收藏本站
《吉林大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

大鼠骨髓间充质干细胞在脊髓损伤治疗中的应用及其机制的研究

景元海  
【摘要】: 本文的研究目的是应用自制的脊髓损伤模型打击装置----打击架制备大鼠脊髓损伤模型基础上,应用骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stemcells, MSCs)对其进行治疗,观察对脊髓损伤的保护和修复作用,并通过其对神经元细胞诱导凋亡的影响而初步探讨其作用机制。研究方法:根据MSCs的贴壁特性,体外分离纯化MSCs。通过镜下观察形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期、MTT法检测其生长特性、流式细胞检测细胞表面标记鉴定所分离的MSCs;采用自制打击设备,应用改良的Allen动物模型方法制备大鼠脊髓损伤模型;根据改良Tarlov行为功能评价标准,观察MSCs对脊髓损伤模型大鼠的治疗作用;激光共聚焦显微镜观察体外DAPI标记的MSCs尾静脉注入后,向损伤组织趋化并定居;组织病理及免疫组织化学方法,观察MSCs治疗后,组织病理学变化,及对Bcl-2、Bax及Nogo表达的影响。结果:MSCs对脊髓损伤大鼠具有保护作用。MSCs在体外DAPI标记后,尾静脉注入脊髓损伤模型大鼠,激光共聚焦显微镜下观察发现,注入DAPI标记的MSCs 24小时,在脊髓损伤组织血管内出现荧光标记的MSCs;注入后第五天,损伤组织血管及其周围组织有标记的MSCs弥散;注入后第十天损伤组织内有荧光标记的MSCs广泛弥散。免疫组化结果显示:24小时正常对照组见低水平Nogo表达,细胞着色淡。模型组可见大量Nogo表达,且着色深。第七天正常对照组Nogo着色情况没有变化,模型组出现大量Nogo阳性细胞,MSCs治疗组Nogo阳性细胞数少于模型组。至第十五天,模型组Nogo阳性细胞数与第七天比减少,MSCs治疗组与模型组比,Nogo阳性细胞数明显减少且比第七天MSCs治疗组减少;24小时正常对照组可见Bcl-2少量表达,且细胞着色淡。手术及MSCs治疗组均有Bcl-2表达,细胞着色较深。第七天模型组Bcl-2持续高表达,MSCs治疗组Bcl-2阳性细胞数增多,阳性细胞数多于24小时相应剂量组。至术后第十五天,各组Bcl-2表达及着色情况依然表现出此现象。24小时正常对照组见低水平Bax表达,模型组及MSCs治疗组可见Bax表达。第七天模型组Bax持续高表达,MSCs治疗组Bax阳性细胞数减少,至术后第十五天,依然表现出此现象。结论:利用MSCs的贴壁特性成功地从骨髓中分离和纯化,且反复传代后能保持其原有的形态特点和分化能力;成功制备大鼠脊髓损伤模型;MSCs尾静脉注入后,可向损伤组织趋化并定居;MSCs尾静脉注入后,可促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复,对大鼠脊髓损伤具有修复作用;静脉移植MSCs能透过血脑屏障,所以由静脉途径移植MSCs治疗脊髓损伤可能是一条安全的、损伤小的、具有实用价值的细胞移植途径之一;体内实验表明MSCs可以通过抑制Nogo、Bax表达、上调Bcl-2表达,促进损伤脊髓的修复。本研究既丰富了MSCs组织修复的理论及实验数据,又为MSCs应用于临床提供数据和理论依据。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R651.2

