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《吉林大学》 2008年
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我国不同地域不同品系实验室小鼠肝螺杆菌感染状况调查以及慢性乙肝患者幽门螺杆菌感染状况分析

季尚玮  
【摘要】: 螺杆菌菌属是一组最初由人类和其他哺乳动物的胃组织中分离出来的革兰氏阴性、微需氧、螺旋弯曲状细菌。这类细菌不仅在人或动物的胃炎、消化性溃疡、胃恶性肿瘤的发生发展中发挥致病作用,也可能与肠道、胆道、肝脏的炎症性疾病和一些肿瘤的发生相关。已有报道实验性啮齿类动物普遍存在螺杆菌自然感染,几种最常见的分离菌株在特定品系小鼠感染后可引起病变,对实验研究产生潜在的影响。肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus,H.hepaticus)作为螺杆菌属中的一员,可引起很多敏感品系小鼠发生慢性活动性肝炎和胰腺炎,甚至可导致雄性A/J Cr和B6C3F1小鼠发生肝细胞癌,以及使各种免疫功能不良小鼠发生炎症性肠病。 HBV感染作为慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌发生的最重要病因已得到公认。但同样是HBV感染且基因型相同者,其临床表现及疾病转归却相差甚远,有人可发展至慢性肝炎、肝硬化甚至原发性肝癌,而有人却不发病,其疾病进展的机制尚不十分明确。除与病毒的致病性和宿主的免疫状况等因素密切相关外,是否还存在其他协同致病因素的作用,如细菌感染等,越来越受到研究者的关注。因此人们一直在寻找与HBV在慢性肝损伤及癌变发生过程中具有协同作用的其他感染因素。目前越来越多的流行病学和实验研究显示某些螺杆菌可以感染人类,且和人类慢性肝胆疾病的发生有关。关于螺杆菌与各种慢性肝脏疾病的相关性研究已成为国际范围内的研究热点。针对上述热点问题,本研究做了如下工作: 一、我国不同地域不同品系实验室小鼠肝螺杆菌感染状况调查 通过对来自我国不同地域4个实验动物中心及其所属的11个研究中心动物实验室的102只不同品系实验室小鼠,分别检测血清中抗H.hepaticus抗体、粪便中H.hepaticus抗原、粪便中螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因和H.hepaticus特异性16SrRNA基因检测以及粪便螺杆菌的分离、培养及鉴定等方法,分析我国不同地域不同品系实验室小鼠H.hepaticus感染状况,结果显示我们所收集的102只实验室小鼠中共有23只小鼠感染了螺杆菌(22.55%),其中51.17%(12/23)为H.hepaticus感染。我国不同地域不同品系实验室小鼠中不同程度存在螺杆菌和H.hepaticus感染,其中以南京实验动物中心及其所属研究中心的实验室小鼠感染率最高,其次为吉林实验动物中心及其所属研究中心实验室,这些小鼠分别来自3个研究中心实验室,H.hepaticus是实验室小鼠感染的主要菌株。在我国实验室小鼠中除存在H.hepaticus感染外,还可能存在其他螺杆菌的感染。而北京实验动物中心及其所属研究中心实验室尚未发现螺杆菌感染。为进一步探讨H.hepaticus在小鼠慢性肝炎、肝细胞癌、盲肠结肠炎以及下消化道肿瘤中的作用奠定了基础。 二、慢性乙肝患者幽门螺杆菌感染率调查及其与HBV DNA载量和HBV DNA基因型的关系 通过一组病例对照研究的方法对502例慢性乙肝患者的anti-H.pylori -IgG和HBV DNA定量及基因分型进行检测,探讨了慢性乙肝患者H.pylori感染状况及其与HBV在慢性乙肝疾病进展中的协同致病作用。结果表明,慢性乙肝患者H.pylori感染率明显增加,且随着疾病的进展,H.pylori感染率亦增加。HBV DNA(+)组慢性乙肝患者H.pylori感染率明显高于HBV DNA(-)组及健康对照组,但不同病毒载量各组之间比较无明显差异。不同HBV DNA基因型慢性乙肝患者H.pylori感染率无明显差异。乙肝肝硬化患者并发症的发生可能与H.pylori感染有关。为进一步探讨H.pylori在慢性乙肝发生发展中的致病作用及机制提供了流行病学依据。 三、慢性乙肝患者肝组织中螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因及幽门螺杆菌cagA、vacA和glmM基因分析及其临床意义探讨 通过聚合酶链反应(PCR)方法应用针对螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因通用引物及H.pylori cagA、vacA和glmM基因特异性引物在56例慢性乙肝患者肝组织中扩增螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因及H.pylori cagA、vacA和glmM基因,分析螺杆菌在慢性乙肝发生发展中的作用。结果显示,56例慢性乙肝患者肝组织中螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因的检出率为62.5%,其中原发性肝癌组和肝硬化组的检出率高于慢性肝炎组。35例螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因阳性者中有21例证实为H.pylori。其余14例仅螺杆菌菌属特异性16SrRNA基因阳性者经DNA测序并与Genebank上已知的螺杆菌16SrRNA基因序列进行比对,与H.hepaticus的同源性为95.3%~99.2%,与H.rodentium的同源性为92.2%~ 99.6%,与H.pullorum的同源性为90.7%~96.9%,与H.bilis的同源性为89.8%~95.2%。慢性乙肝患者肝组织中除存在H.pylori DNA外,可能还存在其他螺杆菌DNA,螺杆菌在慢性乙型肝炎向肝硬化和原发性肝癌的发展过程中可能发挥协同致病作用。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R512.6

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【参考文献】
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