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N-乙酰半胱氨酸对G/GO诱导hRPE细胞氧化应激与凋亡的影响及其机制

朱超  
【摘要】: 糖尿病性视网膜病变(DR)是糖尿病常见的严重并发症,是糖尿病患者致盲的重要原因。糖尿病慢性并发症发病机制的统一学说指出,慢性高血糖导致的氧化应激诱导的细胞凋亡是DR发病机制的中心环节,继而通过多种途径最终导致DR的发生,阻断这一环节便可以阻断DR发生的其他病理进程。因此有效的拮抗高糖导致的氧化应激是保护视网膜免受损伤继而延缓DR发生发展的关键。 本研究以葡萄糖/葡萄糖氧化酶(G/GO)诱导人视网膜色素上皮(hRPE)细胞及链脲佐菌素(STZ)诱发2型糖尿病大鼠为研究对象,通过体外细胞培养和体内动物实验研究两个层面,利用流式细胞术(FCM)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)和免疫荧光双标染色等技术,从细胞、分子水平,凋亡途径及信号转导机制等方面研究发现,G/GO不仅导致hRPE细胞氧化应激损伤、活性氧簇和活性氮簇释放,而且还启动线粒体途径诱导hRPE细胞的凋亡,建立了氧化应激致hRPE细胞凋亡的细胞模型;N-乙酰半胱氨酸(NAC)通过调控线粒体凋亡途径相关基因Bcl-2、Bax、细胞色素C和Caspase-9的表达,激活PI-3K/Akt和NF-κB信号通路,对损伤的hRPE细胞及视网膜组织发挥了有效的保护作用。因此,我们的研究通过探讨早期DR发生、发展的可能原因,以及NAC防治DR的具体作用机制,为研究DR的发病机制及其治疗措施奠定了基础。


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