术可成功自胎鼠脑组织内分离到具有自我复制能力和多向分化潜能的神经干细胞; 4.研究了鹿茸多肽体外诱导神经干细胞分化的作用,证实其在促进神经干细胞向神经元分化方面有着明显的作用,且当其浓度为50μg/L时,神经元阳性细胞数达到75%左右。 5.利用逆转录病毒载体的包装细胞PA317,可将pLEGFP-C1-NT-3转入神经干细胞内,NT-3基因能够在神经干细胞内有效表达; 6.转NT-3基因神经干细胞移植组肌皮神经诱发电位潜伏期及波幅与对照组相比具有明显的改善; 7.转NT-3基因神经干细胞移植对臂丛神经根性撕脱伤神经根回植后脊髓前角运动神经元具有明显的保护作用,移植细胞可较长时间存活(术后6个月),在移植局部表达NT-3蛋白,并迁移、分化为神经元。 综上所述,本实验证明了转NT-3基因神经干细胞移植对臂丛神经根性撕脱伤神经根回植后神经电生理功能恢复具有明显作用,移植细胞可较长时间存活(术后6个月),在移植局部表达NT-3蛋白,并可迁移、分化为神经元,对脊髓前角运动神经元具有明显的保护作用。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R651.3

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