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张廷伟;邹云雯;;BMSCs联合人发角蛋白移植治疗陈旧性脊髓损伤效果[J];齐鲁医学杂志;2011年05期
2 王海峰;安沂华;;骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的修复[J];医学综述;2011年10期
3 范东艳;王苹;刘然;陈玉丙;;骨髓间充质干细胞移植和直流电刺激对大鼠脊髓损伤的修复作用[J];中国生物制品学杂志;2011年09期
4 ;本期专题:骨髓间充质干细胞与肝细胞修复及组织重构(本刊中文部)[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年23期
5 ;骨髓间充质干细胞与肝细胞修复及组织重构[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年23期
6 王际容;廖岚;周红;代莉;;脊髓损伤病人轮椅的选用及安全管理[J];护理研究;2011年16期
7 张细顺;;指力刺激在脊髓损伤病人肠道功能重建的应用[J];临床护理杂志;2011年04期
8 张丽芬;敖丽娟;郑琳;魏玲;廖岚;周红;王凤玲;代莉;王文丽;;体位对脊髓损伤病人间歇性导尿后膀胱内残余尿量的影响[J];护理研究;2011年27期
9 林治平;曾荣;胡资兵;林颢;;Wnt信号通路与骨髓间充质干细胞神经分化[J];广东医学;2011年08期
10 ;《英日汉脊柱脊髓医学辞典》已出版[J];中国伤残医学;2011年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈亚平;杨延砚;吴同绚;张巧云;;脊髓损伤的综合康复治疗疗效分析[A];第一届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会暨中国康复医学会脊柱脊髓损伤专业委员会脊髓损伤与康复学组成立会论文汇编[C];2009年
2 王兴盛;;初探手术加补脑膏治疗脊髓损伤5例[A];甘肃省中医药学会2010年会员代表大会暨学术年会论文汇编[C];2010年
3 景小花;张云;;探讨运动疗法在脊髓损伤术后康复中的临床意义[A];首届全国中西医结合骨科微创学术交流会暨专业委员会成立大会论文汇编[C];2011年
4 周治来;陈银海;闵少雄;;康复训练对脊髓损伤大鼠外源性移植的骨髓源性神经干细胞影响的实验研究[A];中国康复医学会运动疗法分会第十一届全国康复学术大会学术会议论文摘要汇编[C];2011年
5 王璐;王吉兴;;神经干细胞移植与氯化锂联合干预修复脊髓损伤的研究[A];第一届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会暨中国康复医学会脊柱脊髓损伤专业委员会脊髓损伤与康复学组成立会论文汇编[C];2009年
6 彭敏;邹育庭;廖公平;;探讨康复对脊髓损伤患者生活自理能力的影响[A];中国康复医学会第七次全国康复治疗学术会议主题报告、学术交流论文汇编[C];2010年
7 吴军发;胡永善;吴毅;;脊髓损伤的康复治疗进展[A];中国康复医学会第四届会员代表大会暨第三届中国康复医学学术大会论文汇编[C];2001年
8 卢爱兰;张夏军;许美飞;;高压氧对脊髓损伤肌张力控制的临床对照研究[A];2011年浙江省物理医学与康复学学术年会暨康复新进展学习班论文汇编[C];2011年
9 胡孝义;;脊髓损伤治疗的研究进展[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年
10 张玉琴;张培元;;儿童无骨折脱位型脊髓损伤诊断的诊断及治疗[A];中国康复医学会第十一次全国颈椎病学术会议论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 编译 于娜;早期脊髓损伤有新疗法[N];医药经济报;2009年
2 记者 乔晓莹;广西首家脊髓损伤者“中途之家”在南宁成立[N];广西日报;2010年
3 本报记者 林洵;脊髓损伤治疗希望源于创新[N];健康报;2010年
4 记者 段涵敏 通讯员 刘永红 刘雨滋;脊髓损伤治疗世界难题有望攻克[N];湖南日报;2010年
5 陈丹;脊髓损伤小鼠成功再生神经通路[N];科技日报;2010年
6 记者 郑亚伟 纪正鸿 俞余乐;莲都成为全国脊髓损伤伤友“中途之家”试点区[N];丽水日报;2010年
7 ;脊髓损伤康复赶早[N];保健时报;2005年
8 ;北京:脊髓损伤发病率过高[N];健康时报;2003年
9 林琳 寒冰;美将进行治脊髓损伤新药临床试验[N];中国医药报;2005年
10 本报记者 吴玲娟;脊髓损伤患者的心理康复[N];保健时报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曲德伟;NT-3基因修饰的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究[D];吉林大学;2007年
2 景元海;大鼠骨髓间充质干细胞在脊髓损伤治疗中的应用及其机制的研究[D];吉林大学;2008年
3 杨海云;脊髓骨髓间充质干细胞促进损伤脊髓修复和神经干细胞的分化[D];吉林大学;2009年
4 冯大雄;静脉移植骨髓间充质干细胞治疗脊髓[D];四川大学;2005年
5 程映华;神经干细胞修复脊髓损伤的组织工程学研究[D];苏州大学;2002年
6 刘成龙;大鼠脊髓损伤后组织基因表达谱动态变化的研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
7 王干;应用组织工程学方法修复脊髓损伤基本问题的研究[D];清华大学;2010年
8 谭太贵;多通道PLGA脊髓再生介导管道治疗大鼠脊髓半横断损伤[D];天津医科大学;2006年
9 王诗波;骶神经前根电刺激重建脊髓损伤后排尿功能的实验研究[D];第二军医大学;2005年
10 赵宁辉;低氧诱导因子1α及其目的基因在实验性脊髓损伤中表达的研究[D];四川大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 贾小力;骨髓间充质干细胞静脉移植对损伤大鼠脊髓VEGF、bFGF表达及血管新生的影响[D];福建医科大学;2008年
2 梁辉;骨髓间充质干细胞移植联合FK506对大鼠脊髓损伤后功能恢复及脊髓再生的研究[D];天津医科大学;2007年
3 黄朱宋;bFGF基因修饰的骨髓间充质干细胞在脊髓损伤动物模型中bFGF表达的实验研究[D];福建医科大学;2008年
4 李建伟;骨髓间充质干细胞移植联合甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A蛋白表达的影响[D];中南大学;2009年
5 黄保胜;组织工程神经复合物的构建及其移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究[D];南京医科大学;2008年
6 陈世杰;BMSCs移植联合应用NT-3对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡及损伤修复的作用[D];中南大学;2009年
7 宋晨阳;利用CXCR-4基因转染促进神经样BMSCs在脊髓损伤鼠体内定向迁移的实验研究[D];福建医科大学;2009年
8 徐小林;静脉移植骨髓间充质干细胞改善脊髓损伤大鼠神经功能及其机制的实验研究[D];天津医科大学;2009年
9 刁延娜;骨髓间充质干细胞移植促进大鼠损伤脊髓的功能恢复[D];中国医科大学;2005年
10 钱荣勋;骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究[D];苏州大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026