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《吉林大学》 2009年
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反义RNA抑制番茄DHS基因表达的研究

薛健  
【摘要】: 脱氧羟腐胺赖氨酸合酶(deoxyhypusine synthase, DHS)在植物、哺乳动物和酵母细胞中普遍存在,参与真核翻译起始因子eIF-5A (eukaryotic initiationfactor-5A)的翻译后活化。DHS负责将亚精胺的丁胺基团转移到eIF-5A前体的第50位保守赖氨酸残基上,产生稀有氨基酸-脱氧羟腐胺赖氨酸(deoxyhypusine),然后通过脱氧羟腐胺赖氨酸羟化酶(deoxyhypusine hydroxylase,DHH)的作用,将外来的丁胺基团羟化,形成羟腐胺赖氨酸(hypusine)。eIF-5A前体经羟腐胺赖氨酸修饰变成有活性的蛋白。eIF-5A是DHS惟一已知底物,是迄今为止惟一发现的含稀有氨基酸羟腐胺赖氨酸残基的蛋白质。植物、哺乳动物和酵母中的研究表明eIF-5A与细胞增殖及衰老关系密切。抑制DHS基因的表达,可以阻止eIF-5A的翻译后活化,从而产生促进细胞增殖,延缓衰老等效应。 本研究以基因工程模式作物番茄作为试验材料,通过RT-PCR、构建反义表达载体、农杆菌侵染等实验方法,利用反义RNA技术抑制番茄DHS基因的表达,实时荧光定量PCR检测结果表明,DHS基因表达被抑制,而且DHS基因抑制型番茄的叶片叶绿素含量增加,衰老得到延缓。从而为深入研究农作物、药用植物和名贵花卉的衰老延缓以及植物的遗传改良奠定了基础。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S641.2

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