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《吉林大学》 2009年
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重组低氧诱导因子-1α对成骨细胞功能调控的实验研究

陆蕴松  
【摘要】: 低氧诱导因子-1α是在缺氧条件下的一个重要的氧依赖转录激活因子,在低氧状态下对成骨细胞的功能有调控作用,在常氧下极易降解,与其降解有关的结构域称之为氧依赖的结构域。本研究通过分子克隆的方法体外重组低氧诱导因子-1α,删除了低氧诱导因子-1α的氧依赖结构域,构建了真核表达质粒pVAX1-HIF-1α,并对重组质粒进行了表达鉴定。将重组质粒pVAX1-HIF-1α转染到原代培养的鼠成骨细胞中,采用各种细胞生物学方法观察了重组质粒pVAX1-HIF-1α在正常氧浓度下对成骨细胞成骨功能调控的作用。实验结果显示,通过RT-PCR和Westernblot的方法,对HIF-1α的靶基因VEGF和成骨标志性基因骨钙素和核结合因子a1的mRNA和蛋白水平检测,以及应用MTT方法和碱性磷酸酶的定量检测,证实重组质粒pVAX1-HIF-1α在正常氧浓度下对成骨细胞的增殖、分化和矿化均有调控功能。本研究为基因治疗骨折愈合提供了新思路。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R68

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