黄曲霉毒素B1免疫层析试纸条快速检测方法的研制

【摘要】： 本研究首先将AFB1先转变成AFB2a后,再与蛋白耦连制备完全抗原,以期制备的抗体能与黄曲霉毒素更多种类反应。成功制备了AFB2a单克隆抗体的基础上,建立了两种竞争性ELISA检测方法,并利用直接法组装了ELISA试剂盒,检测限为2ng/mL,优于国家标准和国外的检测方法。验证了单抗在体内外中和毒素的能力。以柠檬酸三钠为还原剂,制备了20nm胶体金颗粒,以此胶体金标记纯化的单抗,在筛选试纸条材料的基础上,以标记抗体做为试剂组装了试纸条,并优化了抗体印记条件。组装的试纸条与AFB2、M1、M2有反应特异性,对标准毒素AFB1最低检测限为5ng/mL。